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文档简介

.食品微生物实验室的基本要求和管理,严纪文jiwen.y,GB4789.1-2010总则:3.1环境,3.1.1实验室环境不影响检测结果的准确性。 3.1.2实验室工作区应明显分为办公区。 3.1.3实验室工作区的面积和总体布局应满足检测工作的需要,实验室布局应采用单向工作流程,避免交叉污染。 3.1.4实验室内温度、湿度、照度、噪音和清洁度等应符合工作要求。3.1.5一般样品检验应在清洁区(包括清洁工作台或清洁实验室)进行,清洁区显示明显。 3.1.6病原微生物的分离鉴定工作应在二级生物安全实验室(Biosafetylevel2BSL-2 )进行。清洁实验室与BSL-2实验室的区别在于百级清洁实验室只对实验环境提出清洁要求,不提供对人员和环境的生物安全保护。 (洁净长椅不能代替生物安全盘)。 一般的食品微生物实验(不进行病原微生物的分离和鉴定)只在洁净实验室进行。 病原微生物的分离与鉴定应在BLS-2实验室进行。 什么是生物安全研究所? 严格遵守实验设备配置、个人防护设备使用(硬件)、标准化操作程序和管理规程等(软件):确保实验因子保持原本本性的综合措施,防止操作生物危险因子的员工受到实验对象保护的周围环境受到污染、生物安全防护的基本原则(三要素)、安全设备、个体防护装置和措施。 实验室的特殊设计和建设要求。 严格的管理制度和标准化的操作程序和规程目标是防止实验室工作人员进入实验对象,防止周围环境受到污染。 生物安全实验室设施的基本要求,必须为实验室的安全运行、清洁和维护提供足够的空间。 实验室墙壁、天花板和地面干净,清洁,防止泄漏,耐化学品和消毒剂腐蚀。 地板必须防滑。 实验台应防水,耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热作用。应保证实验室内所有活动的照明,避免不必要的光和光。 实验室器具要坚固耐用,在实验台、生物安全盘和其他设备之间必须留有足够的空间保持清洁。 需要足够的存储空间。 有足够的储藏空间可随时使用的物品(试剂、煤气等)。 实验室车间外必须有存放大衣和私人物品的设施。 它还需要一个长期使用的存储空间。各实验室需要洗手间,设置在出口处,尽量使用自来水(需要防止咬动物和节肢动物侵入的装置)。 实验室门应当开窗,达到适当的防火等级,自动关闭。 在二次生物安全水平上,靠近实验室的位置必须配备高压灭菌器和其他清除污染的工具。 安全系统应当包括消防、紧急供电、紧急淋浴和洗眼设施。必须考虑设置机械通风系统以使空气单向流动。 没有机械通风系统,实验室的窗户必须打开,防虫纱窗也必须安装。 实验室内需要基本的生物安全设备:生物安全盘(一级或二级)、移动液辅助器、胶乳手套等,百级洁净实验室与BSL-2实验室的不同,百级洁净实验室的清洁度要求:,BSL-2实验室的主要技术指标,注: BSL-3主要实验室对大气的最小负压在-30Pa以下该表中的噪音不包括生物安全柜、动物隔离器的噪音,包括上述设备的噪音,最大不得超过68dB(A )。二级生物安全防护水平(BSL-2 )、二级生物安全防护水平是指实验室操作、安全设备、设施操作我国第三类(少量二类)危害的病原微生物。次生物安全防护水平适合从未知病原体采血、体液和组织检测和研究(可能含有高致病微生物)。BSL-2 :注意实验室设施(次级屏障)、BSL-2实验室、生物安全标志、生物安全柜、胶乳手套的使用、千级无菌实验室、淋浴室、食品微生物无菌室的基本要求和管理、 无菌室的基本建设要求基于本实验室的生物安全等级,无菌室的设计应满足GB50364 (生物安全实验室建筑技术)和GB19489 (生物安全通用要求)的相关要求。 无菌室的大小应该满足检查的需要。 