实验5 家兔离体肠肌活动的影响实验

实验5 家兔离体肠肌活动的影响实验【摘要】 目的 研究0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素（E）、NaOH溶液、HCl溶液、25台氏液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法 家兔离体小肠平滑肌标本的制备，生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。常用统计学方法和统计学指标。 结果 滴加0.01%乙酰胆碱（Ach）、1NNaOH溶液后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加0.01%肾上腺素（E）、1NHCl、肠肌运动张力和频率迅速降低；25台氏液刺激离体肠肌时，肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大；停止通氧后，肠肌运动张力和频率逐渐降低。结论 0.01%乙酰胆碱（Ach）、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动，0.01%肾上腺素（E）、1NHCl能抑制肠肌运动，短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常，缺氧使肠肌运动减弱。关键词：HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素目录1.实验材料和方法21.1.实验材料21.2.实验方法：22.实验结果：43.实验讨论（见附页）54.实验结论：55.参考文献：5附页51. 实验材料和方法1.1. 实验材料1.1.1. 实验动物：兔子（浙江中医药大学动物实验中心 ）1.1.2. 实验材料和器械：家兔，麦氏浴槽、超级恒温器、 张力换能器、铁支架、电脑、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。1.1.3. 实验药品：台氏液：（0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、0.0065% NaH2PO4、 0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3）、0.1%葡萄糖溶液。1:10 000肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。1.2. 实验方法：1.2.1. 准备好离体肠管描记装置，麦氏浴槽中加固定量（10ml-15ml）的台式液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在39摄氏度上下。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节到浴槽中气泡一个一个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号处理系统，仪器参数：RM6240系统：点击实验菜单中的“肠肌收缩记录”项，参数：通道时间常数为直流，滤波频率为10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描频率1s/div。1.2.2. 离体小肠段的制备：1.2.2.1. 准备两个小手术盘，一个小手术盘用于清洗肠内容物，另一小手术盘盛预冷台氏液倒入中，其液体量已淹过小肠段为准。1.2.2.2. 用持针器夹持手术圆针、穿线备用。1.2.2.3. 取家兔一只，将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，迅速进行以下操作：将其仰卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm，放入一小手术盘中，用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠约2cm长，并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线，注意在操作过程中，每10分钟换一次预冷台氏液。 1.2.3. 取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩，并牢固地绑紧在小钩上，将固定架放回内槽，小钩尽量靠近槽底，重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至固定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。1.2.4. 将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线，保持线有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时，肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。1.2.5. 换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用注射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。1.2.6. 实验观察：1.2.6.1. 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线，向台氏液中加入1:10 000乙酰胆碱2滴，观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。1.2.6.2. 肠活动恢复后，向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴，观察小肠活动的改变, 待反应稳定后冲洗2遍, 再加入等量的37 38的台氏液。1.2.6.3. 肠活动恢复后，向台氏液中加入1NNaOH 2滴，观察小肠收缩活动的改变, 待反应稳定后冲洗2遍。1.2.6.4. 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩活动的特点。向台氏液中加入1NHCl盐酸2滴，观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。1.2.6.5. 肠活动恢复后，将原37 38台氏液换成等量的25台氏液，观察肠活动的改变, 待其活动改变明显时，冲洗1遍, 再加入等量的37 38的台氏液。1.2.6.6. 待肠活动恢复后，停止空气泵的工作，观察肠活动的改变，待其收缩活动改变明显时反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37 38的台氏液，空气泵描记 一段肠段收缩活动恢复曲线后终止实验。1.2.6.7. 记录所得曲线。整理仪器。2. 实验结果：滴加0.01%乙酰胆碱（Ach）、1NNaOH溶液后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加0.01%肾上腺素（E）、1NHCl、肠肌运动张力和频率迅速降低；25台氏液刺激离体肠肌时，肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大；停止通氧后，肠肌运动张力和频率逐渐降低。3. 实验讨论（见附页）4. 实验结论：0.01%乙酰胆碱（Ach）、1NN