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课时跟踪检查(7)动物细胞培养和核移植技术(满分: 50分钟时间: 25分钟)一、选择题(每小题2分,共20分)1 .动物细胞培养过程中使用胰蛋白酶的目的()a .将动物组织分散在单一细胞中b .去除细胞壁,制成原生质体c .去除细胞膜,暴露原生质体,便于细胞融合d .促进蛋白质水解的多肽2 .一般来说,动物细胞的体外培养必须满足以下条件()无毒环境无菌环境需要在培养液中加入血浆需要温度接近动物体温o2,不需要加入CO2不需要维持培养液的pH值A. B.、C. D.3 .以下关于动物细胞培养的描述准确为()a .动物细胞培养的目的是获得大量的分泌蛋白质b .培养动物组织块和分散细胞,效果大致相同c .细胞遗传物质的变化发生在原代培养过程中d .培养高度分化的动物体细胞一般幼体不能4 .动物细胞培养过程的顺序为()原代培养继代培养胰蛋白酶处理组织,形成单一细胞,制成细胞悬浊液A. B.C. D.5 .一只羊的卵泡核被另一只羊的体核置换后,该卵泡多次分裂,移植到第三只羊的子宫内发育,结果产生了下一只羔羊。 此克隆技术有多种用途,但不能()a .选择性繁殖某些性别的牲畜b .繁殖牲畜中的优秀个体c .用于保存种子的d .改变动物基因型6 .右图为哺乳动物(羊)的生殖过程,以下记述不正确的是()a .个体2为克隆动物,c为高度分化的体细胞b .个体2的遗传性状与提供c细胞的羊完全不同c .产生动物个体1和动物个体2的生殖方式不同D.e细胞是完成减数分裂的卵泡7 .使用动物、植物成体的体细胞进行体外培养,以下正确叙述()a .我们需要一个a.co2孵化器b .一切都需要液体培养基c .必须在无菌状态下进行d .能体现细胞的全能性8 .某研究组培养某动物肝肿瘤细胞(a )和正常肝细胞(b ),现正确阐述如下()制备肝细胞悬浊液时,首先用剪刀剪下肝组织,用胃蛋白酶处理b .肝细胞培养过程中,培养液中5%的CO2常刺激细胞呼吸c .为了防止培养中的杂菌污染,可以在培养液中加入适量的干扰素d .使用血细胞计数板计数的方法可推测b细胞比甲细胞的增殖周期长9 .以下关于细胞培养的描述是正确的()a植物细胞可光合作用,培养基中无需添加有机营养物b .培养植物细胞时,首先要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁c .动物细胞培养只是为了得到具有特殊基因变异的细胞d .培养动物细胞时,用胰蛋白酶处理动物组织得到单一细胞10 .生物技术发展速度快,灭绝生物的“复活”已不再是神话。 如果世界上最后一头野驴刚刚死亡,以下提供的“复活”野驴个体的方法成功是()a .提取野驴体细胞,利用细胞培养技术培养新个体b .融合野驴体细胞,组织培养成新个体c .取出野生驴体核移植到母家驴脱核卵泡中,培育成新个体d .将驴基因导入驴受精卵,培育成新个体二、非选择问题(共计30分)11.(9分钟)科学家可以通过转基因技术获得含人生长激素基因的奶牛,为加快转基因奶牛的繁殖,克隆转基因奶牛(见下图)。 请与图标一起回答以下问题(1)进行细胞培养时,从转基因奶牛中分离提取的组织细胞,形成单一细胞需要用_酶处理。(2)用于核移植的供体细胞,一般选择的是继代10多岁以内的细胞。 原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)进行初代培养时,细胞增殖的方式除了表现为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _和接触抑制等特征之外,细胞增殖还表现为。(4)将培养的供体细胞注入核中,去除卵母细胞核的目的是: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(5)将重组细胞在培养液中培养的重组胚胎移植到受体母牛中,该母牛产下与供体奶牛的遗传物质相同的小牛,但不能100%复制。 原因是._ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(6)关于上述动物细胞工程的技术是: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _。 转基因奶牛克隆成功,动物说明_具有全能性。12.(11分)根据下列资料回答问题:资料:美国科学家已在实验室培养膀胱,顺利移植7名患者。 这个培养过程是从患者膀胱中取出普通邮票一半大小的活细胞样本,膀胱由外侧向内侧由肌肉、胶原蛋白和膀胱上皮三层组成。 从活细胞样品上剥下胶原蛋白,将肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别放入培养皿中,约1周后将这些细胞放入海绵形状的可生物分解的胶原制的“支架”中继续培养,再过7周左右数万个细胞就已经繁殖到15亿个左右,包括膀胱上皮在内医生将“新膀胱”移植到患者膀胱上。 这样,新器官继续成长,将失去旧器官功能的部分与旧器官“重建”。 培养过程如下图所示(1)a工艺属于细胞工程学的_,其培养基与植物组织培养基中营养成分的主要差异在于前者包括_ _ _ _ _ _ _。(2)b过程从数万个细胞繁殖到15亿个细胞是因为需要_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _环境。(3)重组新器官和旧器官的“重组”_ _ _ _ _ _ _ (注:是或否)基因,是因为新器官和旧器官的_相同。(4)“新膀胱”移植后, 因为新老器官含有_蛋白质等物质。(5)除上述方法外,还可将患者的体核转移到脱核的_。 它利用体细胞_技术形成相应的组织、器官。13.(10分钟)现有甲、乙两种化学物质可能具有一定的畸形、致癌作用,可以利用动物细胞培养的方法鉴定是否有毒,比较两者毒性的强弱,请完成以下实验报告。