第十五章-生物制品

第15章生物产品，第1节生物产品基本概念、定义和概述生物产品(biologicalproduct)是通过应用生物技术(如一般或基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程)获得的微生物、细胞以及各种动物和人类来源的组织和液体等生物材料准备，用于预防、治疗和诊断人类疾病的药物，2，分类，1，疫苗(Vaccine)，所有都可以通过注射或粘膜接种，诱导特定致病原性的特定抗体或细胞免疫，从而身体可以保护或消灭蛋白质、多糖、核酸活性载体、感染因子等引起的物质。弱毒化生苗、灭活疫苗、痘苗、乙型脑膜炎、脑膜炎、脑膜炎、麻疹、麻疹、乙型肝炎、腮腺炎、水痘、乙型肝炎、风疹、斑疹伤寒、脊髓灰质炎、亚单位疫苗、基因工程、甲型肝炎、乙型肝炎、黄热病、狂犬病、抗毒素、免疫血清称为抗毒素或免疫血清。用于治疗或手动免疫预防，如破伤风抗毒素、抗狂犬病血清等。3、血液制品(BloodProducts)从健康人的血浆或特定免疫人血浆中分离、纯化或由重组DNA技术制成的血浆蛋白成分或血细胞产品，如人血清白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子(天然或重组)、红细胞浓缩液等。4，细胞因子(Cytokines)和重组DNA产品(RecombinantDNAProducts)由健康人血细胞的增殖、分离、纯化或重组DNA技术制成的干扰素(IFN)、白细胞介素(il)，5，诊断产品(1)体外诊断产品：伤寒、副伤寒、变形菌诊断液、沙门氏菌诊断血清、HBsAg酶联免疫检测试剂盒等特定抗原、抗体或相关生物物质组成的免疫诊断工具包；solid phase non-competitive RIA/ELISA，Abdetectionimmoblizeagincubatewithasampleaddlabeledanti-igamoounoflabeledabble用于体内免疫诊断，如Bcg-PPD (BCG-PPD)、b-PPD(布鲁氏菌纯蛋白衍生物)、Sike实验毒素、单克隆抗体等。6，其他产品是用相关生物材料或特定方法制造的，其他不属于上述5类的生物制剂用于治疗或预防疾病。治疗用肉毒杆菌制剂，益生菌，卡其多糖，核酸制剂等。第二，疫苗的定义和分类，疫苗定义的疫苗分类，第一，疫苗定义，特定细菌、病毒、立克次体、衣原体等微生物和寄生虫制成的生物制剂，接种后可以自动免疫和预防疾病的生物制剂称为疫苗，制剂的主要成分是微生物或寄生虫。2，分类，按微生物分类，按细菌疫苗、病毒寄生虫疫苗、疫苗抗原的特性及准备过程，按生物疫苗(livevaccine)弱毒活疫苗、基因缺失疫苗、生物疫苗、病毒抗体复合疫苗：由特定高血清和适当比例的相应病毒组成，可以延迟病毒的释放，提高疫苗的安全性和免疫效果。活疫苗在体内免疫反应和局部免疫反应免疫力持续很长时间，产量高，毒性低，反有害抗原干扰现象保存得很厉害，灭活疫苗：在完全病毒或细菌通过灭活火药存活后制作。也就是说，要使病原体充分死亡，丧失感染性或毒性，保存免疫原性。亚单位疫苗：通过物理或化学方法处理病原体，消除无效物质，通过其有效抗原部分制造的疫苗的提取、纯化、化学合成，制造出不同的子单位疫苗。基因工程重组子单位疫苗：利用DNA重组技术将病原微生物保护基因导入原核或真核细胞，在受体细胞中高效表达，分泌保护抗原肽链，提取肽链，制成佐剂。疫苗安全性好，副作用小(危害性小)，稳定性好，保管运输简单，但研发、生产成本高，免疫原性低，需要多次免疫才能有效地保护。死疫苗特征如果不能在体内繁殖，有利于制造多种或多种疫苗，不会引起全身性副作用，无毒反照现象受到外部影响较小，保存免疫力大，需要多次免疫，昂贵的身体产生体液免疫，需要利用辅助或携带系统提高免疫效果。基因疫苗(geneticvaccine): DNA疫苗、RNA疫苗、编码特定抗原蛋白的基因在真核表达元件的控制下构建重组表达质粒DNA或RNA，直接注入动物体内，通过宿主细胞的转录翻译系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生抗原蛋白的免疫反应。