肿瘤免疫细胞治疗临床应用(流程).ppt

肿瘤免疫治疗的临床应用，为什么要进行肿瘤免疫治疗？细胞毒性T细胞的免疫反应肿瘤免疫的主要途径是通过释放毒性物质或促进靶细胞上的死亡受体直接裂解靶细胞，或通过分泌干扰素-在体内发挥免疫监测作用间接杀死肿瘤细胞。自然杀伤细胞(NK)先天免疫的主要效应细胞之一，是人体第一线防御机制的一部分，不受MHC限制，不需要调节和适应宿主或其免疫功能。其功能与CTL相似，能分泌大量细胞因子来调节机体的免疫反应。树突状细胞(DC)是一种特殊的抗原呈递细胞，可以帮助T细胞和B细胞特异性地参与杀死肿瘤的过程。免疫逃逸机制，当肿瘤发生时，通过免疫细胞疗法，从根本上提高机体的免疫功能，控制肿瘤的进展！免疫细胞疗法，通过收集成人免疫细胞，经过体外分离、激活、培养扩增或增加靶向性，然后回到患者体内，以杀死体内的肿瘤细胞，打破免疫耐受，激活和增强机体治疗的免疫能力。我们提供免疫细胞，静脉注射/灌注：局部注射用0.9%氯化钠稀释的100毫升细胞制剂注射液：未稀释的1毫升细胞制剂，细胞来源的选择原则，MHC津肯纳泽等人的遗传限制。在小鼠实验中发现，杀死t细胞和靶细胞必须具有相同的MHC才能具有杀死作用，因此这种现象也称为MHC限制。MHC(主要组织相容性复合体)也被称为人类白细胞抗原基因复合体。它位于动物或人类的一对染色体的特定区域，具有高度多态性。除非是同卵双胞胎，否则很难拥有MHC完全相同的个体。在不同的细胞表面表达，参与抗原呈递，限制细胞间的相互识别并诱导免疫反应。所有有核细胞都在表面表达MHC第一类分子，而MHC第二类分子主要在APC表面表达。DC细胞和CTL细胞优选为体外来源于外周血的免疫细胞。NK-KIR配体不匹配患者的自体NK细胞由于功能障碍而不能识别和杀伤肿瘤细胞，从而影响临床疗效。KIR-配体错配导致同种异体NK细胞的活化和扩增。非肿瘤组织缺乏激活NK细胞所必需的配体，或者这些激活的配体的表达在肿瘤和非肿瘤组织之间是不同的，因此同种异体反应性NK细胞可以有效地杀死肿瘤而不损伤正常组织。脐带血的低免疫原性。与患者自身细胞相比，体外分离和/或扩增的效应细胞的数量不受患者自身免疫功能的影响。(DC不能在体外扩增)CIK的主要效应细胞是CD3 CD56，其具有NK非MHC限制性特征。DC和CIK细胞可以根据患者的情况选择脐带血衍生的免疫细胞。NK细胞优选为体外来源于外周血的免疫细胞。免疫细胞治疗原则，免疫细胞治疗-筛选标准，适应症：通过常规治疗仅部分缓解的患者；治疗后，肿瘤完全消退，但有复发和转移的风险。无法接受传统治疗的病人。生物疗法的治疗效果与残余病变的大小成反比。残留病灶越小，效果越好。禁忌症：由T淋巴细胞病变引起的肿瘤(自然杀伤细胞除外)；晚期/高肿瘤负担患者；恶病质。由于严重的免疫抑制，疫苗不能诱导有效的抗肿瘤免疫。通过免疫组织化学等方法检测活检或手术获得肿瘤组织的靶向CTL适应症，MHC-类分子均为阳性患者。如果患者不能获得肿瘤组织，患者未处于最后阶段或恶病质，可考虑治疗。但仍建议进行MHC-类分子检测。停止化疗或放疗后，外周血中的白细胞恢复正常或接近正常(使用白细胞增多药物达到的正常值除外)。肿瘤抗原靶向治疗的筛选血清癌胚抗原、细胞角蛋白19、前列腺特异性抗原、甲胎蛋白、前列腺癌抗原、鳞状细胞癌抗原检测值异常：可直接选择患者作为靶抗原接受靶向治疗，无需相应的肿瘤抗原免疫组化检测结果。如果上述肿瘤标志物血清检测出免疫细胞的临床应用预处理、肿瘤患者的免疫耐受将严重影响肿瘤特异性和非特异性细胞治疗的临床效果。通过对宿主进行预处理，可以达到纠正免疫抑制微环境，提高细胞免疫活性，延长细胞在体内的存活时间，最终达到最佳临床疗效的目的。淋巴细胞的减少可诱导机体产生自我稳定的增殖，诱导和激活新生初始T细胞快速分泌干扰素并具有杀伤活性，并介导肿瘤排斥反应。自稳定增殖也能恢复不胜任的CD8 T细胞的反应能力。预处理后，可以去除体内的抑制细胞，降低内源性淋巴细胞对多种调节性细胞因子如白细胞介素-2、白细胞介素-7、白细胞介素-15、白细胞介素-21等的竞争性消耗，降低回输免疫效应细胞增殖和活化的阈值，提高杀伤活性。