沙门氏菌的检验

沙门氏菌检验，国家食品卫生标准委员会微生物标准协作组，2008年11月14 -18日，食品卫生微生物检验(GB/T4789.4)，主要内容、修订背景、国内外方法、修订内容、富集选择性富集分离板生化鉴定的血清学鉴定报告、修订背景、历史回顾、食品卫生微生物检验标准制定回顾、从无到有的经验，从事该领域工作的人员为编制和修订84、94和2003版检验标准付出了巨大努力。每个版本的标准为这个时代的食品卫生工作提供了巨大的技术支持，也深深地烙上了这个时代的经济特征。必要性，由于食品生产和流通的全球化，新的食品加工技术的应用，东西方饮食习惯的融合，自然环境的变化等因素，目前被沙门氏菌污染的食品种类，季节和场所都发生了重大变化。同时，随着检测技术的发展，沙门氏菌的快速检测方法层出不穷。有些方法已经通过了国际权威机构(如AOAC)的认证，成为国际标准方法。修订后的任务由卫生部国家食品卫生标准委员会发布，由微生物标准协调小组实施。2.兄弟、企业和公司是参与单位。3.总共收集了800多项数据，收集了50多项(90%以上被采纳)专家反馈，形成了标准草案和供审查的草案。4.时间跨度从2004年到2006年。修订原则是基于现行国际标准和原标准的实际使用。鉴于原标准的修订，我们遵循以下修订原则：1 .在原有国家标准的基础上，我们保持与原有标准的连续性；2.参考国际分析协会(AOAC)、国际标准组织(国际标准化组织)和美国食品和药物管理局(美国食品和药物管理局)的相关标准；3.将标准比对实验和验证实验相结合，积极吸收新方法和新技术，修订标准。修订基础，1.gb/t4789.42.aoacofficialethod: 967.26，967.27，967.283.iso: 65794 .美国食品和药物管理局：细菌溶素手册，第5:章沙门氏菌。修改内容，在1前添加细菌；2.细菌的选择性富集；分离；4.生化鉴定；5.血清学鉴定；6.报告。，国内外方法对比，国内外沙门氏菌检测方法(传统方法)，国家标准USFDAFSISAOACISO，TSI(不含a/ah2s-结果)，靛蓝基质，尿素，KCN，赖氨酸，沙门氏菌血清学试验，h2s靛蓝尿-kcn-lai，H2S靛蓝-尿-kcn-lai /-，除各种反应结果如左所述，沙门氏菌血清学试验，沙门氏菌，非沙门氏菌，微生物学检验沙门氏菌检验，中华人民共和国国家标准，GB/T4789.4-2003，25 肉类、家禽和蛋类中沙门氏菌的分离和鉴定，美国农业部/食品安全与生物医学研究所4.02，样品，百白破(包括结晶紫)，35120-24小时，BGSDMLIAORXLT 4，420.522-24小时，0.50.05毫升10 MLTT，0.10.02毫升10 MLRV，420.522-24小时，35118-24小时，TSILIA血清学试验，商用生化试剂盒225毫升PW，35 OR37 16 20小时，0.1毫升10毫升RV，10毫升100毫升SC，42 24小时，35 OR37 24小时，48小时，酚红亮绿琼脂(亮绿琼脂)第二种选择性平板，35OR3720 24小时，无典型菌落培养18 24小时，营养琼脂纯化可疑菌落，35OR3718 24小时报告结果发送至参考实验室分型，ISO6579:1993(E)，微生物学-沙门氏菌检测的一般方法，修订版，沙门氏菌检测，1前富集2选择性富集3分离4鉴定5报告，沙门氏菌检验程序，预富集，1。 样本分类已取消。预富集液统一为“缓冲蛋白胨水”原国家标准：BPWFDA，AOAC:各种预富集液国际标准化组织：BPW，预富集(续)。2所有样品都在8-18小时前进行了预富集。原国家标准仅预富集冷冻肉、乳制品、鸡蛋和其他加工食品。