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文档简介
印片及其在术中冰冻病理诊断应用中的体会,首都医科大学附属北京同仁医院刘红刚电话mail:liuhg1125,前言-1,细胞印片,特别是怀疑有肿瘤的淋巴结切面的印片对诊断很有参考价值,因一张好的印片比起冷冻切片和石蜡切片来说可真实反映细胞的形态和结构,并可用于免疫组织化学,因此除了纤维组织较多的组织和肿瘤外,一般细胞丰富的组织和肿瘤,在新鲜标本切开后最好都做印片观察(刘彤华)。,前言-2,手术过程中,为及时并准确确定病变性质,给临床提供可靠的手术依据,通常采用冰冻切片方法。自1927年Dudgeon等采用了术中印片细胞学诊断之后,又有许多文献报导证实该方法不仅简单、快速,而且常常可以辅助冰冻切片诊断。细胞印片诊断准确率均在95.0%以上,假阳性率在0.5%以下,与冰冻切片诊断相近(钱和华、阚秀)。,前言-3,新鲜标本印片细胞学检查能为冰冻切片提供许多信息。在乳腺癌、颅内肿瘤、甲状腺、胃肠肿瘤等手术快速病理诊断中,与冷冻切片结合运用,可在一定程度上防止误诊或漏诊,提高冷冻切片诊断的准确性。有时细胞印片单独应用也是一种较好的快速定性诊断方法。,前言-4,组织印片诊断不同于一般涂片单纯细胞学诊断,而是细胞学与组织学相互结合观察的结果,有时可进行组织类型的诊断。在冷冻切片与快速石蜡切片的同时作快速印片,可有效纠正部分误诊(刘自光)。,第一章印片技术,第一节印片的制作,一、印片制作的一般步骤,锐刀切开组织载玻片轻轻触片,垂直适当用力蘸取细胞,避免平行拖拉95%乙醇固定2min(1-3min)乙醇(无水96%90%,各15s)苏木素1-2min流水1%盐酸乙醇液2-3次水冲伊红15s梯度乙醇脱水/低温吹干二甲苯透明15s封固,二、常用的固定液及固定时间,95%乙醇乙醚,固定时间30s甲醛冰醋酸乙醇溶液,固定时间30s10%福尔马林乙醇(浓度约85%)溶液,固定时间2-3min3%冰醋酸乙醇(95%)15s,三、常用的染色方法-1,苏木素-伊红染色:苏木素染色采用加温或微波处理。方法是把固定好的玻片经水洗将苏木素液滴加到玻片上覆盖全部细胞置60烤箱内1min或微波(低档)处理30s自来水洗20s0.5%盐酸乙醇分化1%氨水溶液蓝化10s0.25%伊红染数秒梯度乙醇脱水二甲苯透明中性树胶封片。全部制片时间在10min以内完成。瑞氏染色(略),三、常用的染色方法-2,姬姆萨染色(略)RapidStain(Rap)两步染色法将未经固定待干未完全干的印片加RapA液0.8-1ml,覆盖印片后加B液1.5ml混均,覆盖印片静置1-2min自来水清洗、烤干(或电吹风吹干)、封片(3min出片),四、制片的注意事项-1,印片时的要点实性包块印片应选取病变典型、质嫩及脆弱部位印片病变区较小可适当多作几张印片,以防止细胞过少或出现假阴性结果囊性包块印片时应先将囊液放掉,选取囊壁较厚、病变典型或有乳头的位置,如标本有囊液或出血,可先用干纱布将液体擦干,然后再作剖面印片尽可能避开出血、坏死及脂肪组织较多区域,并防止水分等混入标本操作要轻巧,用力要适当,避免挤压以防损伤细胞印片要均匀,厚薄适度,太厚细胞堆叠,太薄细胞过少,均影响诊断尽可能多印几个切面,以防因病灶太小而遗漏,(汪兆亮,2007),四、制片的注意事项-2,及时正确地固定固定的目的是保持细胞自然形态、防止细胞自溶。,四、制片的注意事项-3,印片后处理印片切勿高温烘烤、干燥过度,以防细胞变形、核染结构不清,造成人为细胞退变,影响诊断。印片放置时间不能过长。印片放置5h以内可见细胞轮廓,细胞不同程度退变,印片放置10h以后细胞结构不清,细胞破坏,核肿大、溶解。