实验二+植物病害组织分离培养技术及植物病害症状观察.ppt

实验2植物病原真菌组织分离培养技术及植物病害症状观察，1。实验的目的和要求：1 .掌握植物病害组织分离、无菌操作和常见病原菌培养及保存方法。2.通过观察植物病害的典型症状，初步掌握植物病害的症状和特征，研究植物病害症状的描述方法。(1)植物病害组织(自备)，PDA平板培养基(现成)。(2)洁净工作台(含75%酒精(含脱脂棉球)、手术刀、手术剪刀、镊子、酒精灯、培养皿、消毒纱布(2块5cm5cm)、培养皿(9cm)120套(两班，2个皿/人)、5%乳酸瓶(60ml)、1%漂白粉(0.1%氯化汞)瓶、无菌水、火柴等。植物组织的选择：选择患病部位有明显病-健结合的患病植物和新鲜植物组织作为实验材料。2、分离过程：1)实验前，向周围环境洒少许水，清洁地面，擦去超净桌面，打开超净桌面紫外灯，点亮20-30分钟，然后关闭紫外灯，打开风机，点亮酒精灯。培养基在微波炉中融化后，将培养基倒入超净桌上的无菌培养皿中，12毫升/皿(为防止细菌污染，在倒入培养皿前，在每个三角瓶中加入4-6滴5%的乳酸)，让培养基自然冷却一段时间。请注意，此步骤应在酒精灯附近进行。(3)用自来水冲洗植物病害标本，放入接种箱中；双手用70%酒精棉球擦拭消毒后，伸入接种箱开始操作。(4)打开3个培养皿(无菌)，依次倒入70%酒精、1%漂白粉和无菌水。取出消毒手术刀，用70%酒精浸泡，穿过酒精灯火焰，待刀片冷却后，将所需植物组织切成3mm2，在疾病与健康交界处(确保每人6片、3片/碟)，用纱布包裹，分别用70%酒精浸泡5秒钟，用1%漂白粉(0.1%氯化汞溶液)浸泡3-5分钟，使表面完全消毒，然后用消毒水冲洗3次。5)用消毒镊子将植物组织块(在干燥的无菌纱布中吸收多余的水分)转移到PDA中板，3块/碟。6)标记接种的平板，并将其置于25的培养箱中48小时以观察结果。棉花环腐病，要求：这种训练操作需要仔细、规范、快速和准确地注意(1)工作环境的清洁和消毒，(2)分离工具的消毒，(3)分离材料的选择，植物病害症状的观察，植物病害症状的类型变色坏死腐烂萎蔫畸形，植物病害症状的观察变色、初始症状褐斑、晕圈、中间症状褐斑、晕圈、 后期症状：叶片正常表面斑点散在排列(稀疏)，坏死，同心轮纹，同心轮纹：发病初期，正面出现黄褐色斑点，逐渐扩展成圆形、暗褐色、黄色周围及绿色晕圈，黑色斑点排列成同心轮纹。 叶片背面的病斑为暗褐色，周围为浅褐色，无明显边缘。(2)针芒型：病变像针芒一样向外延伸，无明确的边缘，病变小，但数量多，遍布叶片，后期叶片变黄，周围和背面仍为绿色。(3)混合型：病斑很大，近圆形或不规则，有黑色小斑点，但不明显排列成同心轮，后期中心呈暗褐色、灰白色，部分边缘呈绿色。混合型，不规则形状。病斑较大，发生在叶片边缘和内部，梨黑星病发生在树干和树枝上。(1)在毛白杨品种上，皮孔周围大多产生直径约1cm的水泡斑；(2)在粗皮杨树品种中，通常产生小的局部坏死斑点而不是水泡；(3)当疾病发生于干部的伤口、死芽和冻伤时，形成一个大的长条或不规则的坏死层。桃穿孔病、细菌性穿孔病、霉斑穿孔病、褐斑穿孔病、菠菜爆裂病、甘蓝软腐病、茄子青枯病、枣疯病，症状：芽的异常萌发和生长引起的枝叶丛，以及嫩叶的叶脉鲜艳、发黄和卷曲等。患病植物花器官的活体部分保持不变。花器官的返祖现象的特征是延长花梗，使花瓣变成小叶，有时变成小分枝，有时不变形。雌蕊变成一个小分枝，它的腋芽通常发芽产生又短又细的小枝。后来，除了由雌蕊转化的小枝和萼片腋芽萌发产生的小枝外，其余大部分都脱落了。这样，果实被小枝取代，在结果枝上形成集群症状。一、番茄根结线虫病、桃树叶缩病作业，(1)描述