三氯化铬的急性毒性评价

三氯化铬的急性毒性评价摘要：三氯化铬是合成其它铬盐的重要原料，在无机合成和有机合成中有重要的作用，是合成饲料添加剂的主要成份，工业上主要用作媒染剂及催化剂。本文通过对小鼠进行急性染毒试验来初步探讨三氯化铬的急性毒性，以了解三氯化铬的毒性强弱及对人体可能的危害作用，为环境中三氯化铬的安全含量提供数据基础，同时也为其表现的临床症状和预防治疗提供有利条件。关键词：三氯化铬，急性毒性，小鼠灌胃染毒，危害作用 一.前言三氯化铬; 氯化铬; Chromium trichloride; Trichlorochromium; CAS：10025-73-7 1.理化性质 紫色有光泽的六角晶体。分子式CrCl3。分子量158.38。相对密度2.78。熔点1152。在1300以上解离。在水、酸、有机溶剂中的溶解速率极慢; 加痕量的二氯化铬,就能迅速溶于水和乙醇。 六水物有深绿色、浅绿色和紫色三种异构体。分子式CrCl36H20。分子量266.47。深绿色异体相对密度1.849。溶于水; 稀的水溶液为紫色,浓的水溶液为绿色。0.2mol水溶液pH=2.4。溶于乙醇; 微溶于丙酮; 几乎不溶于乙醚。空气中吸湿。 接触机会 用于制铬盐、镀铬、铬鞣皮、媒染剂、烯烃聚合和其它有机反应中的催化剂等。生产与使用中易接触。2.三氯化铬对健康的危害由于三价铬毒性很小，无机铬盐的吸收率又很低，因此尚无口服三价铬中毒的报道。铬中毒是指六价铬污染环境而引起的人体中毒，如长期从事铬酸盐工业生产的工人，易患皮肤溃疡、接触性皮炎、皮肤癌；长期吸人铬酸盐粉尘者可诱发肺癌。铬中毒时还可出现口腔炎和齿龈炎等。为探讨三氯化铬对小鼠的毒性作用，采用经口急性毒理学试验观察毒性反应并用霍恩氏法计算半数致死量。3.毒理学资料及环境行为毒理学数据：急性毒性：小鼠经口LD50：2143.3mg/kg；生态学数据：通常对水体是稍微有害的，不要将未稀释或大量产品接触地下水，水道或污水系统，未经政府许可勿将材料排入周围环境。二.实验过程1.目的：急性毒性实验的目的有以下几方面：通过试验测定毒物的致死剂量以及其他急性毒性参数，以为主要LD50参数，了解急性作用强度、通过观察动物中毒表现，毒作用强度和死亡情况，初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量-反应关系和对人体产生的危害性、为后续的重复剂量、亚慢性和慢性毒性试验研究以及其他毒理实验提供接触剂量设计依据，并未选择观察指标提出建议、提供毒理学机制研究的初步线索。2.实验原理：选择健康实验动物，随机分组，依据LD50计算的设计原则分为若干染毒组，给予受试物后，了解动物产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡特征以及可能的死亡原因。观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出LD50，并根据LD50将外源化学物进行毒性分级。3.实验要求:掌握随机分组及标记方法 掌握测定LD50的实验设计原则 巩固小鼠的灌胃技术4.器材与试剂昆明种小鼠 16只（原则上雌雄各半）、小鼠食物和水、小鼠笼。仪器：灌胃针，酒精棉，25ml容量瓶若干，烧杯,10ml及1ml刻度吸管若干 电子天平，镊子，镊子等试剂：三氯化铬 蒸馏水5.实验方法受试动物的选择及分组：试验动物小鼠接触受试物方式为经口灌胃。