固定液的选择很重要,经反复试验比较证明95%乙醇乙醚或甲醛冰醋酸具有较好的固定效果,乙醇乙醚固定液渗透性较强,固定效果较好;甲醛冰醋酸可以增强固定效果,对抗乙醇固定的收缩作用,增强染色效果。印片固定时间不可过长或过短,时间过长容易导致细胞核过度收缩,核染色变深,核内染色质浓缩不清楚;时间太短容易使细胞肿胀变大,影响诊断。,四、制片的注意事项-4,提高染色质量印片染色质量的好坏在很大程度上直接影响细胞学诊断的准确性。术中快速病理诊断需要在很短的时间内对组织病变做出诊断,在节约时间的同时不能忽略了印片制作的质量。常规苏木素-伊红染色需要较长时间,不适用于快速诊断。传统使用的乙醇灯加温法效果不理想,容易使玻片受热不均匀,染色深浅不易控制,效果不佳。有人采用烤箱加温或微波处理染色法,时间容易掌握,玻片受热均匀,染色效果好,细胞核结构清晰、核浆对比度良好,而且缩短了制片时间(苏木素染色置60烤箱内1min或微波(低档)处理30s)。,第二节印片细胞学应用的基础,恶性肿瘤细胞,无论是癌或肉瘤,都具有细胞成分丰富,容易脱落的特点,因此,绝大多数肿瘤都可用细胞印片进行定性诊断。这是印片细胞学定性诊断的基础。,一、印片的优点-1,不同于一般涂片单纯细胞学诊断1)不但可获得清晰的细胞学结构,2)有时甚至能看到某些组织学结构,3)是细胞学与组织学相互结合观察的结果。,一、印片的优点-2,在某些方面优于冰冻切片,包括:带骨组织、脂肪组织丰富的组织交界性肿瘤或病变,在染色制片过程中由于组织细胞学结构不清,难以作出可靠病理诊断时(如卵巢交界性粘液性囊腺瘤、胃肠道肿瘤/带粘液的腺癌、乳腺导管上皮内病变)取材面较冰冻切片大,一、印片的优点-3,取材容易,方法简便、廉价、所需时间短,省时快速(20min内可完成)。易掌握,不需要特殊设备,冰冻切片需冰冻切片机及娴熟的冰冻切片染色技术。印片的细胞学检查由于固定及时,没有冷冻所引起的形态改变,能保持细胞形态特征,与冷冻切片联合应用,可以互相取长补短,提高诊断的准确率。避免冰冻切片机的污染和消毒,可用于传染性疾病的检查。,二、印片诊断的准确率、敏感性及特异性,157例术中印片诊断:恶性肿瘤52例,良性肿瘤96例,准确率达到94.26%(雷伟华,2005)。227例术中印片诊断:诊断的敏感性为95.96%,特异性为94.35%(121/128),假阴性4例(1.76%),无假阳性,冰冻病理诊断的敏感性为98.04%,特异性为98.44%,假阴性2例(0.86%),假阳性1例(0.43%)。与冰冻切片诊断的敏感性及特异性相近,无统计学差异(何洁华,梁小曼,1998)。302例术中印片:良恶性准确率为91.6%,稍低于冰冻切片95.6%,两者结合可使准确率达到97.6%(钱利华,阚秀1996)。用印片诊断阳性的恶性肿瘤57例与石蜡切片诊断作类型比较,有38例完全符合;诊断符合率为66.7%(38/57)(刘自光等,2005)。,三、印片确诊率高及有利于肿瘤类型判断的原因-1,印片细胞结构清晰,带有一定的组织结构,利于肿瘤性质的判断(如肾透明细胞癌、子宫内膜样癌)。易找到肿瘤细胞过渡现象,利于肿瘤细胞来源判断(如星形细胞)。易发现一些肿瘤细胞的形态特征(如腺癌的腺管排列,菊形团,核沟)。