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文档简介

熟悉技能训练常用培养基制备、培养基制备的基本步骤，制备常用培养基，包括实际训练目标、高压蒸汽灭菌器、电热干燥箱、电炉、天秤、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶等仪器材料、方法步骤，(1)肉汁培养基(2)琼脂培养基(3)半固体培养基(4)血液培养基， 培养基的制备方法顺序称量熔融调节PH分注灭菌无菌检查的初步计算，(1)肉汁培养基(2)琼脂培养基(3)半固体培养基(4)血琼脂培养基、(1)肉汁培养基、1 .成分牛肉糊35g、蛋白胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000ml。 2、制法牛肉糊、胨、氯化钠加入蒸馏水后加热溶解。 将pH值矫正到7.47.6，进行分注。 放入高压蒸汽灭菌器，在121.3灭菌20min即可。 3 .用途有助于一般细菌的生长，同时也是一般培养基的基础原料。 营养供给要求较高的细菌分离培养，也可用于溶血性的观察和菌种的保存。(二)固体琼脂培养基1 .计算： 1000ml蒸馏水中加入31.3g营养琼脂粉，根据培养基需要量决定营养琼脂粉的用量。 营养琼脂粉量=31.315n/1000(g )中，15表示平板需要约15ml营养琼脂的n表示制作的培养基平板的数量，2 .称量：用普通天平准确测量营养琼脂粉的量，用量筒准确测量蒸馏水的量，必须尽量准确。3.熔融：将营养琼脂粉和蒸馏水放入搪瓷槽中，用电炉加热熔融，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉中取出，泡沫消失后用电炉加热，注意不要洒出琼脂，煮沸23次。4 .分注：倒平板或反试管应将平板培养基倒入培养皿中，每片约15ml，刚好容易复盖平盘底。 将斜面培养基放入试管中，用试管的1/3的量包起来。 加栓后，试管通常每7根卷起牛皮纸或报纸，用绳子捆扎。 三角瓶塞住后也用牛皮纸包起来了。 为了使用时容易融化，以成活的形式紧紧地拉紧。 用标记标明培地名、调制日、调制人、实验组。 灭菌时包牛皮纸，5 .灭菌：用高压灭菌器灭菌，包好，直立放入内筒，在121.3灭菌20-30min。 灭菌结束后，把平板培养基放在桌子上，凝固前不要动试管培养基做成斜面，凝固前不要动。6 .无菌检查：随机抽取一些平板或试管的培养在温箱中培养24小时，无菌生长即合格。 7 .备用：将合格培养基放入冰箱，在0-4保存备用。(三)半固体培养基、肉汁培养基中加入0.3%0.5%琼脂粉制作，观察菌种的保存和细菌的运动性。(四)血液琼脂培养基将灭菌后的营养琼脂冷却至4550，通过无菌操作，加入5%10%的无菌血液(
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