选取16只健康成年昆明小鼠（原则上雌雄各半）,实验前动物要在实验室环境中至少适应35天。分别称取每只小鼠的质量，从而将质量相近的小鼠分为一组，每组四只小鼠，并对每组小鼠进行编号，其中编号：头（1）、前脚（2）、腹部（3）、后脚（4）。将标记好的小鼠置于同一笼中喂养，禁食一夜,饮水正常。采用方法： 采用霍恩氏法：1、设立四个剂量组。2、每个剂量组的动物数相等，一般为4只。3、各剂量关系成倍数关系。剂量设计：经查阅资料，可知三氯化铬对小鼠经口灌胃染毒LD50为2143.3mg/kg，该实验组分为四组，按2.15倍剂量系列，则试验剂量为：0.464g/kg、1.00g/kg、2.15g/kg、4.64g/kg。（备注：将查阅相关资料得到的三氯化铬LD50值安排在第二组与第三组之间）药液配制：本实验采用2%容积灌胃（10g体重灌0.2ml）,最高剂量组即第四组（4.64g/kg）,应配的试剂浓度为c=4640mg/kg20ml/kg=232mg/ml试剂配制：求c液所需溶质的质量m根据公式式中：m所需溶质量（本实验为三氯化铬）c所配浓度(232mg/ml)L所配溶液量（25ml）d溶质相对密度（三氯化铬为1）采用固定体积稀释法，按求得的m称取CrCl3 5.8g置于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，溶解混匀得到剂量4；取剂量4溶液11.63ml于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度混匀后得到剂量3；取剂量3溶液11.63ml于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度混匀后得到剂量2；取剂量2溶液11.63ml于25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度混匀后得到剂量1。计算每只动物实际灌胃量 计算每只动物实际灌胃量=0.02ml/g该鼠体重g6.灌胃空腹时灌入，灌胃后34h再喂食。灌胃方法：使用1ml注射器和钝针头，用左手拇指和食指捏住小白鼠两耳朵及头后皮肤，其余手指将小鼠的背部皮肤（或尾巴）压在手掌间，使其躯干垂直，腹部朝内，头部向上，略有一个倾斜度，固定好后，右手持注射器，将针头由动物口腔侧面插入，避开牙齿，沿咽后壁徐徐滑入食道下端，遇有阻力时，可轻轻上下左右滑动，一旦感觉阻力消失，即可滑入胃内。若遇动物挣扎，应立即停止进针或将针拔出，决不可进针不顺而硬向内插，以免损伤或穿破食道或误入气管、肺，造成动物立即死亡。立即死亡的，要另补动物。灌胃针插入深度，一般小鼠34cm。为排除人为误差，所有小鼠均由一人灌胃染毒。每次灌胃0.4ml。 A组(灌胃水平为0.464g/kg）小鼠体重(g)随机编号平均体重（g）27.01126.829.21224.41326.614B组(灌胃水平为1.00g/kg）18.92120.820.42221.92322.024C组(灌胃水平为2.15g/kg）27.13126.326.93225.03326.234D组(灌胃水平为4.64g/kg）26.44125.4523.74225.54326.244 按上表对小鼠进行分次灌胃，灌胃前用酒精棉对灌胃针进行消毒。灌胃结束之后，密切注意观察2h，看小鼠是否有急性毒性发作，记录动物中毒症状及死亡情况，并进一步解剖观察死亡小鼠的内脏情况来了解三氯化铬的急性毒理作用。2h后常规饮食，连续观察5天，每日定时观察记录。