2014年多氯联苯检测方法

辽宁省疾病预防控制中心理化检测所 多氯联苯(polychlorobiphenyls，PCBs) 别名： 氯化联苯，我国习惯上按联苯上被氯取代 的个数将PCB分为三氯联苯(PCB3)、四氯联 苯(PCB4)、五氯联苯(PCB5)、六氯联苯 (PCB6)，是一种持久性环境污染物，在斯德 哥尔摩公约中被提出严禁使用，其化学性 质稳定，难降解。由于多氯联苯可以通过 水体中生物食物链的富集作用，其在鱼类 体内浓度累积到几万甚至几十万倍。 多氯苯同时损害人类的免疫系统并被列为可能的 致癌物质，其毒性主要表现为：影响皮肤、神经、 肝脏，破坏钙的代谢，导致骨骼、牙齿的损害， 并有慢性致癌和致遗传变异等的可能性。由于二 噁英样PCBs的测定需要采用高分辨质谱，难以在 普通实验室推广，为此联合国GEMS/FOOD中规 定了PCB28 、PCB52、 PCB101、 PCB118 、 PCB138、 PCB153、PCB180作为PCBs污染状况的 指示性单体（indicator PCBs）进行替代性监测 目的 通过监测发现垃圾焚烧对食品可能产生的 危害； 通过监测了解工业化生产对食品的不良影 响； 通过监测发现我国居民主要消费的大宗食 品中受持久性有机污染物污染最严重的食 品。 开展地区 指示性多氯联苯指示性多氯联苯 近海产海水鱼：天津、辽宁辽宁、江苏、 福建、山东、广东、广西、海南； 鲜蛋：北京、河北、吉林、河南、湖 南、重庆。 标准标准 GB/T 5009.190GB/T 5009.190- -20062006食品中指示性多氯联苯含量的测定食品中指示性多氯联苯含量的测定 GB2762GB2762- -20122012食品中污染物限量规定指示性食品中污染物限量规定指示性PCBsPCBs限量限量 CACCAC正在正在制制( (修修) )定最大允许限量（定最大允许限量（MLsMLs） 监测监测 GEMS/FoodGEMS/Food将将指示性多氯联苯指示性多氯联苯列入列入监测监测计划计划 20122012年年起起国家食品安全风险监测计划规定了指示性国家食品安全风险监测计划规定了指示性PCBsPCBs的监测的监测 能力验证能力验证 国家认监委能力验证活动，解决了国家认监委能力验证活动，解决了检验机构参加一次考核结果无法检验机构参加一次考核结果无法 多方利用的问题多方利用的问题 了解全国了解全国PCBsPCBs的检验能力，促进检验机构检验水平的不断提高的检验能力，促进检验机构检验水平的不断提高 初测初测满意满意省级省级CDCCDC机构机构8 8个个 河北省疾病预防控制中心河北省疾病预防控制中心 辽宁省疾病预防控制中心辽宁省疾病预防控制中心 吉林省疾病预防控制中心吉林省疾病预防控制中心 上海市疾病预防控制中心上海市疾病预防控制中心 江苏省疾病预防控制中心江苏省疾病预防控制中心 浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心 湖北省疾病预防控制中心湖北省疾病预防控制中心 湖南省疾病预防控制中心湖南省疾病预防控制中心 中国计量科学研究院特别中国计量科学研究院特别制备制备 基质：基质：金枪鱼金枪鱼肉肉 添加一定浓度的添加一定浓度的7 7种种成分指示性成分指示性PCBsPCBs标准溶液标准溶液 样品种类：样品种类： 空白基质样品空白基质样品 考核样品考核样品：A A、B B 每份考核样品的量约为每份考核样品的量约为10g10g 样样 品品 制制 备备 流流 程程 样品制备：鱼类样品去皮，去刺，去内脏 之后切碎，再用粉碎机粉碎，冷冻干燥， 放入冰箱中备用。 样品称量：先将鱼样品从冰箱取出，放置 到室温后，准确称量1 g鱼肉样品和1 g在 400煅烧过10 h的无水硫酸钠，混匀后加 到滤纸筒中。将称量好的样品置于索氏提 取装置中，加入内标0.1 mL，室温中避光环 境中平衡30 min后，在150 mL的烧瓶中加入 80 mL正己烷/丙酮（1:1 V/V）混和溶液， 70水浴回流，提取24小时。 净化：提取液在40恒温水浴中旋转蒸发至1 mL， 转移至10 mL具塞刻度管中，用正己烷洗涤旋转蒸 发瓶34次，洗液并入刻度管并定容5 mL，加入 0.5 mL浓硫酸，用涡旋混合器震摇1 min，以3000 r/min的转速离心5 min，使硫酸层和有机层分离。 如果上层溶液仍有颜色，表明脂肪未完全出去， 再加0.5 mL浓硫酸，重复操作，直至上层溶液呈 无色。上层无色溶液用一次性移液管取出待SPE 净化。 SPE净化步骤：用4 mL丙酮清洗FLorisil （500mg/6mL）小柱，并真空抽干，然后 用4 mL 正己烷调节小柱，不抽干，让小柱 保持湿润状态。