王伟龙-环境毒理学——鱼类毒性试验

环境毒理学鱼类毒性试验,化研1215王伟龙指导老师林爱军日期20121010,环境毒理学鱼类毒性试验,主要内容,环境毒理学鱼类毒性试验,1前言,鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重要的经济动物。在污染水体中，当污染物达到一定浓度时，就会引起鱼类各种中毒反应。在人为控制条件下，进行各种鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强度测定、水体污染程度、废水及其处理效果检查，而且也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供科学依据。,环境毒理学鱼类毒性试验,2目的与要求,通过本实验，熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析和报告拟写等全过程。,环境毒理学鱼类毒性试验,3实验原理,污染物浓度达到一定程度,环境毒理学鱼类毒性试验,3实验原理,确定半数致死浓度（24hLC50、48hLC50、72hLC50和96hLC50），并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度，也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。,表3-1不同溶液浓度和不同培养时间下鱼类的死亡率,返回,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.1实验鱼的选择与驯养,原则,斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种。本实验以斑马鱼为实验鱼。建议的实验温度21-25，建议实验鱼的全长2.01.0cm。试验前必须驯养（健康选择）：相同水质水温的水体中至少驯养7d（2个月）、每天换水、每天喂食1-2次、试验前一天应停止喂食、驯养期间试验鱼死亡率不得超过5。,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.2实验仪器设备,（1）实验容器实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成的水族箱或水槽。容器的深度必须超过16cm，水体表面积越大越好。同一实验应采用相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容器，可在容器上加上网罩。实验容器使用后，必须彻底洗净，以除去所有毒性残留物。（2）其他溶解氧测定仪、溶解氧控制仪、水硬度计、温度控制仪、pH计、分析天平、分光光度计（六价铬：二苯碳酰二肼分光光度法）、抄网。,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.3实验溶液的制备,以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水配制而成。母液最好每日配各1次，比较稳定的物质也可以两日配制1次，配好后，最好低温保存。配制好的母液可以稀释为进行毒性实验的溶液，以等比或等对数间距设置浓度系列，相临浓度比值不得超过2.2（母液3L，50g/L重铬酸钾）。,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.4实验用水（稀释水）,高质量的自然水,标准稀释水,天然湖水、河水或地下水，需要过滤等处理。,实验方法配制,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.4实验用水（稀释水）,溶液中钙离子和镁离子的总和是2.5mmol/L。Ca:Mg为4:1，Na:K为10:1。必要时，用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH，使其稳定在7.80.2。稀释用水需经曝气直到氧饱和为止，然后储存备用，在使用前不必再曝气。,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.5水质条件,环境毒理学鱼类毒性试验,4实验材料与实验条件,4.6实验液更换方式,每隔一定时间更换一次试验药液。适用于试验浓度在更换试验药液的时间内保持相对稳定的物质。,试验期间不需更换试验液，限于测定那些化学性质比较稳定的物质。,试验药液连续更新，可用于大多数物质，包括水中不稳定的物质。,静水式,换水式,流水式,环境毒理学鱼类毒性试验,5实验步骤,第六页,设置跨度较大的浓度范围,第一阶段预处理：为正式实验确定浓度范围。,第二阶段正式实验：确定不同溶液浓度和不同培养时间下鱼类的死亡率，找出24h、48h、72h、96h时的LC50值。,环境毒理学鱼类毒性试验,6实验报告,6.1数据处理,用直线内插法或常用统计程序计算出24h、48h、72h、96h的半致死浓度（LC50）值，并计算95的置信限。如果试验数据不适于计算LC50，可用不引起死亡的最高浓度和引起100死亡的最低死亡浓度估算LC50的近似值，即这两个浓度的几何平均值。,环境毒理学鱼类毒性试验,6实验报告,6.2毒性分级（结果评价）,表6-11990年国家环保局环境监测技术规范,表6-21994年国家环保局新化学物质危害评估准则