网织红细胞计数(2014)

第二章/第一节红细胞检查,六、网织红细胞计数八、红细胞沉降率测定,是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，其胞质中残存的嗜碱性物质(RNA)经碱性染料活体染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网织状物.,网织红细胞（reticulocyte,Ret),ICSH分型（模式图）,丝球型,网型,破网型,点粒型,对网织红细胞的描述,是晚幼红细胞脱核后的未完全成熟的红细胞体积比成熟红细胞体积稍大胞浆内残存有正常核糖核酸(RNA)具有合成血红蛋白的能力核糖核酸越多，网织红细胞越幼稚外周血中主要是型网织红细胞网织红细胞经瑞氏染色为嗜多色性红细胞存在于骨髓与外周血中,网织红细胞计数（Ret）,检查外周血中网织红细胞数，可以推知骨髓产生红细胞的情况。检测原理及方法普通显微镜法（手工法）仪器法,对Ret内RNA染色进行计数,检测原理：活体染料的碱性着色基团（带正电）与Ret核糖核酸（带负电）结合，RNA凝缩形成蓝色的点、线、网状结构。用显微镜目测计数染色的Ret占RBC的比例。,1.显微镜法,操作,标本：末梢血或EDTA抗凝静脉血染色：染料与血标本混合(1：1),制作薄血涂片计数（油镜）,玻片法试管法,普通计数法米勒窥盘法,试管法,计数1000个红细胞区域内的网织红细胞数报告方式：百分数：Ret%=绝对值：Ret=RBCRet%,普通计数法,Miller窥盘法,Ret%=Ret=RBCRet%,2.仪器法,用特殊染料（荧光染料）使网织红细胞内的RNA着色，计数并计算出网织红细胞占红细胞的百分比。依据荧光强度将网织红细胞分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）。,普通显微镜法简便，成本低，直接观察细胞形态影响因素多，重复性差仪器法精密度高，易标准化有核红细胞，巨大血小板，H-J小体使结果假性增高,方法学评价,染料选择（WHO推荐使用新亚甲蓝）染色技术（推荐试管法染色）正确辨认网织红细胞（含2个网织颗粒记为Ret）网织红细胞计数（Miller窥盘法）,质量保证（手工计数法）,百分数（Ret%）成人和儿童：0.5%1.5%新生儿：2%6%绝对数（Ret）成人：(2484)109/L,参考值,评价骨髓增生能力，鉴别贫血类型,临床意义,网织红细胞增多：骨髓造血功能旺盛，常见于溶血性贫血或急性失血性贫血。网织红细胞减少：骨髓增生低下，常见于再障。,评价治疗疗效,临床意义,贫血治疗：缺铁贫或巨幼贫治疗有效Ret出现一个先升后降的峰。骨髓移植后监测骨髓造血恢复。,放疗和化疗的监测网织红细胞的动态观察可指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。,临床意义,红细胞沉降率（Erythrocytesedimentationrate，ESR）,规定条件下，离体抗凝全血静置后红细胞自然下沉的速率，以单位时间红细胞下沉后血浆段的距离表示。,血沉过程一般分为3期红细胞缗钱样聚集期，约10min红细胞快速沉降期，约40min红细胞堆积期，约10minESR对于监测疾病的动态过程是一项可靠的指标。,血沉3期中，红细胞沉降的速率不同,手工法,魏氏法、温氏法、血沉率及潘氏法,检测原理相似。差别在于抗凝剂、用血量、血沉管规格、观察时间的不同，故各种方法的参考值不同。ICSH推荐魏氏法为血沉测定参考方法,魏氏法,将枸橼酸钠抗凝血吸入特制血沉管内，垂直立于室温中，1h末读取红细胞层下沉的距离，用毫米（mm）数值报告。,ESR：10mm/h,魏氏血沉测定,抗凝血液静置后，红细胞下降，红细胞与血浆分离，其界面随时间而下移。血沉仪用光电比浊法、红外线扫描法或摄影法定时扫描红细胞与血浆界面位置，得到血沉值并显示红细胞沉降高度H与对应时间t相关的H-t曲线。,自动血沉仪法,方法学评价,血浆因素红细胞因素其他因素,ESR影响因素,血浆成分的改变,贫血RBC总面积减少，ESRRBC增多，ESRRBC直径愈大，ESR球形RBC增多，ESR,红细胞数量和形状,血沉管位置,其他因素,血沉管倾斜，血沉增快,温度,温度25，血沉增快，结果应校正,抗凝剂用量准确：枸橼酸钠（109mmol/L）与血液之比（1：4）。血沉装置：血沉管干燥、洁净、直立；血沉架，放置平稳，不振动。血液标本：无凝、溶血，采集4h内检测。测定环境：温度18-25度，避免阳光直射。,质量保证（魏氏法）,参考值（魏氏法）,成年男性015mm/h成年女性020mm/h,生理性增快,临床意义,女性高于男性（纤维蛋白原高）老年人（纤维蛋白原增高）妇女月经期或妊娠3个月以上,病理性增快,临床意义,炎症性疾病组织损伤及坏死恶性肿瘤血浆球蛋白增高的疾病自身免疫病高胆固醇血症,血沉减慢（意义较小）,临床意义,见于红细胞数量明显增多及纤维蛋白原含量严重减低时,魏氏血沉测定,用于观察疾病的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤观察结核病和风湿热的病情变化和疗效。血沉加速，表示病情复发和活跃；当病情好转或静止时，血沉逐渐恢复。某些疾病的鉴别诊断，如心肌梗死和心绞痛，胃癌和胃溃疡的鉴别。,血沉的临床应用,反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数（CV）表示。由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出。比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。参考