脑脊液常规操作规程

1.检查的目的指导脑脊液常规测定。2.方法原理2.1脑脊液是存在于脑室和蛛网膜下腔的无色透明液体。因为脉络丛上皮细胞对血浆没有影响血浆中各种物质的选择性分泌和超滤，以及血浆中各种成分对血脑屏障的渗透性是不同的一样的。其中，氯、钠、镁离子和乙醇最容易通过血脑屏障。其次是白蛋白、葡萄糖、钙离子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐；纤维蛋白原、补体、抗体、某些药物、胆红素、胆固醇极难或不可能通过。当中枢神经系统的任何部分发生器质性疾病时，如感染和炎症症状、肿瘤、外伤、水肿和梗阻都会引起脑脊液成分的变化。通过脑脊液科学的研究检查、显微镜检查、化学和免疫学检查以及脑脊液病原学检查可以诊断和治疗疾病。为治疗和预后判断提供依据。2.2脑脊液常规测量包括：颜色、特征、有核细胞计数、红细胞计数和pan姓氏测试、细菌等。2.3潘氏试验：脑脊液中的球蛋白与苯酚结合形成不溶性蛋白盐，生成白色颜色混浊或沉淀。1颜色6中性粒细胞2透明度7淋巴细胞3凝固性8单核细胞4脑脊液有核细胞计数9潘石测验5脑脊液红细胞计数3.方法性能参数(如线性、检测限、测量间隔、不确定度、准确度、精密度、灵敏度和特异性4.样本类型4.1样本类型：新鲜脑脊液。4.2样品拒收条件：拒收在室温下延迟2小时，在冷藏下延迟6小时。4.3标本保存和稳定性：通常，检查在室温下1小时内完成。长期储存会导致细胞破坏并影响细胞计数。和分类检查。5.所需的容器、防腐剂或添加剂、仪器、试剂或分析系统5.1样本容器：BD没有凝结奖励管或带盖的干净干燥玻璃管。5.2试剂5.2.1试剂成分：生理盐水0.9%氯化钠溶液白细胞稀释剂1%冰醋酸(1毫升分析纯冰醋酸蒸馏水至100毫升)刘氏快速赖特染色法液体甲：曙红和甲醇液体b:亚甲蓝潘石试剂10%苯酚溶液(纯苯酚10毫升蒸馏水至100毫升)5.2.2试剂储存和有效期：试剂名称储存条件有效期开瓶有效期位置生理盐水室温1年1年库存柜/血常规室控制台冰醋酸室温两年1年药柜1%乙酸冷藏1年1年试剂冰箱10%苯酚溶液室温1年1年药柜刘氏快速赖特染色法室温两年6个月医药柜/染色控制台5.3仪器：奥林巴斯光学显微镜和血细胞计数板。6.校准程序(计量溯源)不适用7.质量控制、受控产品的使用水平和频率，以及在允许范围内的纠正措施不适用8.程序步骤8.1一般性状检查：脑脊液应轻轻混合，观察数量、颜色、有无凝块和透明度(一般细胞数300/l时间或蛋白质增加会产生浊度)，并记录。8.2显微镜检查8.2.1细胞计数(无凝块样本)(1)透明或微混标本：a)混合均匀后，直接冲进计数池，对四个方格内的细胞总数进行计数号码(包括加拿大皇家银行、纽卡)。b)用白细胞稀释液以11的比例稀释，并计数有核细胞的数量c)红细胞=细胞总数-有核细胞(当白细胞数30 /l时，至少有50个白细胞直接归入白细胞计数池)(2)浊度及以上样品：出现稀释样本量稀释剂/溶解剂粉红色/稍多云1:2020l380l红色/多云1:5010l490l非常高/非常混浊的血容量1:10010l990la)稀释样品：按照上表在干净的试管中稀释，以计数细胞总数；溶解红细胞：按照上表在干净的试管中稀释，以计数有核细胞的数量；(c)冲洗水池；数数d)红细胞=细胞总数-有核细胞8.2.2凝块或粘性样本：(1)用吸管旋转并挤压凝块，挤出其中的液体和细胞。(2)以2000转/分的速度离心5分钟，分离上清液和沉淀物。(3)将沉淀物混合均匀，涂片，高倍观察细胞核抗原和红细胞。(4)报告每个高功率场中的红细胞和有核细胞的数量。8.2.3离心获得沉淀物和上清液：计数后离心脑脊液，以2000转/分钟离心5分钟，吸出将透明液体放在另一个试管中，并在试管上编号。8.2.4 Reyes染色：当细胞核106/ l时进行操作。