(雷伟华等,2005),三、印片确诊率高及有利于肿瘤类型判断的原因-2,与冷冻切片比较:能进行多部位检查,弥补冷冻切片取材的局限性微小组织或带骨组织无法冷冻切片时,仍可使用印片,四、印片在术中冰冻应用的价值-1,防止假恶性病变过诊断乳腺硬化性腺病假浸润现象、乳腺盲管腺病上皮异型增生、乳腺旺炽型腺病腺管高度增生超出小叶范围扩大搜索范围多作切面,多印片寻找微小癌灶显示特殊的细胞结构有助于诊断乳腺导管扩张症时的浆细胞、核沟、核内假包涵体,五、印片在术中冰冻应用的价值-2,印片与冷冻切片有互补作用,尤其在下列情况印片在乳腺、消化道、骨、脑、淋巴结转移病变中确诊率高部分肿瘤细胞印片虽不能确定良、恶性,但可为冷冻切片指供可靠的辅助诊断依据,六、印片难以作出正确诊断的情况和原因-1,主要是不能观察组织结构此外受下列因素影响出现假阳性或疑似癌时的因素制片染色过快,固定时间短,细胞胀大变形,染色不清,结构模糊,易误为瘤细胞。组织感染严重,刺激细胞增生,出现多量核分裂象。,六、印片难以作出正确诊断的情况和原因-2,出现假阴性或难以诊断的原因交界性肿瘤,细胞有一定异形性,但核分裂不明显时,易倾向良性肿瘤诊断。肿瘤分化程度高,即细胞分化好,异型性小,印片细胞数量较少时(乳腺癌、粘液表皮样癌等)。取材不全面某些肿瘤的良恶性决定于它的生物学行为,当其组织结构和细胞形态与正常组织相似时,需综合分析判断(如胸腺肿瘤、肾上腺肿瘤)。,六、印片难以作出正确诊断的情况和原因-3,伴有钙化或骨化的肿瘤,难以印上肿瘤细胞或印片部位不当。缺乏细胞学诊断经验,易作出错误判断。克服方法:认真细致的观察大体标本,询问病史,必要时观察手术部位及情况,注意积累病例,丰富经验。,七、影响细胞印片诊断准确性的因素包括,检查标本中有无足够数量的细胞印片制作的质量丰富的细胞学诊断经验扎实的外科病理诊断基础,八、印片在术中冰冻应用中的局限性,表现在对诊断软组织肿瘤方面敏感性差,原因是:软组织致密程度相对于上皮组织高,印片中脱落细胞少。软组织恶性肿瘤的诊断仅凭细胞的间变程度是不够的,还应结合组织学结构的变化。,九、印片观察诊断工作注意事项,1、在开展快速印片项目前,有意识选择各种类型的标本200例做印片与石蜡切片对照镜检诊断分析,以便熟练掌握印片诊断。2、诊断医生必须掌握各种组织器官正常形态和相应肿瘤良、恶性表现。有经验的病理医生也必须密切结合临床和手术所见。3、优质染片是作出正确诊断、防治误诊的重要保证。切记模糊不清的片子不予诊断,即使有些细胞像恶性,只能提示或作为“疑癌”,并做出相应措施尽快明确诊断。对送检组织本身存在变性坏死以及一些退行性病变,不能以此时所见到的细胞或微粒组织去诊断恶性。4、使用的显微镜要有高清晰度和分辨率,同时要掌握正确的观察方法。由于印片普遍存在厚、薄和染色不均以及脏、乱现象,必须用X2X5的接物镜扫视,待全片观察后选择可疑之处才用中倍、高倍镜观察。5、内分泌肿瘤的良、恶性判断,不能以细胞异型性来区别,不适宜印片诊断或更为慎重对待。(王镇美,梁小曼,2000),十、细胞印片的报告方法-1,依照改良巴氏分级方法分为五级I级为正常II级为增生细胞III级为可疑恶性细胞IV级为高度可疑恶性细胞V级为典型恶性细胞I、II级为良性,III、IV级为可疑,V级为恶性(钱利华,阚秀,1996),十、细胞印片的报告方法-2,分三级A:(1)良性细胞:正常组织细胞、炎性细胞、良性肿瘤细胞(2)异型细胞:轻度、中度、重度异型细胞(3)恶性肿瘤细胞:癌细胞、肉瘤细胞(良性肿瘤在印片中细胞数量较少,恶性肿瘤在印片中细胞数量较多,随着肿瘤恶性度的增高,印片中细胞数量也明显增多)B:(1)恶性:检出癌细胞(2)良性:未检出癌细胞(3)可疑恶性:可疑癌C:级:阴性:正常细胞或一般炎症性细胞级:可疑:核异质细胞,不能肯定炎症细胞、高度变性、癌细胞级:阳性:找到恶性细胞,十一、细胞印片的应用范围,与术中冰冻切片或快速石蜡等并用、互补无冰冻切片机的基层医院、快速明确良、恶性机体表面溃疡病变直接印片停电、机器故障,第二章印片细胞学的具体应用,第一节在乳腺病变诊断中的应用,一、乳腺针吸细胞学(FNAC)的局限性/影响因素,1、乳腺肿块的大小2、取材的准确性3、吸取细胞数4、肿瘤细胞形态变异5、缺乏完整组织结构6、不能根据针吸细胞学估计肿瘤浸润的情况7、不能做出准确的组织分型8、针吸取材少,诊断技术有限如:乳腺癌抽取到坏死液化区,诊断为囊肿。