单价疫苗(univalentvaccine):利用同一种微生物(细菌)菌株或同一微生物的单个血清型(细菌)菌株的增殖培养菌制造的疫苗。多价疫苗(polyvalentvaccine):通过增殖同一个微生物(细菌)菌株或同一个微生物中的多株同基准(细菌)菌株培养出来的疫苗腹水型疫苗(mixedvaccine):利用不同的微生物增殖培养物，根据免疫学原理和方法组合的疫苗。接种动物可以得到该疾病的免疫保护，还可以预防一针，减少劳动力和动物压力。-同种疫苗按疫苗病原体(毒性)菌株分类。由同种，同族微生物制造，适用于同种动物免疫接种。异种疫苗：由其他微生物的(细菌)菌株制造的疫苗，通过接种动物，可以获得对疫苗中不包含的病原体的抵抗力。例如，狗在接种麻疹疫苗后，会对犬瘟热产生抵抗力。或者是由同种微生物(细菌)菌株制造的疫苗，接种动物后获得对形状病原体的抵抗力。将疫苗生产过程、细菌(有毒)种类培养物(培养基、动物、家禽胚胎或细胞等)收获抗原(培养液、有毒组织、胚胎液或小器官等)分发给疫苗，使其成为冷冻干燥生疫苗或惰性生疫苗。细菌疫苗制造工艺、蛋白胨、肉提取物等原料；病毒细胞疫苗制造工艺、健康动物(或胚胎)、病毒组织疫苗制造工艺、动物或胚胎的感染、化妆、盖子、贴纸(2)具有典型形态和特定组织的感染特性，可以保持生物学特性。(3)在特定组织中容易大量繁殖。(4)不产生神经毒素或其他可能引起身体损伤的毒素。如果制造生物疫苗，在繁殖过程中没有恢复原病的现象。(6)没有被其他病毒污染。2病毒繁殖(1)活动物培养(2)鸡胚胎培养(3)组织培养，(4)细胞培养；细胞培养时需要调节：常用的维持液和生长液需要氨基酸、辅酶、维生素、葡萄糖、无机盐等。培养条件控制ph值：7 . 00 . 2；提供BCO2:保持环境CO2分压为5%，以控制pH。，c提供氧气：氧气；d容器内壁清洁度控制：用硫酸-铬酸盐混合物清洗，用纯净水冲洗；e细菌污染控制：完全杀菌，添加一定量的抗生素；f培养温度和时间控制：371，时间2-4天。3疫苗灭活甲醛或酚溶液灭活。动物组织影响灭活效果。消亡时间必须合适。5冻干疫苗充氮或真空密封保存。4疫苗纯化细胞培养液交换。病毒细胞培养疫苗准备过程：毒性和毒性种子营养液准备和细胞准备粘合和收获苗工艺1种毒性和毒性各种毒性国家指定细菌，毒种保存部门识别和分发，大部分是冻干产品。按照规定，在细胞接力培养后用作毒性物种。继代培养被控制在一定的代数内。工艺2营养液准备和细胞准备营养液一般分为生长液血清含量为5% 20%，维持液血清含量为0% 5%，除此之外，细胞培养用生长液和病毒增殖用维持液。不同细胞的营养成分不同，根据需要选择适当的营养溶液。常用的营养液是用有限的液、MEM、DMEM、199、1640等溶解，去除细菌，过滤后使用。工序3病毒疫苗接种可以与细胞同步(并行或化妆后立即接种病毒)或异步(单层形成后接种病毒疫苗)同步。70%到80%以上的细胞病变时可以收获。采后培养瓶可以反复冻融。还可以添加EDTA-胰蛋白酶溶液消化和分散收获。收获的细胞毒经无菌检查，毒价测定合格后，供应给幼苗。工艺4见家禽胚胎培养疫苗，了解苗停用疫苗及冻干苗的制备方法。疫苗制造及检验规程，任何疫苗都有国家法定标准制造及检验规程。疫苗生产必须严格按照规程规定的方法进行生产和检查，如果想改变方法，必须证明提供研究资料是可行的，经过农业部审查批准，新规程才能进行生产。规程来源中华人民共和国生物制品规程(普通疫苗)以前的单位，5，疫苗质量管理和验证要求(a)在生产过程中，质量监控标准的建立和要求生产过程的所有阶段和阶段，必须根据产品后续过程的进展，建立确保产品质量和流程稳定性的适当监控标准。(b)疫苗产品的质量验证和要求1。外观检查：根据范例的性质，设定外观的品质标准。2.ph检测：通常为7.20.5，可以根据一般生物产品的要求设置标准。3.纯度：主要用于评价精制产品中活性成分的数量和杂质的最低限度，确定适当的标准，通常测量疫苗中活性抗原的绝对值或主要杂质的数量，计算疫苗中活性抗原的相对值。