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.,高效液相色谱仪操作条件选择,组员：魏鹏翔、崔建哲、张龙、韩守印、李淼、孙磊。,指导教师：姜洪文,.,目录,实验目的实验原理仪器与试剂实验步骤仪器清洗（结束工作）,.,一、实验目的,掌握色谱分析的原理掌握高效液相色谱仪的基本结构和工作原理掌握SY-8100高效液相色谱仪的基本操作步骤掌握HPLC条件试验的方法以及分离条件的确定,.,二、实验原理,本次实验采用ODS-C18色谱柱，以甲醇+水混合液为流动相，根据混合物中萘、联苯和菲在固定相与流动相间分配性质的不同，进行分离。不同比例的甲醇+水混合液为流动相，流动相的极性发生改变，因此混合液的分离条件也发生了改变，选择能将混合液中各组分能充分分离并且相对分析时间短的条件，综合确定HPLC法分析萘、联苯、菲的分析条件，完成对混合液的分析。检测器采用紫外分光（UV）检测器，检测波长为254nm。,.,三、仪器与试剂,仪器：SY-8100高效液相色谱仪1台KQ-50B超声波清洗器1台AP-01P真空泵1台过滤装置1套微量注射器50L1支容量瓶50mL7只药品：萘（G.R.）、联苯（G.R.）、菲（G.R.）、甲醇（G.R.）、二次蒸馏水,.,四、实验步骤,流动相的准备1、流动相的过滤安装抽滤装置，选用有机相过滤膜，过滤试剂甲醇；选用无机相过滤膜，过滤二次蒸馏水。,.,2、流动相的脱气将盛有过滤好甲醇、二次蒸馏水的试剂瓶分别放于超声波清洗器中，进行脱气处理。,.,仪器的准备1、更换流动相将A泵的输液管放入处理好的甲醇试剂瓶中；B泵的输液管放入处理好的二次蒸馏水试剂瓶中。2、分别排除A、B两个泵输液管中的气泡,.,3、开启高压泵A、高压泵B、UV检测器、混合器的电源，打开工作站,.,分析步骤1、分别设置两个高压泵的流量，使总流量为F1.00mL/min，分别启动两泵,.,2、待基线稳定后，完成标样的分析，记录分析所获得的各组分的保留时间、理论塔板数、分离度。数据填表3、选择最佳流动相配比，调整A、B两泵的流量。待基线稳定后吸取标样，完成分析后建立组分表，再完成试样的分析，测得试样中萘、联苯和菲的含量，完成实验,.,.,五、仪器的清理（结束工作）,更换流动相将流动相重新更换为处理过的甲醇，以利于色谱柱的保护。清洗“进样阀”用适量
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