乳腺结核仅见炎性细胞而诊断为炎症。导管内乳头状瘤、巨大纤维腺瘤、叶状囊肉瘤因缺乏组织结构,与乳腺纤维腺瘤、乳腺增生等区分较为困难。,二、乳腺冰冻切片的局限性/影响因素,1、人为假象(细胞肿胀、拥挤)2、肌上皮细胞难以鉴别3、间质纤维组织增生胶原化使导管形态结构不规则,结果使下列疾病不易鉴别:硬化性腺病、放射性瘢痕与硬癌导管内乳头状瘤病、微管腺病与乳头状癌乳腺囊性增生症伴导管上皮增生与导管上皮增生癌变,三、术中冰冻乳腺印片对针吸细胞学及术中冰冻切片的补充作用,直接从乳腺肿块切面获取细胞取材部位准确蘸取细胞多对硬癌、淋巴瘤的诊断等有较大价值,四、乳腺良恶性病变细胞印片的特点-1,良性病变细胞数量较恶性者少多呈团或乳头状排列分化良好不重叠上皮团背景中易见双极裸核肌上皮细胞可见大汗腺分化及泡沫细胞,四、乳腺良恶性病变细胞印片的特点-2,乳腺癌细胞多(满视野)、弥散或呈小巢状癌细胞明显增大,核大小不一,核的形态多种多样,染色质粗、网状、块状。核膜厚、核仁数目增多、形态增大,核分裂象更有价值。胞质不明显,常呈裸核状,核的直径多在15-20m之间背景中少或不见双极裸核细胞癌细胞小、异型性小者易误诊。此时冰冻切片对此类小细胞癌可明确诊断,四、乳腺良恶性病变细胞印片的特点-3,涂片中乳腺良恶性病变细胞核的大小良性病变:核直径11m以上的细胞不到检测总数的30%恶性肿瘤:核直径11m以上的细胞占检测总数的50%以上细胞核在11-14m之间是良恶性交界处过渡指标,易误诊,五、提示需术中冰冻/活检的情况,临床高度可疑恶性、术前细胞学疑有恶性倾向者。此时,不可追求过高准确率而发生假阳性病例,造成不良结局。,乳腺,第二节在颅内肿瘤诊断中的应用,1、95%酒精固定1min,HE染色2、在非胶质肿瘤中良恶性判断的准确率达100%3、对胶质瘤分级判断的准确率达88.3%4、一种快捷、准确的辅助诊断方法,与术中冰冻切片联合应用对诊断有互补作用,尤其是组织量极少、需保留作常规石蜡切片的标本5、认为垂体腺瘤仅凭印片结合临床取材部位可直接诊断,第三节在牙源性肿瘤诊断中的应用,可应用于下列肿瘤的病理诊断造釉细胞瘤牙源性腺样瘤牙源性粘液瘤成釉细胞纤维瘤成釉细胞纤维牙瘤,第四节在淋巴结转移癌诊断中的应用,可用于检查胃癌旁淋巴结中有无癌的转移应注意假阳性与假阴性的存在假阳性的原因:玻片不净,印片背景模糊,染色过程中污染;淋巴结反应性增生,生发中心网状细胞增生活跃,误为上皮样细胞而诊断为癌转移。假阴性的原因:转移灶在淋巴结的边缘区,淋巴结中心剖面上无癌细胞;印片固定欠佳,染色过程中癌细胞脱落;印片中癌细胞数量少,误认为网状细胞。,第五节在郎格罕细胞组织细胞增生症诊断中的应用,有报告可对皮疹印片,55.6%(10/18)的病例可见郎格罕斯组织细胞,早期皮疹检出率高。,第六节在骨髓印片中的应用,一、制片方法,骨髓组织置于载玻片上轻轻滚动,固定,瑞-姬染色。,二、印片在骨髓检查中应用的评价-1,1、除骨髓细胞量减少的疾病外,印片明显优于涂片2、印片与切片总体标本的评估意义基本相同或接近3、印片的3/4病例细胞量高于涂片,两者有显著性差异4、印片评估有核细胞量的价值明显优于涂片,最有价值5、印片诊断的灵敏度和特异性等均优于涂片6、印片使白血病和浆细胞骨髓瘤等血液肿瘤的诊断变得更加明朗和容易,二、印片在骨髓检查中应用的评价-2,8、印片既能准确反映骨髓增生情况,又能观察细胞形态,对有干抽、稀释及疑难患者可提供有价值的诊断信息。9、在贫血诊断中优于涂片如原发性骨髓纤维化、再障、骨髓转移癌、急性和慢性白血病。