4.检测宿主细胞DNA和蛋白质残留：要用传代细胞生产疫苗，必须限制疫苗的宿主细胞DNA和蛋白质残留，进行方法研究时，必须建立适当的标准物，并验证检测试剂的敏感性和特异性。疫苗的残留宿主细胞DNA和蛋白质残留可参考现货中国药典的相关要求。5 .无菌检查：必须满足当前版本中国药典的要求。6.热源或细菌内毒素检查：可参考现货中国药典的相关要求；还有其他从疫苗中检测热源物质的方法。7.抗生素检查：预防疫苗不得在生产过程中添加青霉素或其他-氨类抗生素。在生产过程中，如果添加除上述抗生素以外的其他抗生素，应建立适当的检测方法，并规定抗生素残留的要求。8.验证失活效果：制造疫苗的病原体一般对人类致病，因此必须建立有效的失活方法，消灭该产品的病原体，验证失活效果。在成品验证中，应建立灭活剂残留检测方法及限制标准。9.异常毒性检查：必须满足匾额中国药典的要求。10 .稳定性测试：表示在一般保存温度下对疫苗进行稳定性测试。稳定性测试的结果与产品的有效期直接相关，测试观察时间长，因此，生产工序确定后，应尽快留下样品，定期抽样，测量产品有效性及其他相关质量指标。11.功效测试(生物效价):疫苗通过身体的免疫反应起作用，因此必须评估体液免疫和细胞免疫的生物学效价。在评估体液免疫效价时，选择实验动物系统，建立检测动物血清抗体的诊断试剂，并对其进行验证，从小鼠ED50和抗体产生的滴剂也为12。要计算助剂的质量评价。也就是说，如果最终产品有助剂，就要建立助剂含量及其组合率的检测方法，并制定相应的质量标准。13.疫苗标准或参考品研究：对于新疫苗，建立试验疫苗的效力、免疫原性或毒性的标准或参考品，对于检验室研究阶段和大规模生产后疫苗的质量是否一致，对评估临床试验非常重要。工厂、设施和机构、GMP证书是疫苗生产的准入许可证，疫苗生产必须有符合生产工序的生产线GMP生产现场设计要求功能区抗原准备区、成品生产区、清洗区、办公区。各地区和职能间通向干净的走廊，严格按照人流物流分离原则设计。洁净度：根据功能间的洁净度、压力、压差要求进行设计施工。10万区、10万区和100区。六大系统：供电、供水、蒸汽供应、污水处理、净化、监控。工厂、设施和设备、检验设施质量检验室检验动物住宅(必须具备所有种类的实验动物级饲养设施)存储设施原辅助材料库半成品仓库成品库、工厂、设施和设备，灭菌设备：蒸压柜、干燥热箱、锅炉等；净化设备：净化装置、灭菌室、超级清洁台等；微生物培养设施设备：温室、孵化器、细胞培养环瓶机、各种罐、生化培养箱等；乳化设备：各种罐、胶体触摸、高压均质器等；冻干设备：冷冻干燥机；填充设备：烘焙线、自动填充和插头联锁机；包装设备：盖机、打标机；制冷设备设备：冷库、冷冻室、液氮罐等；污水废物处理设施设备：灭菌柜、消毒罐、污水处理厂；检验设备和设备：福州多北农业公司总体布局，重要的杀毒生产工艺，甲型肝炎减毒活疫苗历史：绒猴肝内克隆；细胞培养没有纯化。细胞培养被纯化。1基本要求生产和验证设施、原料和附件、动物、其他相关要求。2制造2.1生产细胞生产人类二倍体细胞(2BS株、KMB17株或其他认可的细胞系)。2.1.1细胞库管理和验证是从同一工作细胞库获取的一个或多个细胞管，恢复后扩增的细胞仅用于疫苗生产目的。2BS菌株原始细胞库细胞不得超过14代，主细胞库细胞不得超过31代，工作细胞库细胞代不得超过44代。2.1.2细胞在工作细胞库中制造一个或多个细胞管，复苏后混合培养，然后制成单层，用适当浓度的胰蛋白酶消化，静态或旋转370.5 培养。2.2毒性2.2.1名和来源生产用毒性物种为甲型肝炎病毒H2或l-a-1弱毒杆菌。2.2.2种子批次的建立必须符合生物产品生产和验证的细菌毒性管理程序的规定。H2弱毒原种子配置一代不要超过7代，主要种子配置不要超过8代，工作种子配置不要超过14代，疫苗病毒生产一代不要超过15代。2.3原液2.3.1细胞准备2.3.2培养液培养液是MEM或其他适当的培养液，以适当的量消灭新生犊牛血清。甲型肝炎抗体检测必须为阴性。2.3.3细胞外因素检查2.3.4病毒接种和培