I .实验材料:小鼠胚胎。ii .药品器具:胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适当浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、玻璃盖片、光学显微镜、小鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。iii .实验原理: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _根据这些变异细胞在全培养细胞中所占的比例(以下称q值),可以判断该化学物质的毒性。iv .实验程序:(1)细胞悬浮液的制备:将小鼠胚胎用培养皿切开,转移到玉米瓶中,加入胰蛋白酶液进行处理,使胚胎组织离散到各个细胞中,加入动物细胞培养液制备细胞悬浮液。(2)进行细胞培养取a、b、c三个清洁培养瓶。._ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)制作临时粘合片:细胞繁殖到约8代后,同时从细胞培养罐中取出3个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞从瓶壁脱落,加入动物细胞固定液迅速固定细胞,在不同的分裂时期固定细胞。静置一段时间后,从各培养瓶的底部分别吸取适量的细胞悬浊液,滴到与培养瓶相同编号的载玻片的中央,加入12滴一定浓度的_染色,35 min后盖上玻璃罩,制成临时粘贴片。(4)镜子检查和统计:在显微镜下放置虚拟装置薄片,然后在.比较,在确认发生上述变异的细胞的同时,统计该变异细胞相对于细胞总数的百分率(q值)。v .实验结果:培养瓶子a.a乙组联赛c.cq值1.3%12.5%0.1%vi .实验结论: _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _答案1 .筛选a动物细胞培养前,用胰蛋白酶分散组织块中的细胞,增加与培养液的接触面积,使培养变得容易。2.d动物细胞体外培养要求环境无菌、无毒,细胞培养液中添加血清、血浆等天然成分,培养温度接近动物体温。 动物细胞培养需要O2和CO2,O2对细胞代谢需要,CO2能够维持培养液的pH值。3 .选择d获得大量分泌蛋白仅仅是动物细胞培养应用的一个方面。 分散的动物细胞比组织块更容易培养。 细胞遗传物质的变化发生在传代培养中。4.d动物细胞培养是将动物胚胎或幼龄动物器官用胰蛋白酶处理制成细胞悬液,再通过原代培养和传代培养获得细胞株。5 .选择d调查动物体核移植的用途。 核基因来源于体细胞,因此不会改变动物的基因型。6 .在d的核移植过程中,去核卵泡通常不是完成减数分裂的卵泡,而是选择处于减数二次分裂中期的细胞。选择c动、植物成体的体细胞进行体外培养必须在无菌条件下进行。 动物成体体细胞离体培养用液体培养基对不能表达细胞全能性的植物成体体细胞的离体培养不一定是液体培养基,可以表现细胞的全能性。8 .选择d制备肝细胞悬浮液时,首先用剪刀剪下肝组织,用胰蛋白酶或胶原酶处理。 肝细胞培养过程中,通常在培养液中通过5%的CO2来维持培养液的pH值。 为防止培养中的杂菌污染,培养液中可加入适量的抗生素。9.d植物细胞培养中使用的培养基培养必须含有丰富有机营养物的植物细胞时,不需要纤维素酶和果胶酶处理,培养植物细胞在植物细胞杂交过程中需要去除植物细胞细胞壁的动物细胞的目的是获得细胞或细胞代谢产物的动物细胞时,应用胰蛋白酶处理动物组织10 .选择c野驴的体细胞的全能性已经受到限制,将无法培养形成新个体的野驴基因导入到驴的受精卵中,培育出拥有野驴基因的驴的野驴体核中存在所有变成野驴的基因,因此应该通过核移植技术使野驴“复活”11 .分析: (1)实践中常用胰蛋白酶处理分离动物组织细胞。 (2)传代十几岁以内的细胞代谢旺盛,分裂能力强,遗传物质无变化,适合作为核移植的供体细胞。 (3)进行初代培养时,细胞会因有丝分裂而增殖,同时表现出壁的生长和接触抑制。 (4)去除卵母细胞核的目的是克隆动物个体的大部分遗传物质来源于供体细胞。 (5)生物性状是核基因和细胞质基因协同作用的结果,同时生物性状也受环境因素的影响,克隆动物不是供体奶牛的100%复制品。 (6)该克隆动物的培育过程涉及核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术,说明高度分化的哺乳动物体细胞核还具有全能性。答: (1)胰蛋白酶(2)该细胞代谢旺盛,分裂能力强,遗传物质无变化;(3)有丝分裂壁生长;(4)克隆的动物个体遗传物质大部分是供体细胞;(5)生物性状受核基因和细胞质基因控制;(6)生物性状受环境因素的影响;(6)核移植、动物细胞培养、胚胎移植技术12 .分析: (1)图中的a过程为动物细胞培养过程,动物细胞培养基成分与植物组织培养基中营养成分的主要差异在于前者含有动物血清。 (2)动物细胞培养不仅需要无菌无毒的环境,还需要适当的营养。 (3)由于新器官和旧器官的遗传物质相同,新器官和旧器官的“重组”不是基因重组。 (4)新老器官细胞具有相同的表面抗原等物质,因此“新膀胱”移植后不能成为抗原。 (5)运用体核移植技术将患者体核转移到去核卵母细胞,重组细胞即使培养也能形成相应的组织器官。答: (1)动物细胞培养动物血清;(2)有丝分裂(细胞分裂)温度和pH气(3)非遗传物质(4)不同(5)卵母细胞核移植13 .解析:有毒物质会引起细胞变异,物质毒性越强,细胞变异的数量越多,就能判断物质的毒性。 实验通过观察细胞染色体可以判断细胞是否变异。 实验结果表明,c组为
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