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文档简介
,第十五单元生物技术实践,第1讲微生物的利用,考点(一)大肠杆菌的培养和分离,为防止过热杀死目的菌种，需冷却后使用,烧红(玻璃刮刀上的酒精燃尽),在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,接种环、接种针或其他金属用具；玻璃刮刀,灼烧灭菌,实验用具在6080烘箱中烘干；培养基冷却待用,15min(若含有葡萄糖，灭菌时间30min),121，1kg/cm2压力(若培养基中含有葡萄糖，防止其碳化，90以上，500g/cm2压力),培养基、玻璃器皿等,高压蒸汽灭菌,玻璃砂漏斗用1mol/L的HCl浸泡，抽滤去酸后蒸馏水洗至中性，干燥后保存,尿素滤液过滤完毕,G6玻璃砂漏斗过滤,尿素培养基,过滤灭菌,杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者,划线结束,杀死上次划线后残留在接种环上的菌种，使下次划线的菌种直接来自上次划线末端，使每次划线菌种数目减少，达到分离菌体、获得单菌落的目的,每次划线前,杀死接种环上原有的微生物，避免接种环上可能存在的微生物污染培养基,第一次灼烧,考点(二)分离以尿素为氮源的微生物,使培养基上形成单个细胞繁殖而来的子细胞群体菌落,目的,单菌落更易分开，但操作复杂些，可用于计数,方法简单，但不适宜计数,特点,将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落,通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细
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