第五章 植物胚胎培养技术ppt课件

.,1,第五章植物胚胎培养技术,.,2,一、植物胚胎培养的概念（EmbryoCulture）包括成熟胚培养、幼胚培养、胚珠培养、子房培养、胚乳培养、试管受精等类型。1904年Hanning最早成功培养萝卜和辣根的胚。,.,3,.,4,.,5,胚胎培养技术的应用：A.主要用于克服远缘杂交的不亲合;B.促进胚的发育;C.克服胚的休眠等;D.用于胚胎学理论研究。,.,6,二、植物胚胎培养技术（一）离体胚培养：包括成熟胚及幼胚的培养。植物胚胎发生过程：原胚球形胚心型胚鱼雷胚子叶胚,.,7,球形胚前期,球形胚,心型胚前期,鱼雷胚,.,8,.,9,成熟胚培养：成熟胚为子叶期以后的胚，其在简单的培养基上即可萌发生长。对营养条件要求不严格。主要用来繁殖不易萌发植物，或研究胚和胚乳及子叶的关系等。,.,10,台湾红豆杉成熟胚培养,.,11,牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖Matureembryocultureandrapidpropagationoftreepeony,.,12,2.幼胚培养：幼胚（心形胚阶段）对培养条件和营养的要求都较高。需要多种的营养和适宜的培养条件。影响幼胚培养成功的因素主要包括幼胚发育时期、培养基及培养条件等。,.,13,.,14,（1）天然提取物及某些蛋白制品；1934年银杏幼胚培养中添加银杏胚乳有促进作用；1941年曼佗罗幼胚培养中发现添加椰子乳能很好的促进幼胚的发育(200-500um的幼胚)。此外，大麦胚乳、麦芽提取物、酵母提取物、水解酪蛋白等都能促进幼胚的发育。,.,15,（2）渗透压的作用：胚发育早期要求较高的的渗透压，而随着胚的发育逐渐降低。,.,16,.,17,（3）植物激素及生长调节剂的作用：加入适当浓度的生长素、细胞分裂素可以促进胚的发育，单一激素影响发育。（4）其他因素：pH值以5.4-5.8适宜多数幼胚。温度25-30oC适宜多数植物。,.,18,（二）胚珠和子房培养：1、胚珠培养：包括授粉胚珠和未授粉胚珠的培养。1942年最早在兰花上获得成功，缩短了授粉到成熟的时间。1980年成功培养了未授粉的非洲菊、烟草的胚珠，获得了单倍体植株。,.,19,显花植物花的结构图示,.,20,.,21,.,22,影响胚珠培养的因素：（1）材料选择：生理状态、基因型、发育时期。未授粉胚珠：开花前1-6天，授粉胚珠：授粉后1-120天不等，较晚时期有利于胚的发育。（2）材料的消毒：先处理再取出胚珠培养。,.,23,（3）培养基：A.植物激素授粉胚珠：细胞分裂素对胚发育通常有促进作用。未授粉胚珠：外源激素不利于向日葵孤雌生殖。矮牵牛未授粉胚珠培养不需激素，其他需要适当添加。B.有机物：添加有机附加物可以促进授粉胚珠的发育。C.蔗糖浓度：3-12%，通常5%，高浓度利于孤雌生殖。（4）胎座组织的影响：促进胚的发育。,.,24,2、子房培养：包括授粉子房和未授粉子房培养。1949年和1951年最早在黄瓜、番茄、菜豆、草莓、烟草等植物上获得成功。授粉子房培养形成成熟果实和种子；未授粉子房培养形成小的无籽果实。,.,25,未授粉子房培养应注意的问题：（1）材料的选择；基因型、发育时期（接近成熟胚囊易于成功）（2）培养基：基本培养基（禾本科N6）、植物激素（配合使用）、蔗糖浓度（3-10%）（3）培养方式：直插优于平放。单倍体胚的来源：多种来源，可以是卵细胞、助细胞或反足细胞等。,.,26,（三）胚乳培养：,胚乳在被子植物中是双受精的产物，由极核和雄配子结合成的三倍体组织。而裸子植物胚乳在受精前形成，为单倍体。仅40多种植物进行胚乳培养研究，20种获得再生植株，如猕猴桃等。多存在混倍现象。,.,27,胚乳培养应注意的问题：（1）确定适宜的发育时期（生长旺盛期）；（2）严格区分胚乳和其他组织；（3）合理使用激素；（4）注意光、温条件（24-280C；黑暗条件）。,.,28,（四）试管受精：植物离体受精(Invitrofertilization)或植物试管受精，即在离体的、受人工控制的环境下，通过技术操作来完成植物雌雄配子体的融合。这一技术在60年代随着对受精作