7观察记录 观察小鼠的毛色光亮、行动敏捷、精神状态、健康活泼、生理变化、死亡情况及出现的不良反应现象。实验观察记录表观察时间现象记录第一组（A）第二组(B)第三组 (C)第四组(D)11.27傍晚（灌胃实验结束即计时）四只小鼠都表现正常，行动活跃，精神充沛21号小鼠四肢蜷缩无力，有轻微抽搐，其余小鼠表现正常四只小鼠没有明显的异常现象42、43号小鼠死亡，解剖发现胃充盈呈靛蓝并且肿大，其他器官表现正常晚上四只小鼠正常饮食，无异常21号小鼠死亡，解剖发现胃充盈肿大且呈靛蓝四只小鼠正常饮食，无异常44号小鼠精神萎靡，行为缓慢11.28上 午四只小鼠表现正常三只小鼠无异常，毛色有些暗淡四只小鼠表现正常，毛色无光泽44号小鼠死亡，全身发青，胃充盈肿大呈靛蓝，毛色暗淡无光下 午四只小鼠表现正常，毛色有些暗三只小鼠表现正常，皮毛有些无光泽31、34号小鼠行动缓慢，目光呆滞，轻微抽搐，皮毛粗糙，暗淡无光41号小鼠行动敏捷，精神充沛，毛色暗淡11.29上 午四只小鼠表现正常，皮毛无光泽粗糙23、24号小鼠死亡，解剖发现胃充盈肿大呈靛蓝，全身发青31、34小鼠死亡，解剖发现胃充盈肿大呈靛蓝色，皮毛无光泽粗糙，全身发青无异常现象下午四只小鼠表现正常，行动活跃，皮毛无光泽粗糙22号小鼠表现正常，皮毛无光泽粗糙两只小鼠表现正常，皮毛无光泽粗糙41号小鼠行动有些缓慢，精神萎靡，皮毛粗糙11.30上午四只小鼠表现正常，行动活跃，皮毛无光泽粗糙22号小鼠无异常，皮毛无光泽粗糙两只小鼠行为活跃，皮毛无光泽粗糙41号小鼠死亡，解剖胃充盈肿大呈靛蓝色，皮毛粗糙无光泽下午四只小鼠表现正常，行动活跃皮，毛无光泽粗糙22号小鼠行动敏捷，皮毛无光泽粗糙33号小鼠正常，皮毛粗糙32号小鼠行动缓慢，精神萎靡，皮毛粗糙12.1上 午四只小鼠表现正常，行动活跃，皮毛无光泽粗糙22号小鼠精神充沛，皮毛无光泽粗糙32号小鼠死亡，胃充盈肿大呈靛蓝色，皮毛粗糙33号小鼠正常，皮毛粗糙下 午四只小鼠表现正常，行动活跃，皮毛无光泽粗糙22号小鼠活动正常，行为活跃，皮毛粗糙无光泽33号小鼠行动稍微有些缓慢，皮毛粗糙无光泽三.实验分析与结果1994年2月我国颁布实施的食品安全性毒理学评价程序和方法【GB 15193.11994】中提出急性毒性分级的六级标准10，按照LD50将化学物质分为极毒（1mg/kg）、剧毒（150mg/kg）、中等毒（51500mg/kg）、低毒（5015000mg/kg）、实际无毒（500115000mg/kg）和无毒（15000mg/kg）。当受试物经口给予动物后剂量超过15000 mg/kg仍不引起死亡，则不必精确测定其半数致死量。此外，这种研究也能指明化学物质的可能靶器官及其特异毒性作用，并对下一阶段的长期研究提供参考。1实验结果 经过五天的实验观察，记录小鼠的状况如下：第一组小鼠行为活跃，精力充沛，皮毛粗糙无光泽，无死亡情况，体重有稍微下降后逐渐回升；第二组小鼠死亡三只，剩余22号小鼠活动正常，皮毛粗糙无光泽，第三组小鼠死亡三只，剩余33号小鼠行动稍微有些缓慢，皮毛粗糙无光泽，第四组小鼠全部死亡。另外小鼠的中毒症状表现为精神萎靡，食欲不正，行动缓慢，抽搐打颤。死亡的小鼠解剖后出现胃充盈肿大且呈靛蓝色，其他器官无异常现象，皮毛粗糙无光泽，全身发青的症状。2 结果分析 实验的四组小鼠死亡数目为0、3、3、4，综合考虑到小鼠灌胃时的人为操作误差及小鼠的自身原因和环境温度等因素的影响，并查阅霍恩法LD50计算用表可得出经口灌胃