目前，骨髓源性异质性细胞(MDSCs)预处理方案的CD4 CD25调节性T细胞(Tregs)备受关注，非清髓性放疗和化疗研究发现，Treg细胞的化疗药物较为敏感：环磷酰胺、吉西他滨、氟达拉滨、多西他赛等。据相关报道，鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、胸腺癌和头颈部肿瘤患者外周血中富含多药耐药干细胞。吉西他滨可下调舒尼替尼(sotan)的多药耐药细胞，并可有效减少转移性肾癌患者的多药耐药细胞数量。免疫细胞临床应用方案，单细胞治疗方案CIK细胞治疗疗程：11010个/疗程，即10个细胞治疗路线：静脉输注治疗方案：2、4、4、1个/天，可在短时间内迅速改善机体免疫功能，可作为免疫细胞治疗的基本治疗选择。NK细胞治疗疗程：5109个/疗程，即10份细胞治疗路线：静脉输注治疗方案：2份、4份、4份、1/隔日作为机体自然免疫的主要效应细胞，主要识别和杀伤MHC-1分子表达阴性的肿瘤细胞，也用于控制感染。靶向CTL细胞(不推荐单次应用)治疗疗程：2108个/疗程，即5种细胞治疗途径：静脉输注治疗方案：可选择一次回输或两次回输，以主要杀死和鉴定MHC-1分子表达阳性的肿瘤细胞。靶向细胞治疗必须在患者接受常规广谱治疗后机体免疫功能相对稳定的前提下进行，因为治疗过程中细胞数量相对较少，从而使治疗效果最大化。DC细胞治疗疗程(不推荐单次应用):4-810 6个/疗程，即4-8份细胞治疗途径：瘤内注射治疗方案：1-210 6个/次，1个/周，4周。对于体表转移瘤患者，激活自体/供体T淋巴细胞发挥抗肿瘤作用。DC CIKCIK的效应细胞主要是CD3 CD8和CD3 CD56，CD3 CD56起主要作用，但只有2030%的效应细胞是CD3 CD8和CD3 CD56。为了改善CIK的功能，需要抗原呈递的CD3 CD8细胞被激活。可以选择DC联合申请。DC的申请应放在CIK之前。NK靶向CTL利用靶向CTL识别并杀死MHC分子阳性靶细胞。自然杀伤细胞的非MHC限制性特征被应用于识别和杀死具有负一类分子的细胞。对于浅表转移瘤患者，建议进行局部全身治疗，静脉输注DC局部注射其他细胞。DC局部灌注其他细胞静脉回输治疗恶性胸腹水：CIK、NK和CTL可用于疗程剂量的局部静脉输注。当白介素-2与细胞疗法联合使用时，建议同时使用白介素-2来调节患者的免疫功能，延长体内细胞的活性，提高杀伤肿瘤细胞的效率。可以选择静脉输注的途径，或者可以将白细胞介素-2直接注射到细胞悬液中并同时应用回细胞。首次建议剂量为500，000单位，以观察患者对白介素-2的耐受性。如果患者没有明显的不良反应或过敏反应，从第二次细胞治疗开始，可在细胞输注的同时给予100-200万单位的白介素-2。对于第三阶段后的患者，建议在3个月的周期内进行治疗。对于疾病晚期的患者，建议在2-4周内进行下一轮治疗。临床治疗时机的选择，术后患者的肿瘤负荷和切口愈合明显减少，这有利于免疫治疗效果的发展。清除体内残留的小病灶，防止复发和转移。快速提高身体的免疫功能，争取患者在下一步接受放疗和化疗的最佳时间。建议先对CIK细胞进行广谱治疗，然后根据患者情况与其他细胞联合使用。放疗患者在放疗后或放疗过程中可破坏肿瘤基质，有助于免疫细胞到达肿瘤部位。放射治疗可以促进肿瘤细胞中MHC-分子的表达，有利于DC细胞对抗原的识别、加工和呈递。清除循环肿瘤细胞和放射治疗过程中逃逸的肿瘤细胞，防止复发和转移。化疗患者可以选择在化疗间歇期进行细胞治疗，如化疗后5-7天的骨髓抑制期，而下一周期的化疗可以在细胞治疗后5-7天左右进行。化疗后，机体免疫耐受被打破，Tregs等负性调节因子降低，有利于免疫治疗效果的发挥。它能清除残留的小病灶，防止复发和转移。可以减少化疗的毒副作用。对于不能耐受或害怕放疗和化疗的患者，他们可以选择单独进行细胞治疗。移除肿瘤细胞并控制疾病进展。在提高身体的免疫功能后，可以根据病人的情况尝试放疗和化疗。失去手术、放疗和化疗机会的晚期患者可以选择单独接受细胞治疗。提高身体的免疫功能。提高病人的生活质量。