将沉淀物混合均匀并涂片，根据岩心厚度而定细胞的数量视情况而定，带血的标本可以考虑进行推送。干燥后，使用Wright染色进行分类(评分100 NUCL)；)；如果有无法分类的细胞或怀疑有恶性细胞，请咨询我们。上级主管应由有经验的上级主管进行分析，报告应单独描述。如脑膜白血病或肿瘤细胞。8.3潘石试验8.3.1试验操作：取一小试管，加入约5ml 10%的石碳酸水溶液，并使用一次性吸管。加入一滴脑脊液上清液，立即在黑色背景光下观察结果。8.3.2结果判定：阴性：清晰透明。弱阳性():微白色雾，黑色背景可见。正():灰白色云。(2):白色混浊。(3):白色厚絮状沉淀。(4):白色凝块。9.计算结果的原则9.1颜色9.1.1红色：常见于刺伤或出血性病变。应注意区分蛛网膜下腔出血和穿刺损伤：(1)离心沉淀后：上层液体为黄色，潜血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血。流血，而且流血时间已经超过4个小时了。如果上层液体是透明无色的，红细胞就会全部下沉。在管底部，穿刺出血或病理变化引起的新出血是最常见的。(2)红细胞收缩不仅见于陈旧性出血，也见于穿刺损伤引起的出血。到，由于脑脊液渗透压高于血浆。9.1.2黄色：可由陈旧性蛛网膜下腔出血或脑室出血、椎管阻塞、化脓性脑膜炎、肺结核引起脑膜炎、核黄疸等严重病例。9.1.3白色或灰白色：主要由于白细胞增多，常见于化脓性脑膜炎。9.1.4棕色或黑色：常见于脑膜黑色素瘤。9.1.5绿色：可见于由绿脓杆菌、肺炎链球菌和甲型链球菌引起的脑膜炎和高胆固醇血症存活率和化脓性脑脊髓液。9.2透明度：脑脊液混浊的程度与细胞数量有关，当脑脊液中的细胞数量超过30010个/升时，可能会出现这种情况多云。当蛋白质含量增加或含有大量微生物时，也会发生混浊。9.3凝固：结核性脑膜炎静置12-24小时后，标本表面形成细网膜。蛛网膜下腔当阻塞发生时，会产生黄色果冻。9.4潘氏试验：脑组织和脑脊髓炎等疾病常呈阳性反应，如化脓性脑脊髓炎和梅毒中枢神经系统疾病、脊髓灰质炎、流行性脑炎等。脑出血发生时，通常呈阳性反应。如果创伤性血液混入脑脊液，也是阳性的。9.5细胞分类：9.5.1中枢神经系统疾病的脑脊液可能有更多的细胞，其增加程度、细胞类型和病理变化大自然。9.5.2在中枢神经系统病毒感染、结核性或真菌性脑脊髓炎的情况下，细胞数量可适度增加。淋巴细胞通常是主要类型。9.5.3当细菌被感染时(化脓性脑脊髓膜炎)，细胞数量显著增加，主要是中性粒细胞。9.5.4寄生虫病中可见更多的嗜酸性粒细胞。9.5.4脑室内出血或蛛网膜下腔出血时，脑脊液中可见到大多数红细胞。10.生物参考区间颜色苍白的透明度透明的凝固性没有凝块潘石测验阴性或弱阳性有核细胞计数(CSFNUCL)成人(0-8)106升中性粒细胞成人(0-6%)儿童(0-15)106升新生儿(0-8%)新生儿(0-30)106/升淋巴细胞成人(40-80%)单核细胞成人(15-45%)新生儿(5-35%)新生儿(50-90%)红细胞计数010/L(正常脑脊液中的白细胞主要是淋巴细胞和单核细胞，比例约为733603，其中可含有很少的中性颗粒细胞)。11.警告值和临界值(如果适用)12.测试结果可以报告给间隔13.超出可报告范围的结果的处理13.1如果检测到细菌，应建议进行培养确认。13.2如果存在无法分类的细胞，应咨询主管并描述单独的报告，如脑膜白血病或肿瘤细胞。14.实验室解释15.安全保护措施15.1所有样本应被视为潜在的传染性样本。15.2测定完成后，将上清液和沉淀物试管浸泡在2000毫克/升的有效氯消毒剂中4小时以上，然后倒入医疗废物池由医院统一消毒。医疗废物如容器如塑料试管或容器被倒入贴有标签并密封的黄色医疗垃圾袋将被医院销毁。15.3原液应储