肾脏标志物临床应用——陈诚

肾脏标志物Renal Biomarkers,陈诚售后工程师2014-09-29,我国肾脏病现状,中国的肾脏病患者约有1. 5亿，其中慢性肾病患者1.195亿，虽然不同地区的患病率差异较大，总患病率约为10.8% 2013年中国糖尿病人数达9800万，糖尿病发生率居世界第二，有约1/4的糖尿病患者会出现糖尿病肾病，约占总肾脏患者比例的16%； 慢性肾脏疾病已经成为全球范围内的公共健康卫生问题。慢性肾脏疾病以其低知晓率、高发病率、高死亡率而被称作是“沉默的杀手”。,肾脏生理学,肾脏生理学,肾功能评价和肾功能标志物,临床评价肾脏疾病进展和严重程度，一般以肾功能为参考，肾功能一般以肾小球滤过率（GFR）反映 GFR: 在一定时间内通过肾小球的血浆量，定义为在单位时间内肾脏将若干容积血浆内的物质从体内清除，其单位一般为ml/min，成人约为 125 ml/min GFR不能直接测定，必须借助某物质的肾清除率来反映,mALb,NGAL,CysC,2-MG,新型标志物正在成为评价肾功能的新宠儿,1. 微量白蛋白 mAlb,白蛋白是一种血液中的正常蛋白质，但在正常生理条件下基本上不能通过肾小球滤过屏障，而99%滤过的尿微量白蛋白又被近曲小管重吸收，尿液中仅出现极少量白蛋白 尿微量白蛋白尿表明肾脏异常渗漏蛋白质，不仅反映肾小球滤过功能的损伤，而且也反映肾小管重吸收功能的损伤 尿微量白蛋白排出量增加时疾病早期的改变，对疾病的早期诊断，早期治疗有重要的参考价值和临床意义,蛋白尿分级,mAlb指尿中Alb排出量在20-200mg/L（或白蛋白排泄率20-200g/min ）范围内，即已超出正常上限（20mg/L）但尚未达临床蛋白尿水平的中间阶段。尿常规试条的蛋白定性通常为阴性或弱阳性。,白蛋白检测方法,传统的白蛋白检测：尿试条 定性检测：大于200mg/L才显示阳性，已经出现临床症状，并且病情已经不可逆转 对于早期检测：意义不大新方法：荧光免疫法 定量检测：早期没有临床症状时就可检测出白蛋白变化，此时病情尚可逆转 对于早期检测：有很重要的意义,尿微量白蛋白的临床应用,糖尿病肾病、高血压肾病等的早期肾脏受损的表征；微量白蛋白尿也是整个血管系统改变的征象，肾脏和心血管系统改变的早期指征；妊娠诱发高血压肾损伤的监测；对移植后的功能检测、区分肾小球与肾小管疾病具有重要意义，是判断肾小球损伤的一个重要指标。,14,尿中微量白蛋白的稳定性,尿中微量白蛋白4贮存可稳定1-8周冷冻后一些尿样偏低冷藏或冷冻复溶后应充分混匀（至少3-4次颠倒混合）尿样有浑浊应充分离心沉淀后取上清液测定，否则结果偏高,尿微量白蛋白的测定时间,糖尿病患者首次阳性则应在3-6个月内再测2次以上；如其中有2次阳性则为早期糖尿病肾病；1型糖尿病：发病5年后，每年测1-3次；2型糖尿病：确诊时，1-3次/年；仅微量蛋白尿阳性者：每3个月随访检测；正常人：每年检测一次。,肾脏标志物: microalbuminuria (mAlb),2.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL),中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL),又称人脂质运载蛋白2(lipocalin 2,Ln2)或噬铁蛋白(siderocalin),是人脂质运载蛋白家族中的一员NGAL生理状态下是一种生长因子，主要参与了早期肾脏上皮的发生、生长。在正常组织包括肾脏，肺，胃及结肠的上皮组织中表达量较低,AKI的分期标准,当前诊断AKI的主要困扰,流行病学研究发现，在普通住院患者中AKI发病率为3%-5%，而ICU中更是高达30%-50%。诊断AKI的有效方法主要集中在以血清肌酐（SCr）和尿量等为主的几个诊断指标上，这些指标的诊断作用相对于AKI的发生较为滞后或特异性较低。