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文档简介

1,2,3,4,主题2土壤中降解尿素的细菌的分离和计算,1,主题背景,1,要素的利用,要素是重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌只有把尿素分解成氨才能被植物利用。2,由于细菌使用尿素的原因,土壤中的细菌合成脲酶,4,主题目的,从土壤中分离出可以分解尿素的细菌,统计每克土壤样品中包含多少细菌,8,1。研究思路,I .筛选菌株,ii .统计殖民地数,三。设定对照,1,案例:启示:寻找目的菌株时,根据对生存环境的要求在适当的环境中寻找。原因:由于温泉温度70 800,大部分微生物只过滤了船坞细菌。DNA聚合酶链修复是一种在体外大量复制少量DNA的技术,需要高温(930C) DNA聚合酶。(I)筛选菌株,2,实验室内微生物的筛选原理:人在抑制或阻止其他微生物生长的同时,提供了有利于目的菌株生长的条件(营养、温度、pH等)。什么是可选徽章?3,分解土壤中尿素的细菌的分离和数量所需的培养基:在物理特性上,这种培养基是什么样的?固体培养基,该培养基中用作碳源,氮源是什么?碳源:葡萄糖,元素氮源:元素,培养基中的氮源只有能够合成元素,尿素酶的微生物才能分解元素,尿素可以用作氮源。缺乏脲酶的微生物不能分解尿素,氮源不足,无法繁育和繁殖,因此可以使用此培养基选择分解尿素的微生物。5,培养液选择分解尿素的微生物的原理,13,6,如何证明这种培养基具有选择性?以尿素为唯一氮源的培养基,牛肉奶油蛋白胨培养基分离尿素细菌,判断培养基的选择性,只生长尿素细菌,生长多种微生物,14,6,如何证明培养基的选择性?以尿素为唯一氮源的培养基牛肉软膏蛋白胨培养基,分离尿素细菌,判断是否可选,只生长尿素细菌,繁育多种微生物1,显微镜直接计算。利用血细胞计数板用显微镜计算一定量样品中的微生物数量。ii .统计菌落数:死细菌和活细菌是无法区分的;不适合移动的细菌数量。需要相对高的细菌浓度。个人的小细菌很难用显微镜观察。缺点,2 .间接计数法(生菌计数法);原则:稀释度足够高时,微生物在固体培养基上制造的群体作为一个单细胞繁殖。也就是说,群体本来就代表单细胞。一般方法:稀释涂层平板法。每克样本殖民地数=(cv) m其中,c表示在平板上生长的平均殖民地数(根据稀释度),v表示用于涂层平板的稀释倍数(ml),m表示稀释倍数。注意事项为了确保正确的结果,一般选择的群体数在30334300的声誉上进行统计。为了使结果接近实际,可以将相同的稀释度添加到3个以上的碟子中,涂上涂层后培养,计算出殖民地的平均水平。统计菌落往往低于活细菌的实际数量。设置对照组的主要目的是排除实验组的非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可靠性。(iii)设定对照:19,例如,在对分解元素的细菌的筛选和殖民地数量进行统计实验时,a学区从106倍稀释培养基中筛选出了约150个殖民地,但其他学生在同一稀释度中仅选择了约50个殖民地。分析其原因。原因:土样不同,培养基污染或操作错误(或混合其他含氮物质)的情况下,摘要:通过本例,可以看出实验结果必须具有说服力,必须设置对照组。,节目1:其他学生用相同的土壤样本和a同学一起进行了实验,节目2: a同学准备的培养基没有土壤样本的培养,作为空白对照,证明培养基被污染了。结果预测:结果与a同学一致,证明a没错。结果不同的话,证明a同学在操作上的错误或徽章准备上有问题。ii .实验的特定工作(I)土壤取样从肥沃湿润的土壤中取样。先铲出3厘米表土药,然后重新取样,将样品装入事先准备好的信封。取土用的小铲子和装土的信封,使用前要灭菌。准备徽章:用于制造尿素为唯一氮源的可选徽章。火焰旁边应该叫土壤10g。在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁稀释3样品,(iv)涂上样品,实验时要在培养皿上做标记。请注明培养基类型、培养时间、稀释程度、培养物等。24、iv。取样涂层,分离不同微生物的其他稀释也是原因:土壤中不同微生物的含量,微生物培养和观察,菌落数每24小时群集一次。选择殖民地数量稳定时的记录作为结果,防止培养时间不足,群体流失。培养其他微生物经常需要不同的培养温度。细菌:在30 37 培养1 2d放线菌:在25 28 培养5 7d真菌:在25 28 培养3 4d。26,如果两个以上殖民地的数量得到了位于30334300的板块,稀释工作将更加成功,殖民地的数量也可能是可能的,如果相同稀释倍数的三个重复殖民地的数量有很大差异,则表明实验不正确,需要重新实验。微生物培养和观察,iii。结果分析和评估1。通过对照组实验,培养菌有污染时菌落数高;培养物混合在不同的氮源中,群体多种多样,群体数量高,很难选择分解元素的微生物。2.提示:选择每板有30-300个菌落的稀释率,最适合计算每克样品中细菌的数量。相同稀释倍数的重复三个种群的数量不能相差太大,这意味着实验不准确。四、操作提示、灭菌操作、显示、计划时间、5。以尿素为唯一氮源的培养基上添加酚红指示剂的课外延长。培养某种细菌后升高PH,表示该细菌能分解尿素的指示剂就会变红。饮用水中大肠杆菌数量的测定方法是通过将一定数量的水作为细菌过滤器放入过滤膜并培养在李红米蓝培养基中,大肠杆菌群菌落表示黑色,并描述水样中大肠杆菌的数量,来获得。Escherichia coli是黑色中心,金属光泽,Escherichia coli是EMB(翡翠)的典型特征,本主题知识摘要:6,案例分析,示例1。确定细菌生长规律的正确表达是a .液体培养基中的b .至少一个细菌C. 1个细菌接种d .及时补充消耗的营养物质,分析:细菌群体生长规律的测定是在特定条件下进行的。包括细菌、具有一定体积的培养基、液体培养基、细菌总数的定期测定等。只有在这种条件下,才能测量细菌的生长规律。微生物的生长只能用一种细菌的子细胞群的变化规律来表示。一定体积是为微生物提供一定的生活环境。液体培养基可以通过样品推测细菌总数。接种多种菌后,不计较一种微生物的生长规律,会发生种间斗争。接种时要保证一定的接种量。答案:a,1。细菌群体生长法测定的正确表达是()a .液体培养基中b .至少接种一种细菌。c .接种一种或多种细菌。d .及时补充消耗的营养素。2.使用选择培养基的目的是培养()a .细菌。b .培养细菌c .量产必要的微生物。d .将某些微生物的某些特性与其他微生物区分开来。3.能够合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分别为(A.CO2和N2B .葡萄糖和NH3C。CO2和尿素D .葡萄糖和尿素,实践培训,A,C,D,4。以下不准确地叙述了()a .科学家在70-80度的热泉中统计高温TaqDNA聚合酶b .稀释度的5个板的菌落数为M1,M2,M3,M4,M5,将M3设定为此样本菌落数的估算值的主要目的是排除非测试因素对实验组中测试结果的影响,并对实验结果的可信度5.为了培养和分离酵母以消除杂菌,经常在培养基上练习()a .更多的氮源物质B .更多的碳源物质C .青霉素等药物d .高浓度盐

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