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文档简介

微生物实验室培养的基本操作,1 .本组织的灭菌2。徽章的准备3。徽章上的灭菌4。倒置5。微生物接种6。孵化器中的培养7。菌株的保存,培养基的制备原理,微生物的生长和繁殖一般需要水、无机盐、碳源、氮源等多种营养素,根据微生物的种类和实验目的,还需要少量特殊营养素(生长因子)。牛肉软膏蛋白胨培养基是应用最广泛、应用最广泛的细菌基础培养基之一,也被称为一般培养基。含有牛肉奶油、蛋白胨、NaCl。在这里,牛肉奶油为细菌提供碳源和能量,磷酸盐。蛋白胨主要提供氮源。NaCl提供无机盐。制作固体培养基时,应添加琼脂作为混凝剂。培养细菌的时候,用稀酸或碱调节pH值,使其中性或微碱,有助于细菌的生长和繁殖。四,实验操作,(a)准备牛肉奶油蛋白胨培养基(细菌培养用),一。计算,计量2。融化3。ph: ph 7.64。过滤:可以保存此步骤。5.化妆中:在化妆过程中,注意不要把徽章埋在脚或瓶口,可能会被棉签污染。三角烧瓶的数量最好不要超过三角烧瓶容量的一半。6.插头7 .绷带,操作步骤,8。灭菌:将50毫升培养基用球棒移动到三角锥瓶,插入棉花塞,包裹牛皮纸,放入高压蒸汽灭菌锅,压力为100kPa,温度为121,杀菌15 30分钟。用旧报纸包裹培养皿,放入干燥、热的灭菌箱,在160 170下杀菌2h。背板技术,1 .在火边的桌子上放上灭了菌的培养皿,右手拿着装有徽章的锥子瓶,左手拔掉棉花插头。1,2,3,4,背板技术,2。右手拿着锥形瓶,让瓶口快速通过火焰。1,2,3,4,背板技术,1,2,3,4,3。用左手的拇指和食指将培养皿打开到比瓶口稍大的空隙,右手将锥形瓶的培养基(约10-20毫升)倒入盘子上,左手立即盖上培养皿的盖子。背板技术,1,2,3,4,4。等待冷却凝固大约需要5 10分钟。然后反向放置平板,使盘子位于底部,盘子位于顶部。9 .倒置的平板:培养基冷却到约50 时,在酒灯附近倒入板。观察2,2,2,2面后,只有没有细菌污染,才能接种。10。无菌检查:将灭菌培养基放在37 的温室里培养24-48小时。确认灭菌是否彻底。虚线工作方法,第二,留在贝齐的单个细胞不能形成一定的群体,菌落沿着刮伤的地方生长,形成带状的群体。一旦刮了,就能创造出难以达到分离单一殖民地的目的的不均匀的线;第二,留在贝齐的单个细胞不能形成一定的群体,菌落沿着刮伤的地方生长,形成带状的群体。注:1,吸管必须灭菌。试管口和吸管从火焰1 2厘米处脱落并工作。微生物的恒温培养,微生物的恒温培养,微生物的恒温培养,坡度准备,培养基的制造灭菌放置坡度,接种注意点,(1)在接种菌株之前,各划线前、划线后和划线结束在燃烧后主灯附近冷却后工作。(2)划线时不要剪切徽章,分段划线时应从第二次作业开始,始终从上一次划线的终点开始,且末端不连接。(3)工作应始终在酒灯火焰旁进行。菌种保藏,1 .临时保存:接种于固体倾斜培养基,菌落生长后,保存在4冰箱。2.长期保存术:甘油冷冻管法,(a)培养基的制作是否适当,未接种的培养基在孵化器中保温1 2d后,如果母体不生长,培养基的准备就成功了,否则就需要再生。,(b)接种工作是否是无菌要求,如果在培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,

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