AKI早期诊治是当前相关科室所急待深入研究和重点解决的问题之一。,NGAL与急性肾损伤（AKI）,NGAL升高较早期肾脏损伤的其他指标如2-微球蛋白等出现得要更早（2h以内可检测出），是急性肾损伤早期诊断标记物NGAL检测AKI，其敏感性为90%，特异性为99.5%，而肌酐在AKI时上升可能需要1-3天的时间NGAL 水平与肾脏损伤程度呈正相关，血和尿NGAL 可作为诊断AKI 的早期、敏感、特异性的早期生物学标记物，并在一定程度上可以反映AKI 严重程度及判断预后,NGAL与慢性肾脏病（CKD）,NGAL的临床应用,急性肾损伤新的早期诊断标志物对慢性肾脏病、继发性肾脏病具有诊断及预警意义检测肾脏病治疗效果及病变程度评估肿瘤性疾病中具有明确的组织特异性与心血管疾病的发生发展相关,常见参考值：一般浓度大于150ng/mL可诊断患者处于AKI高风险大于350ng/mL，该患者处于肾脏替代治疗高风险,肾脏标志物: neutrophils gelatinase associated lipocalin (NGAL),3.胱抑素C CysC,胱抑素C（CystatinC，简称CysC）亦称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C，是一种由120个氨基酸组成，分子量为13kDa的低分子量、碱性非糖化蛋白质。 编码Cys C的基因属于管家基因，能在所有的有核细胞内以恒定速度持续转录与表达，无组织特异性（包括肾、肝、胰、肠、胃、肺及胎盘等）。Cys C广泛地存在于各种体液中，脑脊液中浓度最高，尿液中最低,代 谢 特 点,产生速率恒定，不受年龄、性别及营养状态的影响；自由通过肾小球滤过，无肾小管分泌；在近曲小管能全部被吸收；吸收后被完全降解，不再进入血循环。,CysC与Scr作为GFR标志物的特征,Cys-C的临床应用,肾脏病早期诊断；肾移植患者监测；化疗中肾功能监测；糖尿病肾病检测；高血压患者早期肾损伤检测；儿童肾病的检测;肝硬化肾功能评估.,血CysC AUC=0.907, Scr AUC=0.862. 血清胱抑素C和血肌肝反映GFR的比较GFR 血肌肝血cystatin C89-71ml/min 全部正常45%-70%正常70-61ml/min 50%左右正常 90%以上异常61-51ml/min 24%左右正常 100%异常,GFR的计算公式,通过CysC检测结果估算肾小球滤过率（GFR）：GFR(ml/min/1.73 m2)=84.69(cystatin C(mg/L)-1.680若病人年龄在14岁以下，那么结果应乘上青春期因子1.384。,肾脏标志物: Cystatin C (CysC),4. 2-微球蛋白 （2-MG）,2微球蛋白（2-MG）是由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白，分子质量为11800，分子内含一对二硫键，不含糖，广泛存在于血浆、尿液、脑脊液、唾液以及初乳中，含量极微,代 谢 特 点,正常人2微球蛋白的合成率及从细胞膜上的释放量 相当恒定;2微球蛋白可以从肾小球自由滤过，但近999 % 的2微球蛋白在近端肾小管又被重吸收，故正常情 况下2微球蛋白的排出量保持稳定水平,血/尿2MG的区别,血清2微球蛋白的升高可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况；尿液中排出2微球蛋白增高，则提示肾小管损害或滤过负荷增加参考范围 血清：0.91-2.2 mg/L 尿： 0-0.2 mg/L,肾移植与血/尿2-MG的关系,肾移植后连续测定血、尿2-微球蛋白可作为肾小球和肾小管病变的敏感指标患者术后的2-微球蛋白明显增高，提示机体发生排斥反应,血2-MG检测的