内壁呈亮色,壁面与地面光滑,壁面与地面、天花板连接处呈凹弧形,无间隙,无死角,易清洁消毒。 无菌门口应设缓冲器,缓冲器之间应设非手动洗脸盆,带毛巾。 垫子之间需要足够的面积,使工人能够更换工作服和鞋帽。 无菌室内桌子高约80cm,桌子应保持水平。 桌面无泄漏,耐腐蚀,清洁易消毒。 无菌室内光照均匀分布,台面光照应大于540lx。无菌室内有适当的通风和温度调节条件。 无菌室的推荐温度为20,相对湿度为40%60%。 缓冲室和操作室应设置能达到空气消毒效果的紫外线灯和其他适当的消毒装置。无菌室的管理无菌室在使用前和使用后应进行有效消毒,消毒方法见附录d。 无菌室消毒效果至少每两周验证一次。 应制定清洁、消毒、灭菌、使用、应急处理程序。 请创建环境监测结果,存档并保存。 应立即停止使用违规时间。 微生物实验室的消毒处理方法、无菌室的紫外线消毒为室温2025、220V30W紫外线灯为垂直1.0m、253.7nm紫外线照射强度70W/cm2,在此以下进行更换。 适当数量的紫外线灯,确保每立方米1.5W以上。 消毒紫外线时,无菌室内应清洁干燥。 可无人进行紫外线消毒,作用时间为30min,室内湿度 40,相对湿度 60%时,应适当延长照射时间。 用紫外线对物品表面进行消毒时,必须对照射面直接照射紫外线,达到足够的照射量。 人员关掉紫外线灯后至少能进入30min以内。 按照ISO18953的规定,评价紫外线的消毒和杀菌效果。 用无菌室臭氧消毒封闭无菌室,在无人条件下,采用20mg/m3浓度的臭氧,作用时间应为30min。 消毒后的臭氧浓度0.2mg/m3时,可以进行内部操作。 按照GB/T18202规定测定室内臭氧浓度。 无菌室的空气灭菌效果的验证方法(沉降法)在消毒处理后和展开检查活动之间取样。 取样点的选择应基于人员的流量状况和进行试验的频率。 一般来说,无菌室面积- 30 m 2时,从设定的对角线上选择3点,即中心1点,两端从墙壁1m各取1点的无菌室面积- 30 m 2时,选择东、西、南、北、中的5点,其中东点、西点、南点、北点离墙壁1m。 采样点设置图,在选择的地方,将平板放置在琼脂平板(90mm )或距地面80cm处,开启并暴露15min,然后,用361的恒温培养箱将48h 在检测某种目的霉菌或细菌时,使用选择性琼脂平板(PDA、PALCAM等)。 确定平板上菌落数量,大于设定的风险值,应分析原因,采取适当措施。 培养基和试剂消毒和灭菌培养基通常采用高压热灭菌法,在121灭菌15min,特殊培养基按使用者特殊要求灭菌(如含糖培养基、115灭菌20min )。 一些培养基(如嗜盐琼脂培养基、胆硫乳培养基等)只能煮沸灭菌。 对热敏的培养基和添加物质,必须用超滤的方法过滤除菌。即使型培养基无需灭菌,请参照相关国际标准和供应商的使用说明书直接使用。 器具和设备消毒灭菌温热灭菌:采用高压灭菌器,121灭菌20min,适用于玻璃器具、移液管、塑料瓶等。 按照GB15981规定,评价高压灭菌器的杀菌效果。 干燥灭菌:用干燥箱灭菌,适用于160、灭菌2h、玻璃器具和不锈钢器具等。液体消毒剂消毒:采用适当浓度的自配或商业液体消毒剂对工作台、器具或设备表面进行消毒。 按照GB15981的规定,可以评价自配或商业液体消毒剂的消毒效果。 按照ISO18953的规定,可以监测桌面、器具或设备表面的消毒效果。 实验室废弃物的处理是对培养物及其污染物(如培养基、测试棒、生物鉴定管、血清学鉴定用玻璃板、使用过的移液管芯片、细菌培养皿、注射器等),用适当浓度的自配方或商业液体消毒剂处理一定时间,或在121至少30min高压灭菌,或其他在特殊标记的垃圾袋里装入处理物,直接送到指定的地方。实验动物尸体及相关

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