洗板机PPT课件

.,1,洗板机,.,2,酶联免疫吸附实验（ELISA）,酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay简称ELISA)是在免疫酶技术(immunoenzymatictechniques)上发展起来的一种新型免疫测定技术。ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。,.,3,洗板机的作用,替代实验人员工作，减轻实验人员的劳动强度。ELISA是一项比较成熟经典技术，它是一种非均相免疫分析，即在反应中的每一步都有洗涤过程，从而去除未反应物质和干扰物质，ELISA的洗板工作是一项简单、重复的机械工作，完全可以由洗板机来完成，实验人员有更多的时间做更重要的工作。,.,4,保证ELISA结果的可重复性：洗板机大多是由微电脑控制的，能够准确地按照设定的参数运行，在正确使用和正确运行的前提下，结果的可重复性是容易得到保证的。,.,5,有效防止生物实验危险因子对环境的污染：进行ELISA检测时，经常要使用血清、体液、组织等生物材料，任何生物材料都应视为传染性的。洗板机洗板时，将所有的废液吸进废液瓶中，容易进行无害化处理。,.,6,手工洗板与机器洗板,通常微孔板条的洗涤主要有两种方式，一种是手工洗涤，一种是使用洗板机洗涤。前者对工作量不大的临床实验室，可能较为经济方便，但如操作不规范，有可能会造成板孔之间的相互交叉“污染”。这个时期基本以手工操作为主，生物安全保护欠缺，测试显色也多以目测主观判断为主，有很大的主观；因此，使用洗板机洗涤，不但可减轻实验室技术人员的劳动强度，而且有利于保证ELISA测定的特异性。,.,7,洗板机经过数十年的发展，由最初简单的多头吸和加液系统，发展到了今天的融合多种洗涤功能于一身的全自动洗板机，如震荡、涡流、底部冲洗、两点吸液、连续式冲洗等多种功能方式，并且冲洗压力、冲洗距离、冲洗时间可根据需要来进行调节，此外有的还具有不同类型微孔形状的选择功能。,.,8,洗板环境：洗板环境实际上是一组有利于改进洗涤效果的参数及洗涤动作。对于具体应用来说，有的很实用，效果也不错，如底部冲洗、两点吸液、震动、交叉吸液(漂洗)等；而有的可能实际洗涤效果并不佳。对洗板参数和洗涤动作的精心全面的设计，应可以取得很好的洗涤效果。,.,9,洗板机洗涤板孔的一般机制,洗板机洗涤板孔的一般机制主要涉及到两个物理作用过程，一是通过加液和吸液对原板孔中液体的一个直接稀释过程，其优劣的评价指标是每次吸液后，板孔中液体的残留量；二是与加液和吸液之间所间隔的时间有关的对板孔内残留液体的间接稀释过程，这个过程与液体的扩散有关，间隔时间越长则扩散越充分。,.,10,因此，在洗板机的研制中，要达到最佳的洗板效果，就需要围绕这两个方面来做文章。首先要尽可能的降低每次吸液后板孔内液体的残留量。这是评价洗板机洗板效果的最为关键的参数。通常为降低洗板机每次吸液后的液体残留量，可采用两点吸液的方式吸液。其二是加快扩散的速率来缩短加液和吸液之间的间隔时间，同时保证有充分的扩散。通常的措施有震荡、涡流、底部冲洗和连续式冲洗等，适当增加震荡的振幅和频率可增加扩散的充分性。,.,11,洗板机的发展,(一)简易型洗板机：简易型也可称为手动式洗板机，一般由负压泵与清洗头组成，可完成最基本的吸液动作和加液动作的装置。这类装置，成本低，使用方便，工作量不大时可以使用。这个时期一部分拥有单机机构，可以用酶标仪做定性测试，在清洗过程中使用洗板机来清洗微孔板，读数用酶标仪读数。,.,12,洗板机的发展,(二)自动式洗板机：其基本结构与简易型洗板机一样，一般也是由负压泵与清洗头组成，但有自动程序控制功能，仪器可根据用户的设置完成预定次数与条数的洗板，有的具有简单的储存功能。主要目的是利用自动化技术，替代手工操作。其中有条式与板式之分。如LABSYSTEM的W4，BIORAD早期的1250，拓普公司的DEM2等。,.,13,洗板机的发展,(三)集成环境式洗板机：此类洗板机是随着ELISA的普遍应用，由仪器生产厂商根据ELISA应用专家的建议，结合各自对洗板技术的研究而发展起来的，其特点在于能提供良好的洗板环境，强调洗涤效果而非自动化，具有一定的智能特性，如LABSYSTEM的ACSENTWASH，拓普的DEM-3等。自动化集成和单机共存阶段。随着标本量的不断增大，出现了平台化样本前处理，开始平台集成酶标仪和洗板机，形成酶联免疫系统和单机测试共存的局面。,.,14,洗板机的选购时应考虑的因素,洗涤功能的充分性：能否提供可选择的洗板环境，如洗板次数、条数、浸泡时间等是洗板机的基本参数，一般均可满足。板孔的兼容性与扩展性：兼容性主要是对于国内不同规格、尺寸略有差异的微孔板的兼容，仪器应具有对微孔板的位置调节功能，适应国内ELISA试剂盒中微孔板条的实际情况。,.,15,仪器自身及洗涤效果的可靠性：一是仪器自身的可靠性，保证仪器在使用寿命期内可以正常显示、精确运动等，这可通过考查仪器生产厂商的技术与生产实力来论证；二是洗涤效果的可靠性，即真正达到代替手工洗涤、甚至优于手工洗涤的目的。配件是否充分：厂方是否可以提供常用的、易损的配件，如清洗头，应该8道、12道各备用1个，并且定期淘汰，像洗液瓶、硅胶管等应可方便买到。,.,16,售后服务是否及时、价格是否合理：洗板机是使用率相对较高的仪器，单从运动角度对比