网织红细胞计数

网织红细胞计数1.项目名网织红细胞计数2.检查的目的2.1观察贫血的疗效2.2监测骨髓移植后骨髓的造血恢复2.3其他疾病联合诊断临床实验室3.检验原理：网织红细胞不是完全成熟的红细胞，嗜碱性核糖核酸物质仍存在于其细胞质中。亚甲蓝在体内染色后，嗜碱的核糖核酸物质仍存在于细胞质中，呈淡蓝色或深蓝网状结构，通过亮焦油蓝或新的亚蓝色。4.性能参数4.1重复性4.2分析计算参数：百分比(%)4.3样本量：染料溶液量=1: 14.4精度5.原始样本系统：全血6.容器和添加剂的类型容器采用真空负压专用抗凝管，添加剂类型为0.109M乙二胺四乙酸钾7.测试和显微镜7.1 10g/L新亚甲蓝(或亮焦油蓝)生理盐水溶液：新亚甲蓝1.0G柠檬酸钠0.4G氯化钠0.85克溶于100毫升双蒸水，混合均匀，过滤备用。7.2显微镜7.2.1商标8.校准程序：显微镜验证和光路系统校准灯泡大约每六个月更换一次。9.程序步骤：9.1样本收集和要求9.1.1标本采集：抽取1.8毫升静脉血，加入到含有乙二胺四乙酸钾溶液的抗凝血真空试管中，轻轻翻转10次，使其充分混合均匀，无凝块和泡沫形成，总量不得超过2 . 00 . 2毫升，并在试管上做标记。采血应避免溶血，采血后2小时内送至临床实验室，必要时应低温运输。标本应该“准确地”收集，以防止组织损伤。9.1.2不合格样品的处理对于凝结、凝结、采血量不符合要求、无条形码或无标识等不合格的样品。距离采集时间超过2小时且未按要求储存的样品，应按照程序文件样品核收、登记和保存程序进行处理9.1.3样本保存试验应在样品采集后2小时内完成，在2 8下保存不超过4小时，分析样品应保存3天。9.2检验前的准备9.2.1按顺序写下接收标本的序列号。9.2.2准备干净、干燥、无尘、无油脂的载玻片、盖玻片、毛细管、玻璃笔。9.3患者标本的检查9.3.1取一个小试管，加入2滴10G/L新亚甲蓝盐水溶液。9.3.2向上述试管中加入2滴外周血(或乙二胺四乙酸钾抗凝静脉血)并混合均匀。9.3.3室温放置10 15分钟后，取1滴，制成薄片。9.3.4在油显微镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。9.3.5计算网织红细胞的百分比=计算1000个红细胞中网织红细胞的数量/1000网织红细胞绝对数量(细胞/升)=网织红细胞百分比*红细胞数量/升笔记1.活体染色时间不能太短。当室温较低时，放置一个37的培养箱。2.最好做两块，每块计数1000个红细胞，以避免不均匀分布造成的误差。涂片应该薄而均匀，没有重叠的红细胞。3.为了方便计数，目镜中可以放一张中间有孔的硬纸，以缩小视野，方便计数。4.试剂应定期重新配制，以避免变质和沉淀。5.染液与血液的比例约为1: 1。在严重贫血的情况下，血液比例可以适当增加。10.质量管理10.1显微网织红细胞视觉兴奋计数误差较大，主要影响因素有：操作者对网织红细胞的理解不同；血液涂片的质量；红细胞的数量和计数方法等。10.2仪器法可计数10，000至50，000个红细胞，但如果存在豪威尔-乔利小体、有核红细胞和巨血小板，则可能出现假阳性。11.干扰12.参考区间网织红细胞百分比成人：0.0050.015新生儿：0.030.06儿童：0.0050.015网织红细胞的绝对数量：成人：(24 84)* 10 * 9/升13.实验室解释：13.1确定骨髓红细胞的造血13.1.1网织红细胞增多症：表明骨髓红细胞生成旺盛。共同点：1。溶血性贫血。当发生溶血时，由于大量网织红细胞进入血液循环，RET可增加至6%8%或更多。当发生急性溶血时，RET可达20%左右，当发生严重溶血时，RET可超过50%，绝对值往往超过100109/L。网织红细胞在急性失血后5 10天达到峰值，2周后恢复正常。2.放疗和化疗后，当造血功能恢复时，可观察到RET是短暂且迅速增加的，这是检测幼年RET变化和骨髓恢复的更敏感的指标。3.在红细胞生成无效的情况下，骨髓检查显示红细胞增生活跃，而外周网织红细胞计数正常或略高。13.1.2网织红细胞增多症：见于再生障碍性贫血和溶血性再生障碍性贫血危象。典型再生障碍性贫血网织红细胞计数低于0.005，网织红细胞绝对值低于15109/L，这是诊断标准之一。13.2贫血疗效观察在缺铁性贫血和巨幼细胞性贫血的治疗中，如果RET增加，治疗有效，骨髓增生功能良好。如果RET不增加，则表明治疗无效，并表明骨髓造血功能障碍，需要进一步检查。RET是贫血患者随访检查的项目之一。13.3骨髓移植后骨髓造血恢复的监测在骨髓移植后的第21天，如果RET大于15*10*9/L，通常表明没有移植并发症。RET小于15*10*9/L，中性粒细胞和血小板增多，这可能是骨髓移植失败的原因。14.安全保护措施14.1操作显微镜时，应根据仪器操作说明进行操作，以防受伤、触电等。14.2染色和打孔时请戴橡胶手套。工作完成后，用消毒剂洗手以避免感染。14.3涂抹时应小心。橡胶手套应该一直戴着，以避免细菌感染。如果样本溅入眼睛或伤口，应使用大量清水冲洗并立即就医。14.4如果在配制染液：时试剂意外落入眼睛，立即用大量清水冲洗并接受处理；如果不慎吞下试剂，应立即寻求医生的帮助，喝大量清水，并尽可能多地吐出吞下的试剂；如果试剂接触到皮肤或手，用大量清水冲洗；丢弃废液和消耗品时，请遵循处理医疗、传染病和工业废水的步骤。如果含有血样，可能会导致细菌感染。15.变异的潜