10、以印片作为判断急性白血病骨髓完全缓解(CR)的标准,更有利于指导临床诊断(涂片中已达CR,而骨髓印片中显示骨髓中仍有相当比例的原始及幼稚细胞,实际上骨髓尚未达到真正的CR。印片可观察到更高比例的原始细胞、淋巴细胞、毛细胞、浆细胞等,只有涂片与印片同时为CR者,其复发率低,缓解期较长。)。,二、印片在骨髓检查中应用的评价-3,11、印片、切片对再障、骨髓异常增生综合征和骨髓纤维化等疾病的诊断更具客观性。有报告,骨髓涂片增生程度符合率为87.0%(201/231),印片符合率为97.4%(225/231)。12、对缺铁性贫血、巨幼细胞贫血、特发性血小板减少性紫癜,骨髓涂片、印片的诊断符合率高于骨髓切片,对白血病骨髓印片的诊断符合率高于骨髓涂片、切片。13、骨髓印片在诊断骨髓纤维化、骨髓坏死等方面不如骨髓切片,而在诊断急性白血病及其分型等方面则优于骨髓切片。,三、涂片的局限性,1、在涂片细胞量减少者如再障、造血减低时,涂片有很高的假阳性。2、涂片在脾亢、骨髓增殖性疾病和反应性骨髓细胞增生症中(除感染和少数骨髓增殖性疾病外)全为假阴性。3、涂片易受干抽和稀释的影响,其增生低下及极度低下的比例多于骨髓印片、切片。,四、骨髓印片和涂片联检的作用,可显著地提高形态学诊断水平,五、骨髓涂片、印片、切片对血液病的诊断价值,231例血液病患者的骨髓涂片诊断符合率为84.0%(193/231)结合骨髓印片可使诊断符合率提高到89.2%(206/231)结合骨髓切片诊断符合率提高到94.3%(218/231)。(张小聚,2006),六、骨髓印片和涂片联检的作用失败原因,活检取材不佳,标本带有过多的血液注意:对骨髓纤维化的诊断与涂片一样不能提供准确的诊断依据。,第七节在肺肿块切除术诊断中的应用,几种肿瘤细胞的形态特点1、细胞畸形怪状,蛇形,蝌蚪形,三角形,纤维形,且散在分布,胞浆呈桔红色,多提示鳞癌。2、如细胞成堆成团,胞浆内有空泡,偏碱,核仁大,多提示腺癌。3、如癌细胞呈裸核样形态似瓜仁,似燕麦状,提示未分化癌。4、见到类上皮细胞,郎罕氏巨细胞,淋巴细胞及坏死为结核病变。其它良性病变细胞都在正常范围内。5、在辨认细胞时,要抓住主要特征,鳞癌,散在分布,胞浆偏酸,形态多形性,有角化珠。腺癌,成堆成群,核偏碱,胞浆空泡,常呈桑椹状,腺泡状,花边样,戒指样结构等特点。未分化癌细胞常呈瓜子仁、牵拉串珠状,并有排队现象。,第八节在消化系统组织诊断中的应用,一、固定液:95%酒精+1/3乙醚,固定时间:5min最佳二、作用:活检法结合印片法检察可明显提高胃癌检出的阳性率和正确性,三镜下胃癌细胞特征,1、癌细胞呈单个或成团聚集,分界不清。胞浆丰富,边缘不规则,嗜碱性,内含弥漫性大小不等之空泡,核呈圆形、不规则形,有的相互重叠。核染色质密集且分布不均,排列紊乱,可见1-2核仁。2、印戒型胃癌细胞体积大,类圆形,胞浆嗜碱,多含有大空泡,核偏于细胞一侧,近似戒指形,染色质呈粗粒状,且分布不均。,四、纤维胃镜直视下所取组织粘膜印片,其阳性率高于病理学诊断的可能原因,1、部分病例所钳出的标本太少,在病理切片时找不到癌组织2、胃粘膜印片,是利用病理组织多方位印片,可得到来自不同层次的癌细胞3、印片细胞结构清晰,易于诊断印片细胞学诊断与病理诊断各有优点和不足。病理诊断能确定细胞类型,细胞学诊断则不易确定细胞类型。两者互补,可进一步提高诊断符合率。