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文档简介
1,主题1基因工程,1-1脱氧核糖核酸重组技术的基本工具,2,假设?可以种植具有抗虫特性的抗虫棉吗?3、基因工程的概念,基因工程:指根据人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物体新的遗传特性,创造更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。因为基因工程是在DNA分子水平上设计和构建的,所以也被称为DNA重组技术或基因剪接技术。4、基因剪接技术或DNA重组技术、生物体外、基因、DNA分子水平、生物遗传性状的定向修饰、剪切、剪接、导入、表达、基因重组、理解基因工程的概念、5、抗虫棉基因工程培育的简要过程、6、抗虫棉基因工程培育的关键步骤、关键步骤1、从苏云金芽孢杆菌细胞中提取抗虫基因、关键步骤2、抗虫基因与棉花DNA“缝合”, 关键步骤3:抗虫基因进入棉花细胞,7、解决培育抗虫棉花的关键步骤需要哪些工具? “分子手术刀”限制性内切酶,“分子缝合针”脱氧核糖核酸连接酶,“分子转运蛋白”基因载体进入受体细胞,8,1-1脱氧核糖核酸重组技术的基本工具,“分子手术刀”限制性内切酶,“分子缝合针”脱氧核糖核酸连接酶,“分子转运蛋白”基因载体进入受体细胞,9、识别双链脱氧核糖核酸分子的特定核苷酸序列,并在每条链的特定位置打断两个核苷酸之间的磷酸二酯键。主要从原核生物中分离纯化,4000种。1.资料来源:2。物种:3。行动:5。结果:形成两种末端。一种是“分子手术刀”限制性内切酶,另一种是切割方法:位错切割和平行切割,10,g,限制性内切酶切割磷酸二酯键,11。限制性酶作用过程,12。1.大肠杆菌的一种限制性内切酶(EcoRI)可以识别GAATTC序列,并在G和A之间切割形成粘性末端。2.Sma能识别CCCGGG序列,并在c和g之间切割形成一个平端。两种常见的限制性内切酶,13,SMA,平端,平端,14,ECOR,粘端,粘端,15,什么是粘端?当限制性酶从识别序列的中心轴的两侧切割时,由限制性酶切割的两条单链DNA的切割部分具有几个突出的核苷酸,并且它们正好互补和匹配。这种切割被称为粘性末端。什么是平端?当限制性内切酶从识别序列的中心轴上切下时,两条单链DNA的切断是平的。这种截止称为平端。17,基因的针和线:脱氧核糖核酸连接酶,18、g、连接酶连接磷酸二酯键,脱氧核糖核酸连接酶的作用过程:2,分子缝合针脱氧核糖核酸连接酶,19,T,磷酸二酯键,A,20,作用位点:是磷酸二酯键(扶手)不是氢键(梯子),而脱氧核糖核酸连接酶连接两条脱氧核糖核酸链。,21,连接粘性末端,连接粘性末端和平端,分类,功能,大肠杆菌DNA连接酶,连接酶类型:T4DNA连接酶,22,两个DNA片段必须有互补的粘性末端才能拼接在一起,DNA连接酶的缝合作用可以“缝合”粘性末端之间的缝隙,注意:DNA连接酶可以连接双链DNA中的单链DNA缝隙,但不能连接单链DNA!脱氧核糖核酸连接酶和脱氧核糖核酸聚合酶是一回事吗?T4DNA连接酶也可以“缝合”平端之间的间隙,但效率相对较低。DNA连接酶的拼接效应为24。AA TTG、C和25的缝合效果。DNA聚合酶可以催化磷酸二酯键的形成。它们都是蛋白质。它们不需要或不需要形成一个完整的重组脱氧核糖核酸分子并形成一条脱氧核糖核酸链。基因工程、DNA复制以及DNA连接酶和DNA聚合酶之间的比较只能将单个核苷酸连接到现有的DNA片段以形成磷酸二酯键,在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键,27,3,基因进入受体细胞的载体,和1,基因工程的载体被称为:分子转运体,2。常见载体的类型:质粒,噬菌体的衍生物,动物和植物病毒,28,讨论和讨论,2。非典病毒能用作基因载体吗?3、作为载体,如果没有切割位点怎么办?4.携带目标基因的载体进入受体细胞了吗?如何识别?如果目标基因在被引入受体细胞后不能复制呢?从化学成分来看,载体应该包含哪些成分?双链脱氧核糖核酸,不能,不能脱氧核糖核酸重组,载体应该有标记基因,可能造成基因丢失,29,作为载体的必要条件,1。能自我复制能进入受体生物细胞并在受体生物细胞中复制和表达;2.有一个或多个限制性位点可以结合靶基因3。有易于观察的遗传标记基因。它对
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