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文档简介
比较植物组织培养和动物细胞培养、全能性、增殖性、固体、液体、蔗糖、动物血清、细胞株、细胞系、细胞或细胞分泌蛋白等,我们知道新植物细胞杂种(马铃薯番茄)、融合原生质体AB、细胞壁再生、植物细胞融合、杂交细胞AB、人工诱导、动物细胞能融合吗?如果是,它们是一样的吗?2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体,将问题纳入课堂?2.2动物细胞工程,自主阅读,p52自然第2段,思考以下问题:什么是动物细胞融合?(概念要点)两个或多个动物细胞一个细胞(杂交单核细胞),动物细胞融合,动物细胞融合过程,1。动物细胞融合(细胞杂交),1。概念:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。结果:形成单核细胞的杂交细胞原理:细胞膜的流动性物理方法:离心,振动,电刺激化学方法:聚乙二醇(PEG)生物方法:灭活病毒思考和讨论:为什么用于细胞融合的病毒需要灭活?不停用可以吗?因为灭活的病毒可以重新排列细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子,细胞膜打开,细胞融合。如果病毒没有被灭活,它将感染细胞,并且不能诱导细胞融合。动物细胞a动物细胞b,诱导,融合,两个完全杂交细胞AB,有丝分裂,(膜融合,定性融合),(核融合),注意:动物细胞的融合还需要将两种细胞的多个放在一起,在它们随机融合后,从它们中筛选出杂交细胞。6,意义:突破有性杂交方法的限制,使远缘杂交(种间,属间,种间,动物和植物)成为可能。应用:它已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培养新生物品种的重要手段,特别是利用杂交瘤技术生产单克隆抗体。动物细胞和植物细胞的区别在于细胞壁的全能性有限,杂交动物不能发育。动物细胞杂交和植物细胞杂交的区别在于,不去除细胞壁,新的动物个体就不能发育。植物细胞杂交和动物细胞融合的比较可以获得杂交植物。细胞膜流动性、细胞膜流动性、细胞全能性、细胞壁去除后的原生质体融合诱导、细胞分散后的细胞融合诱导、物理(离心、振荡、电刺激)化学(聚乙二醇)、物理和化学方法(同左)灭活病毒,主要用于制备单克隆抗体1、抗体1.1概念:抗体是机体受抗原刺激后产生的具有免疫功能的免疫球蛋白,能够与抗原特异性结合。1.2来源:B淋巴细胞。(2)单克隆抗体,B淋巴细胞与抗体的关系:(1) B淋巴细胞受抗原刺激后能产生抗体。2.动物体内的b淋巴细胞能产生超过一百万种抗体,而且每种抗体对特定抗原都有特异性免疫。3.每个淋巴细胞只能产生一种抗体。独立阅读P52:传统的抗体生产方法和缺陷是什么?如何解决这个问题?单克隆细胞:由一个细胞的无性繁殖(多次有丝分裂)形成的一组细胞,称为克隆细胞或单克隆细胞。2.单克隆抗体的概念。单克隆抗体效应子B淋巴细胞无性繁殖形成的细胞群产生一种化学性质单一、特异性强的抗体,即单克隆抗体。为了获得大量的单一抗体,必须克隆一个单一的B淋巴细胞以形成细胞群。1975,米尔斯坦和科尔杂交瘤技术,3。原理:杂交瘤细胞具有双亲的特征,即它们可以快速大量增殖,并且它们可以具有足够数量的单个抗体。4、工艺,B淋巴细胞骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B细胞,B-肿瘤细胞,肿瘤-肿瘤细胞,选择性培养,杂交瘤细胞(B-肿瘤细胞),克隆培养,抗体检测,杂交瘤细胞,体外培养,单克隆抗体,6。单克隆抗体的应用:特异性强、灵敏度高、产量高,作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质,并结合特定优势:准确、高效、简单、快速;用于携带药物:制成“生物导弹”,治疗疾病:主要用于癌症治疗;5、单克隆抗体的特点:思考问题:1、在这个过程中使用什么原则?免疫原理、细胞融合原理和动物细胞培养原理。这样融合的杂交瘤细胞继承了亲代细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且具有无限增殖的能力,因此可以获得大量的单克隆抗体。2.为什么小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?什么?你还记得单克隆抗体的强特异性和高敏感性的优点吗?动物细胞融合最重要的目的是(a)克服远缘杂交的不相容性(b)制备单克隆抗体(c)培养新物种(d)产生杂交细胞(2)。在动物细胞融合过程中使用的被诱导剂灭活的病毒的抗原性和传染性的存在或缺乏是:(a)丧失抗原性和传染性;(b)具有抗原性和传染性;(c)丧失抗原性和传染性;(D)具有抗原性;(b)丧失传染性;(D)课堂实践;(3)单克隆抗体是指(a)由单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体;(b)由单个b淋巴细胞增殖产生的抗体;(c)由单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单个抗体;(D)通过克隆产生的大量抗体当产生单克隆抗体时,可以通过向培养液中加入一些试剂来筛选杂交瘤细胞。因为试剂()a .能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制,b .能防止淋巴细胞原癌基因的激活,C .能选择性地抑制骨髓瘤细胞的DNA复制,d .能防止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成,C,C,5,“生物导弹”指的是()a .单克隆抗体b .杂交瘤细胞c. b淋巴细胞产生的特异性抗体d .抗癌药物连接到单克隆抗体d,6。科学家利用小鼠骨髓瘤
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