美国食品和药物管理局、AOAC、国际标准化组织、加拿大食品和药物管理局、中国食品和药物管理局和其他组织或国家对所有样品进行预浓缩。预富集(续)，3改进了样品处理方法，增加了拍打匀浆器，匀浆器袋可直接培养。4增加和调节酸碱度，选择性增加细菌。1使用“TTB和瑞典”，取消原来的国家标准“MM”:MM或TTB、AOAC: TT、瑞典：DA: RV、瑞典：RV和瑞典。选择性增菌的目的是尽可能多地检测沙门氏菌。原则上，必须使用两种选择性分离和富集溶液。一种是抑制除沙门氏菌以外的肠道细菌的生长，另一种是促进沙门氏菌的生长而不影响其他肠道细菌的生长。为了尽可能多地检测沙门氏菌，原则上必须使用两种或多种选择性分离介质。分离培养基回收率测定(%)，I:进口c:国产，典型菌落-bs，c-bs，I-bs，典型菌落-he，c-he，I-he，典型菌落-xld，I-xld，c-xld(变形菌落-误差)，典型菌落-铬，样品bpwcchro，样品bpwtcbchro，样品bpwmchro，生化鉴定，1)采用API20E或VitekGNI作为传统生化鉴定方法的选择性替代方法”。二、生化鉴定(续)，二)生化鉴定项目调整原国家标准中的生化鉴定是将可疑菌落接种到三糖铁琼脂、蛋白胨水(用于靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN培养基)和赖氨酸脱羧酶试验培养基中同时进行；现在，在接种TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基时，对其进行了改良，添加了营养琼脂。选择TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基后，可以筛选出大多数非沙门氏菌菌株，大大减少了工作量，满足了API20E或VitekGNI鉴定的需要。，生化鉴定(续)，2)生化鉴定项目的调整(续)为了保持与原标准的一致性，本标准还保留了蛋白胨水(用于靛蓝底物试验)、尿素琼脂(pH7.2)和KCN培养基的含量，可同时直接接种。该部分还增加了一个可疑菌落的样品保留确认部分，以便在必要时进行审查，这对于进一步验证生化鉴定不确定的菌落是非常必要的。API 20E、API20E、沙门氏菌20E鉴定结果、API20E、布氏柠檬酸杆菌20E鉴定结果、API20E、空肠肠杆菌20E鉴定结果、VITEKGEN，使用一系列含有干燥抗菌药物和生物化学底物的多孔聚苯乙烯小卡片进行测试。首先制备一定浓度的待鉴定菌悬液，然后将菌悬液接种在各种细菌的小卡片上，放入具有阅读功能的培养箱中。在一定的时间间隔内，仪器自动检测培养基的发酵条件，并将发酵条件转换成计算机可接受的生物代码。最后，计算机判断并打印出鉴定结果。VITEK，血清学鉴定，1血清学鉴定中的菌体亚群是一个选择性试验项目。原国家标准用于鉴定O抗原、H抗原和菌体亚群。美国食品和药物管理局和AOAC进行了O抗原和H抗原鉴定，菌体分组是选择性的。ISO识别o抗原和h抗原。根据上述生化试验和血清学试验的结果，25g样品中是否检出沙门氏菌。注：选择API20E进行选择性富集液分离培养基可疑菌落的质量控制；沙门氏菌仪器检测方法；生物梅里亚公司；沙门氏菌仪器检测方法；VIDAS利用酶联免疫吸附技术制造的全主动免疫分析仪；固相吸附器荧光分析技术：用已知抗体捕获目标生物。然后，再次结合荧光酶联抗体，充分洗涤，并通过激发光源检测，从而可以自动读出发光阳性样品。其优点是检测灵敏度高、速度快，能快速鉴别沙门氏菌、大肠杆菌O157: H7、单核细胞增生李斯特菌、空肠弯曲菌、葡萄球菌肠毒素等。48小时内。VIDAS、沙门