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文档简介
常规石蜡切片常见问题与解决方案,贵州省威宁县人民医院病理科方伟建,2019.6,1,常规病理组织石蜡切片染色是临床诊断的重要辅助手段。主要流程包括固定、取材、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等。,2,固定是所有常规病理工作的前置条件:大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3小时。制片工作一般应在取材后2个工作日内完成(不含脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本)。,3,一张优质是HE切片标准:厚度46m、完整、厚薄均匀、无皱褶、无刀痕、贴片恰当、染色鲜艳、对比度好。捞片时载玻片干净,粘贴于载玻片中下1/3处。,4,制备优质切片的条件:、包埋恰当。、锋利的刀片。、合适的切片机。、熟练的技术员。,5,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题1:切片卷成团原因:1、刀太钝2、刀倾斜角太小3、切片太厚解决方案:1、换新的刀片2、调整刀的倾斜角3、调整切片厚度,6,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题2:切片破碎或切不成片原因:1、组织固定、脱水、透明不彻底2、浸蜡不足,脱水、透明过度3、浸蜡温度过高或时间过久解决方案:1、优化组织处理过程2、及时更换试剂3、组织块去脱蜡后重新脱水,7,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题3:切片过分的压缩原因:1、刀太钝2、蜡块太软3、用力过猛或速度太快解决方案:1、换新的刀片2、重新冰冻蜡块3、动作轻、用力均匀,8,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题4:切片不连片原因:1、刀刃不锋利2、蜡块上下端留蜡太少或不整齐3、室温过低4、切片过厚解决方案:1、换新的刀片或移动刀口2、提高室温度或蜡块复温(吹气)3、调整切片厚度,9,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题5:切片粘附于组织块上原因:1、室温过高或包埋蜡熔点太低2、室内干燥有静电3、刀片、组织块边缘的碎片解决方案:1、清洁刀边2、修整蜡块边缘3、增加环境湿度,10,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题6:组织块脱落原因:1、包埋时组织块与包埋蜡粘贴不牢2、蜡块冷冻时间过久3、组织结构致密4、切片用力过猛或太快解决方案:1、重新包埋2、组织块复温3、切片动作轻、速度均匀,11,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题7:组织切片不完整原因:1、包埋不当,没有在一个面上2、切片时粗修过多或不够解决方案:1、重新包埋2、调整蜡块,确保获得完整的切面,12,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题8:筛状空洞(“天窗”)原因:1、粗修后没有细修2、肝脏、扁桃体、淋巴结、脾脏和脑组织中更常见解决方案:1、粗修后细修表面(无白点)2、过脆组织表面可以适当复温,13,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题9:切面过厚原因:1、切片机维护不当2、切片厚度设置过厚3、石蜡太软4、刀钝解决方案:1、保养切片机2、熟悉淋巴结、脾脏、胸腺、扁桃体等细胞丰富组织应该以2-3m为宜,14,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题10:纵行刀痕或纵裂原因:1、组织中有钙化、钉、缝合线等异物2、切片刀有缺口3、刀口不洁4、石蜡中有杂质解决方案:1、去除蜡块中异物2、清理刀口3、换新刀口,15,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题11:切片厚薄不均或“搓衣板样”原因:1、组织处理中脱水过度2、切片刀不锋利3、蜡块未夹紧解决方案:1、组织处理过程调整2、换刀或刀口3、夹紧蜡块4、均速慢切,16,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题12:皱褶或重叠原因:1、摊片温度不够2、组织缺乏一致性3、组织未充分伸展解决方案:1、调整摊片温度2、捞片时仔细认真,17,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题13:切片裂隙或碎裂原因:1、组织固定或处理不充分2、摊片时间过久或温度过高3、烘片前片子上水份过多解决方案:1、确保组织固定和处理充分2、降低摊片温度3、烘片前去除玻片上过多水份,18,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题14:栅栏裂和龟裂原因:1、固定不完全2、透明或浸蜡不充分3、蜡块过度冷冻解决方案:1、优化组织脱水过程2、慢切,速度均匀,19,常规石蜡切片常见问题与解决方案常见问题15:气泡原因:捞片时,切片下面有气泡。在烘干或染色过程中气泡破裂。解决方案:1、切片的光滑面朝下捞片,避免气泡。2、摊片机底部有气泡,毛笔搅动摊片机中的水,赶走气泡。,20,小结切片质量的好坏与组织取材、固定、特别是与组织的脱水、透明及浸蜡、包埋的好坏关系
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