将样品提取浓缩液转移到 小柱上，上样后，静止2 min。用5 mL的洗 脱液(正己烷:丙酮=9:1)洗脱，洗脱速率1.5 mL/min，接收的洗脱液用氮气吹至1mL， 转移至样品瓶中准备进行GC/MS的测定。 仪器条件 气相色谱条件：色谱柱DB-5MS 30 m0.25 mm0.25m； 载气：氦气（99.999%），流速1.0 mL/min；进样口温度 290；柱温：100保持2min15/min升温至180， 3/min升至240，15/min升温至290保持5min。 质谱条件：离子源230，四级杆1：150 ，四级杆2： 150，碰撞气：氮气（99.999%）1.5ml/min、氦气 （99.999%）2.25 ml/min，监测模式：MRM，电离模式： EI，能量70ev，传输线温度：300。溶剂延迟时间11min。 PCBs二级质谱分析碰撞能量见下表。 名称名称 保留时间保留时间 minmin 母离子母离子 定量子离子定量子离子 碰撞能量（碰撞能量（eVeV） 辅助定性子离子碰撞能量辅助定性子离子碰撞能量 （eVeV） 丰度比丰度比 % % PCB28PCB28 14.17814.178 256256 186186（3232） 151151（5050） 2323 PCB52PCB52 15.49015.490 292292 220220（3434） 257257（1212） 6868 PCB101PCB101 19.30119.301 326326 256256（3434） 291291（1212） 4848 PCB118PCB118 22.37422.374 326326 256256（2727） 291291（1212） 4545 PCB153PCB153 23.47023.470 360360 290290（3535） 325325（1616） 3535 PCB138PCB138 24.83824.838 360360 290290（3030） 325325（1515） 4949 PCB180PCB180 28.27228.272 394394 324324（3434） 359359（1515） 4848 PCB208PCB208 30.36830.368 464464 322322（2020） 392392（2020） 6565 方法的线性范围、检出限和回收率实验 配制标准系列：5g/L，10gg/L，20g/L， 50g/L，100g/L，200g/L。内标PCB208的浓度 为100g/L。进行MRM方式测定，内标法定量， 结果如表2所示。本方法在5 g/L200g/L质 量浓度范围内，线性关系良好，相关系数均大于 09995。分别添加20g/kg和100g/kg两个水平的 加标回收实验，平均加标回收率均在89.4% 101.9%之间。 名称名称 标准曲线方程标准曲线方程 相关系数相关系数 r r 平均回收率（平均回收率（% %）（）（n=6n=6） 检出限检出限 （ g/kgg/kg） 2020 g/kgg/kg 100100 g/kgg/kg PCB28PCB28 Y=7.78XY=7.78X- -0.510.51 0.99980.9998 97.897.8 95.595.5 0.030.03 PCB52PCB52 Y=2.97xY=2.97x- -0.210.21 0.99970.9997 89.489.4 99.699.6 0.070.07 PCB101PCB101 Y=2.75xY=2.75x- -0.230.23 0.99970.9997 96.596.5 101.9101.9 0.170.17 PCB118PCB118 Y=3.08xY=3.08x- -0.300.30 0.99970.9997 98.098.0 90.290.2 0.170.17 PCB138PCB138 Y=2.48xY=2.48x- -0.250.25 0.99960.9996 99.399.3 100.8100.8 0.170.17 PCB153PCB153 Y=2.87xY=2.87x- -0.260.26 0.99960.9996 98.698.6 92.392.3 0.170.17 PCB180PCB180 Y=1.79xY=1.79x- -0.170.17 0.99970.9997 90.190.1 91.291.2 0.170.17 提取系统的净化提取系统的净化 为了消除提取系统引入干扰物的可能，在 提取样品前，将提取用滤纸筒至于索氏提 取器中，用50ml正己烷/丙酮（1:1 V/V）混 和溶液，在70水浴回流4小时。提取净化 后，将盛有滤纸筒的索氏提取器拆下，在 室温下晾干溶剂。将