去除肿瘤细胞、控制疾病进展、评价疗效、主要评价指标：完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定性(SD)、进展(PD)、总生存时间(OS)、无进展生存时间(PFS)、治疗失败时间(TTF)。二级评价指标：KPS、QOL肿瘤相关抗原检测：CEA、AFP、PSA、CK19及其他细胞免疫功能检测：T细胞亚群：CD3、CD4、CD8 ReG:cd4cd 25 high、cd4cd 25 high foxp 3 cik:CD3 cd56 NK:CD3-CD56细胞因子检测：如肿瘤坏死因子-、干扰素-、细胞治疗注意事项、细胞在冷链中运输并需要在使用前再加热至37。治疗前轻轻摇动细胞制剂，以避免剧烈摇动。细胞具有聚集的特性，因此可能出现微小的絮状物(聚集的细胞)，这些絮状物可以通过微型炸弹等方式分散。静脉治疗需要输血。治疗前后，需要0.9%氯化钠注射液冲洗试管。在输注过程中，以20-30滴/分钟的滴速缓慢进行静脉滴注，持续10-15分钟。在观察到患者没有不适后，可以以80-90滴/分钟的滴速进行治疗。建议每个细胞在30分钟内输注完毕。细胞袋需要在处理后低温储存24小时。如有不良反应，保留的细胞袋应及时送至实验室进行相关检测。外周血采集注意事项，通知实验室人员准备采血袋/肝素钠抗凝管。富含高蛋白和脂肪的食物不应在采血前4小时内食用，糖水可饮用或仅少量清淡饮食可用于避免血液中含有过敏原。收集过程中不需要输液。患者外周血白细胞数 410 9个/升。采集的外周血标本应保存在28以避免休克，并由实验室人员在12小时内运送。收集容量：CIK，DC:80-100毫升NK:50毫升靶向CTL:80-150毫升，典型临床病例，右肺门占位伴腰椎转移，右肺上肺不张。胸闷、心悸，伴有咳嗽、咳痰、痰中带血、腰痛、久坐无力。未进行放疗或化疗，病情逐渐加重。CIK细胞治疗后，胸闷和腰痛与前期相比逐渐减轻，左肺鳞癌(静脉输注)，病情描述：因“咳嗽、咳痰4个月以上”入院，胸部CT显示：左肺门占位；病例研究诊断：腺癌。先后进行三个疗程的全身化疗。治疗前，患者一般情况正常，无明显不适，但影像学检查无明显变化。治疗：对脐带血中的CIK细胞进行一个疗程的治疗。治疗后：治疗后2周的胸部CT检查显示情况比治疗前好，结合主管医生的意见，认为与CIK细胞疗法有关。治疗前、治疗后，原发性肝癌(静脉输注)。疾病描述：患者男性，61岁，慢性乙型肝炎20年以上，因“食欲不振和疲劳”入院。入院时，腹部电脑断层扫描和核磁共振扫描显示肝脏有多个结节状阴影，分散在整个肝脏。法新社继续上升。肝功能显示平均动脉压保持在0.5。阿德福韦酯和肝保护治疗并未显著降低甲胎蛋白，且空腹血糖也未改善。治疗：脐带血CIK细胞接受2个疗程的治疗。治疗后：各项指标明显改善，3个月后恢复正常。核磁共振复查显示肝内占位明显缩小，甲胎蛋白恢复正常。治疗前后对比，卵巢癌肝转移(静脉输注)，病情介绍：女患者，48岁。诊断(右)卵巢癌伴多发性肝内转移。CA1251132U/.给予“紫杉醇卡铂”化疗5个周期。化疗后CT复查显示肝内病灶较化疗前缩小，其余无明显变化。CA1252223.7U/ml，明显高于以前，有反复的临床症状。病人拒绝继续化疗。治疗：对脐带血中的CIK细胞进行一个疗程的治疗。治疗后，患者的腹痛和疲劳明显减轻，进食量增加。检查CA12523.4U/ml并降至正常。转移性恶性黑色素瘤(局部静脉)，病情介绍：女性患者，84岁。他在“食管胃吻合术后7个多月”住院。先后进行了三个疗程的单药化疗，效果不佳，病情逐渐加重。进食困难、多发性转移和食管气管瘘相继发生。胃造口术被用来解决饮食问题。由于患者体质差，无法耐受化疗，因此对“S1”进行口服化疗，并使用脐带血CIK细胞控制病情。入院时，患者的病情稳定且正常。关键绩效评分为70分。体检：左颈淋巴结4.2x2.5cm厘米，质地坚硬，无压痛，活动度差。左颈部肿块入院后射频消融效果差，肿块较术前增大。食管癌多发性转移(静脉局部)，治疗：给予CIK细胞一个疗程的治疗；DC细胞静脉注射一次。DC细胞被注射到颈部肿块3次。治疗后，患者左颈部肿块较治疗前缩小约1厘米。患者接受了CIK细胞共9个疗程的治疗。每次治疗后，他明显感觉到自己的生活质量有所提高，精