,肝,胆,胰,直肠,直肠,第九节印片在女性生殖系统中的应用,卵巢,卵巢,第十节在软组织肿瘤中的应用,中耳,第十二节在淋巴组织增生性疾病中的应用,鼻咽部,鼻咽部,第十三节在涎腺肿瘤诊断中的应用,P63,P63,颌下腺,第十四节在神经内分泌肿瘤中的应用,一、甲状腺肿瘤细胞印片的DNA图像分析(举例),制片:印片丙酮固定,Feulgen染色,以华海电子公司的HPIAS-1000彩色病理图像分析系统分析肿瘤细胞100个,以肿瘤组织中淋巴细胞为对照细胞分析肿瘤细胞的DNA含量和倍体情况结果:良性肿瘤的倍体类型多为二倍体及四倍体类型(93.8%),恶性肿瘤多为非二倍体及异倍体类型(85.7%),尤其是滤泡型癌均为异倍体类型。故分析肿瘤细胞的DNA含量在良恶性诊断上,特别是在诊断滤泡型肿瘤的良恶性方面具有重要价值。,第十五节其他应用,一、核仁组成区嗜银蛋(AgNOR)形态改变与死亡时间(举例),制片:以肝组织印片,95%乙醇固定15,1%蚁酸去离子水溶液(内含2%明胶)与50%硝酸银去离子水溶液按1:2容积混合成工作液,暗室内滴染,室温30min,去离子水漂洗,中性树胶封片,高倍及油镜观察。结果:死后12h内AgNOR颗粒清楚,24h后染色逐渐变淡、模糊、消失。据此可帮助法医在实际检察中推断尸体死亡后经过的时间,二、印片在免疫细胞化学中的应用(乳腺癌、鼻咽癌),1、印片制作:常规印片自然干燥4冰箱保存待检染色前丙酮固定5分钟PBS洗液,3常规免疫组化染色程序2、开展的项目:ER、PR、C-erbB-2、AE1/AE3(前哨淋巴结印片)等3、优势(与组织切片免疫染色比较):受检标本抗原很弱时,印片细胞也能检测避免了繁琐的常规制片程序抗体标记范围可随意控制、节省抗体、减少成本操作简单、成本低、准确性高,与组织切片免疫组化具有相同的结果。,三、在特殊染色/核仁组成区嗜银蛋白(AGNORS)银染色中的应用,1、制片:印片工作液中30min(22-25、暗处)双蒸水浸洗梯度酒精脱水二甲苯透明中性树胶封固(工作液:A液明胶甲酸液2%明胶+1%甲酸。B液50%AgNO3溶液。用前混合。比例A:B=1:2)。2、用途:快速鉴别良恶性肿瘤。,四、引物原位标记(鼻咽癌),引物原位标记(primedinsitu/PRINSlabeling),又称引物介导原位DNA合成(primedinsituDNAsynthesis)前处理:载玻片处理(酸、乙醇清洗、多聚赖氨酸处理印片)。3:1甲醇:乙酸固定PBS洗2min3自然晾干-70低温冰箱保存。结果:黏膜非癌细胞二倍体细胞94%,鼻咽癌细胞二倍体细胞70.7%,考试题:女性,50岁,咽后壁占位,主要参考文献,刘彤华主编.诊断病理学.北京:人民卫生出版社,2006:5.马正中,阚秀,刘树范主编.诊断细胞病理学.关州:河南科学技术出版社.2000:705-715.钱利华,阚秀.术中印片细胞学诊断的作用.诊断病理学杂志.1996,3(2):93-95.王镇美,梁小曼.印片代冷冻切片472例病理定性诊断分析.临床与实验病理学杂志.2000,16(31):259-260雷伟华,刘自光,刘丽萍.157例印片在术中快速病理诊断应用.热带医学杂志,2005,5(4):540-542舒仪经,阚秀.我国细胞病理学的回顾与展望,中华病理学杂志,2005,34(10):625-627.刘喜波,傅燕萍.乳腺手术中细胞印片的病理诊断价值.中华病理学杂志,2005,34(10):625-627ShabaikAS,ClarkRA,Reintgen.DS,etal.Imprintcytologyofneedlelocalizedbreastlesions.Actecytol,1992,137(1):10.,主要参考文献,CarterightDM,Howell.LP.Intraoperativecytologyasanelectivesurgicalprocedure:an
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