《疫毒理学》PPT课件.ppt

第十章免疫毒理学,公共卫生学院卫生学教研室,一、概述,1.免疫毒理学的发展及定义早期的免疫损伤现象：青霉素过敏、面包师疱疹1977年：Vos将外源化学物对免疫系统损伤与毒理学联系起来1984年：,国际化学品安全规划署欧共体委员会,免疫系统是毒性损伤的靶的研讨会,immunotoxicology,免疫毒理学：immunotoxicology是应用毒理学与免疫学的理论及实验手段研究外来化学物等有害因素对机体免疫系统结构和功能的影响及其作用机制，并评价这些有害因素的免疫毒性和或针对其损害提供防治措施的科学。,2.免疫毒理学的研究内容,免疫损伤及其机制免疫损伤评价的方法学研究免疫损伤的危险度评价,二、免疫系统对外源化学物的毒性反应与机制,免疫系统的组成,免疫器官：胸腺、骨髓、脾、淋巴结、弥散的淋巴组织,免疫细胞：T细胞、B细胞、NK细胞单核吞噬细胞,免疫分子：免疫球蛋白IgA,IgM,IgA,IgD,IgE补体细胞因子:IL-112,IFN-,TNF,1.免疫系统的组成和功能,免疫系统的功能,.识别并清除入侵的病原体及毒素,.清除体内产生的肿瘤细胞,维持内环境的稳定,2.免疫损伤,免疫抑制(immunosuppression),自身免疫(autoimmunity),超敏反应(hypersensitivity),1.免疫抑制:主要表现：抗感染能力肿瘤易感性,2.常见的免疫化合物:多卤代芳烃、多环芳烃、药物、农药、嗜好品等,（一）免疫抑制,3.化学毒物的免疫机制,直接作用：损伤免疫细胞：损伤骨髓干细胞，使免疫细胞生成减少：苯可导致白细胞减少和种类平衡失调损伤中枢和外周免疫器官的淋巴细胞：许多重金属可直接损伤B细胞，抑制体液免疫干扰免疫应答过程：影响细胞膜表面分子：（受体、酶、表面特征分子）干扰细胞因子网络调空系统,间接作用：影响神经内分泌系统,神经系统,内分泌系统,免疫系统,免疫调节,继发于其他靶器官的毒性,代谢活化,（二）超敏反应,1.过敏反应的类型:速发型：致敏细胞释放血管活性物质毛细血管通透性改变导致腺体分泌增强哮喘、鼻炎细胞毒型：IgGorIgM带有相应抗原靶细胞,结合，活化补体，溶解细胞,贫血、血小板减少,免疫复合物组织中沉淀迟发型：致敏TD细胞释放淋巴因子单核巨噬细胞浸慢性炎症如：接触性皮炎,免疫复合型：,抗原抗体,浸润、释放水解酶,如：慢性肾小球肾炎,2.超敏反应的主要表现：过敏性皮炎：“面包师疱疹”职业性哮喘：甲苯二异氰酸酯,3.超敏反应的机制,（三）自身免疫反应,自身免疫反应是指机体对自身组织成分或细胞抗原失去免疫耐受性，导致自身抗体产生，对自身组织进行病理性免疫应答，引起组织结构的损伤。有明显的遗倾向。,自身免疫疾病,1.自身免疫的主要表现,外源化学物,自身免疫应答,遗传、营养,器官特异性疾病胰岛素依赖性糖尿病多发性硬化症,非器官特异性疾病系统性红斑狼疮类风湿性关节炎,是否针对某一器官,是,否,2.常见的外源化学物,药物：青霉素、本妥英、普鲁卡因工业化学物：氯乙烯、石英环境化学物：多氯联苯、多溴联苯、重金属,3.发生机制,化学毒物,使机体失去自身银免疫耐受,自身抗体或自身应答性TC,免疫复合物或免疫损伤,自身免疫性疾病,针对血细胞溶血,抗自身甲状腺素受体甲抗,抗肾小球基底膜胶原抗体肾小球肾炎,常见病,.自身隐蔽抗原的暴露、释放或改变自身抗原。如吸烟损伤毛细血管的上皮细胞，肺基地膜暴露.病毒或细菌交叉抗原的存在.影响机体的免疫调节.其他因素（感染、遗传、膳食等）,三.免疫毒性检测方案,检测方案原则:能全面反映化学毒物对免疫系统的损伤,评价药物的免疫损伤包括,免疫抑制过敏反应自身免疫免疫源性不良免疫刺激,1.免疫抑制,骨髓抑制,免疫器官重量和组织学改变,血清球蛋白降低,感染反生率增加,肿瘤发生率增加,免疫功能检测,溶血空斑试验,ELISAS试验,免疫原性：immunogenecity是指外源化学物引起免疫反映的能力。,免疫原性与分子量有关：,分子量免疫原性10,000强5,000-10,000稍弱1,000-5,000难估计1,000半抗原,2.免疫原性,3.超敏反应,超敏反应:常用的方法有:被动皮肤过敏试验主动皮肤过敏试验主动全身过敏试验,被动皮肤过敏试验:,动物经皮肤接触化学物,分离血清,注射到同种动物体内,观察过敏情况,注射同种化学物,、超敏反应没有很好的检测方法：,：豚鼠最大值试验和Buecher试验（局部封闭涂皮法）,豚鼠最大值试验：,豚鼠颈背脊柱两侧脱毛,福氏完全佐剂（FCA）受试物受试物与FCA的等量混合物,注射部位涂受试物第二次致敏,用涂以受试物的滤纸，再次贴敷在上背部两，激发接触,进行皮肤反应强度评分,4.自身免疫检测,目前还没有预测药物自身免疫反应的方法，但常用的有：鼠国窝淋巴结试验和局部淋巴结试验,5.不良免疫刺激,指化学物对免疫系统某些成分的任何抗原非特意性的、不适当的或难以控制的活化作用。,四.免疫毒性实验方法与评价,目前还没有一种试验方法能全面反应化学物对整个免疫系统的影响,因此用一组试验来检测.,实验组合一般要包括以下几个方面,.免疫器官重量和形态学改变.淋巴组织、骨髓和外周血白细胞细胞结构的定量改变.免疫细胞效应和调节功能的损害.对病原体和移植瘤的易感性增加,（一）免疫学方法,1.免疫病理学检查,主要检查项目：,.外周血白细胞记数与分类.主要免疫器官的组织学检查.细胞表面标志的检查,2.免疫功能评价,NK细胞活性的测定,接触外源化学物脾细胞和未接触外源化学物脾细胞,Cr标记的细胞,测量培养液中核素强度，评估NK细胞的活性,巨噬细胞功能检测:,巨噬细胞贴壁生长,51Cr-鸡红细胞,共同孵育,弃去上清夜,加氯化铵短暂培养，去除未倍吞噬的鸡红细胞,加NaOH溶解红细胞，测量核素强度,体液免疫功能的评价：,受试物免疫动物，然后检测抗体的生成量或抗体形成细胞数,细胞功能评价:,常用方法有,细胞毒性T细胞杀伤实验迟发型超敏反应淋巴细胞增殖试验,细胞毒性T细胞杀伤实验:,目的:评价脾T细胞识别和溶解经抗原处理靶细胞的能力,经丝裂霉素处理的P815肥大细胞,脾淋巴细胞,收集致敏细胞毒性T淋巴细胞,51Cr-P815肥大细胞,测量培养液中放射性强度,宿主抵抗力试验,检测对不同病原体和同种移植肿瘤的能力,3.超敏反应和自身免疫反应检测,型超敏反应,主动皮肤过敏实验被动皮肤