脑缺血模型总结PPT课件

.,1,脑缺血模型的发展,1986年，Koizumi等首先采用血管内栓塞堵塞脑中动脉开口建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。1989年，Longa等采用血管内栓线阻塞法制备该模型。之后发展起来的还有双侧颈总动脉结扎法、开颅机械闭塞法、微栓子栓塞阻断法、化学刺激诱导血栓性闭塞法、光化学诱导血栓形成法等。综合考虑操作难易度以及缺血效果等方面因素，运用最为广泛的是血管内栓线法。,.,2,4VO全脑缺血法,麻醉动物，电凝烧灼双侧椎动脉；颈前分离双侧颈总动脉；分别结扎双侧颈总动脉的远近端，并从中间剪断，以确保阻断动脉血流。优点：缺血模型状态稳定，成功率较高。缺点：对实验温度要求较高，如控制不当，大鼠易在实验过程中死亡。,.,3,双侧颈总动脉结扎法,麻醉动物，颈前分离双侧颈总动脉；分别结扎，结扎14min,以确保阻断动脉血流后缝合。优点：操作较简单，对动物的创伤较小。缺点：对实验技术要求较高，在分离迷走神经时，若操作不当，大鼠易在实验过程中死亡。,.,4,开颅法,麻醉动物，耳眼连线的中点垂直切开皮肤，通过钝性分离颞肌，开颅后暴露MCA，用电凝器横过嗅束旁的MCA使其凝闭，用10号手术丝线结扎MCA，造成MCA支配区局灶性脑缺血模型。优点：实验条件恒定，缺血效果可靠，全身影响小，局部条件可控制。缺点：需要开颅，创伤大，易感染。,.,5,光学法,将大鼠头部固定于立体定位仪上，切开皮肤，暴露颅骨，静脉注射光敏材料虎红酸钠，用特定冷光源(500-600nm)照射切口处颅骨，光线透过颅骨与血管内的光敏物质接触，激发光化学反应而产生单线态氧，直接损伤血管内皮细胞而诱导血栓形成。优点：不开颅，手术创伤小，动物易长时间存活，血栓形成过程与人类近似，适用于抗血小板、抗血栓及内皮细胞保护药物的急慢性动物实验研究。缺点：较早地导致终未动脉及微血管永久性闭塞，不利于扩血管及促进侧支循环作用的研究。,.,6,栓塞法,麻醉动物，将无菌干燥研碎筛滤的血凝块、碳素颗粒、塑料颗粒、花生四烯酸盐等作为栓塞剂，由颈外动脉注入栓子后结扎，开放CCA，栓子由颈内动脉(ICA)进入MCA，造成以MCA供血区脑组织损伤为主的缺血模型。优点：不用开颅，操作较为简单。缺点：无法预测栓塞部位与大小，脑组织缺血不一，不利于神经症状和脑组织定量分析。,.,7,Longas线栓法,麻醉动物，颈部正中切口，暴露并结扎CCA和ECA，在CCA分叉处剪一小口，插入40手术丝线，进入ICA1720mm,阻断MCA起始端及其所有侧枝供应，在一定缺血时间后抽出丝线至CCA分叉处，进行再灌注。,.,8,检测指标,参照ZeaLong评分标准，分别于大鼠术后清醒时、再灌注开始前后评分：0分：无神经损害症状；1分：不能完全伸展左侧前爪；2分：向左侧转圈；3分：行走时向左侧倾倒；4分：不能自发行走。,.,9,Longas法的优缺点,优点：无需开颅，对动物病理刺激小。模型重复稳定性高，方法相对简单。,缺点：对动物体重要求严格，一般在250-300g间，且丝线粗细要适中。,.,10,改良线栓法,方法步骤：仅分离并结扎颈总动脉，于颈内外动脉分叉处插入线栓，而不分离颈外动脉和翼腭动脉。优点，能精确控制缺血和再灌注时间，模型损伤评价高。缺点：模型成功率高,.,11,二法比较,Longas法改良法神经功能评分2.20.842.60.55模型制作时间30.834.6220.174.88成功率83.33%83.33%死亡率16.67%0梗死率（23.037.94）%（18.652.61）%,.,12,梗死灶区域比较,Longas传统线栓法,改良线栓法,.,13,参考文献1孙宇，严国锋.改良线栓法大鼠中脑动脉阻塞模型的建立J.中国比较医学杂志，2008,18（8）:8-102吴巍，王彦云等.开心解郁汤对双侧颈总动脉结扎大鼠行为学及脑血流量的影响J.中医药现代化，2010，,12（4）：562-5643王军，大鼠脑缺血模型研究进展J.中医研究，2003,15（5）:60-614WalsonBD，PraoloR，DietrichMD，eta1InductionofreproduciblebraininfarctionbyphotochemicallyinitiatedthrombosisJAnnNeurel，1985，17：4975张成英，陈前芬走置脑映血模型血管阻断郝住的选择四川解剖学杂志20008(3)：146_1496吴远华，朱广旗，胡蓉.线栓法大鼠脑缺血