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文档简介
基因的基本功能是什么?Thecamelecow,定向基因改造构想,能固定这种植物空气中的氮吗?细菌能“吐出”丝绸吗?微生物能制造胰岛素和干扰素等贵重药物吗?经过3,多年的努力,科学家们在20世纪70年代创造了新技术基因工程。为什么可以把人类基因导入大肠杆菌?为什么可以在大肠杆菌内表达人类基因?基因工程基础:(1)DNA的规则双螺旋结构是基因工程的物质基础;(2)其他生物共享密码子集是理论基础。(3)载体和工具酶的发现为基因工程提供了技术基础。工具酶的发现和基因工程的诞生,使生物的遗传物质DNA分离,在体外切割DNA分子,结合生物的基因,改造和重组生物的基因,然后将重组的DNA(基因)注入适当的受体细胞,使重组基因在受体细胞内表达,产生人类需要的基因产物(蛋白质、多肽、酶等),基因工程,基因剪接技术或DNA重组技术,体外,基因,DNA分子水平,人类所需的基因产品,切割,剪接,导入,表达,基因重组,基因工程概念,基因工程培育抗虫棉的简单过程:普通棉花,表达,转基因抗虫棉,抗虫棉,一般棉,遗传工程从抗虫棉细胞中提取抗虫基因,2:抗虫基因和载体DNA连接,3:引入抗虫基因受体第一阶段工具:第二阶段工具:第三阶段工具:基因剪刀限制性内切酶基因缝合DNA连接酶基因携带工具转运载体,基因剪刀限制性核酸内部酶在1970年初从细菌中分离出来。1994年,分为2300多种,200多种主要从微生物中分离出来。一种限制性内切酶识别一个特定的核苷酸序列,在特定的接触点切割DNA分子。eco rigaat TC CTT AAG-bam hi-gg ATCC 3354 cc tagg识别反向重复序列,将其截断并形成粘性末端。转基因工具,限制性内切酶生态ri,限制酶切割哪个部位的键?磷酸二酯键(梯子的扶手)的连接部分,代替氢键(梯子的踏板)。结果是两个DNA的同一个粘性末端连接在一起。基因针线活DNA连接酶,将外源基因转移到受体细胞。一般来说,运送体量噬菌体、动植物病毒等基因的运输工具载体。1.目的将基因注入受体细胞后,如果不能复制,会发生什么?2 .作为载体,没有切割部位会怎么样?如何知道目标基因是否进入了受体细胞?如果载体对受体细胞有害呢?归纳,1。可自我复制,2 .有切割部位,3 .有标记基因,4。对受体细胞无害。质粒在细菌、酵母等生物中可以在细胞染色体外自行复制的双链DNA分子细菌比细菌的DNA小得多,拥有少量的基因。有抗生基因,抗细菌的质粒与宿主细胞关系的质粒的存在对宿主细胞没有任何影响。质粒克隆只能在宿主细胞内进行。质粒(最常见的载体),质粒分子结构图征是什么,基因工程是什么?转基因工具酶主要是什么?基因的剪刀是什么?主要角色是什么?基因的针线活是什么?主要角色是什么?基因的载体是什么?最常用的运输工具是什么?质粒的结构是什么?基因操纵的基本阶段,1。提取目的基因,化学方法合成,目的基因的序列在胰岛素基因或PCR扩增目的基因库中寻找,用限制性酶切割,用同种限制酶切割,目的基因插入质粒切口,放入适当数量的DNA连接酶,重组DNA分子,质粒,目的基因,粘性末端暴露,粘性末端暴露,粘性末端暴露目的基因和转运载体为DNA重组阶段(质粒例子),至少剪多少个键?剪几个钥匙?用同种限制酶切割的很多目的基因与很多质粒混合,加上DNA结合酶,会发生什么样的结合?(假定两个连接在一起),3 .将重组DNA分子引入受体细胞方法物理:基因枪、微注、电刺激等;化学:磷酸钙沉淀、氯化钙、脂质体等;生物学:病毒感染、细菌感染等;常用受体细胞细菌质粒大肠杆菌土壤农杆菌等细菌酵母质粒酵母噬菌体细菌动物动物动物病毒3354动物细胞植物病毒植物细胞,受体细胞(细菌)氯化钙处理细胞壁的通透性增加重组质粒导入受体细胞目的基因随受体细胞增殖而复制目标基因受体细胞筛选方法可以检测有无标记基因,判断是否引入了目标基因。由具有青霉素耐药的质粒和外源DNA组合形成的重组DNA分子可以检测受体细胞是否有青霉素耐药。5目的基因的表达重组DNA分子(目的基因)进入受体细胞后,受体细胞表现出特定的性状,产生特定的蛋白质。基因操纵的基本步骤图,基因工程的成功可以说明任何问题1。不同的基因可以结合,这表明基因全部由4个脱氧核苷酸构成。2 .一个生物体的基因可以在另一个生物体中表达,而不影响其他基因的表达。这可以解释基因是具有遗传效应的DNA片段,具有一定的独立性,各种生物共享一
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