4%多聚甲醛的配制

4%多聚甲醛的配制:0.1M PBS配制80g NaCl2g KCl14.4g Na2HPO42.7g KH2PO4溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4冰箱中，在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛(EM级)溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60加热(打开瓶盖)使溶解,冷却至室温, 用HCl调节溶液的pH值至7.4,使用前新鲜配制.4%多聚甲醛固定液：用途：进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。试剂：多聚甲醛 40g PBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml 混合后加热至60，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。注固定时间24小时。我们实验室一直沿用的4多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是：多聚甲醛（粉末状）：40g磷酸二氢钠：2.965g磷酸氢二钠：29g蒸馏水：1000ml然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60）振荡24小时。原来一直用的挺好，配出来也很清亮。但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。等不再加热，室温后，溶液就混浊了。再加热到60度又清亮了。再冷却到室温后又混浊了。 不知道为啥？请高手指点一二，不胜感激4多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧:多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,直接在通风情况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,大概放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最后别忘记放DEPC.其实武汉博士德就有4多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒服.后来就直接找他们买了,方便便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用!你要考虑以下几过因素:1.蒸馏水洁净.2.三角烧瓶洁净.3.试剂没问题.多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。以前用过磁力搅拌棒转一上午都不行，放在一边过几天再看就溶解了。如果要求中性多聚甲醛就用pbs或者用磷酸氢二钠+二氢钠，如果不要求中性用水就可以啦我要做免疫组化实验。用ABC法，DAB显色。组织的固定液，查外文资料用的都是4多聚甲醛0.1M PBS。但是实验室的老师说，是用0.01M的PBS配制，不知道是不是一样的？还有就是冲洗液，我查的英文资料都是用0.1M PBS。但是实验室老师说是0.01M PBS。不知道大家对这个又没有经验。固定用0.1M PBS，冲洗用0.01M PBSpbs 0.1M的PBSNacl 8.5克Na2HPO4.12H2O 30.8克NaH2PO4.2H2O 2.8 克双蒸水 定容至1000ml 0.1M PBS缓冲液的配制：Nacl: 4gKcl: 0.1gNa2HPO4.12H2O: 1.445gKH2PO4l: 0.1g用500ml 去离子水溶解，5.6%NaC