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如何看流式细胞术结果中的数字流式细胞仪数据存储在流式细胞仪2.0(流式细胞仪标准)和列表模式中。它易于处理和分析,但缺乏直觉。数据显示通常包括一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等。标准曲线也可以从定量分析的数据中得出。Q1:坐标轴是什么意思?1.单参数直方图每个单元单个参数的测量数据可以分类成统计分布,并以直方图的形式显示。在图中,横坐标表示荧光信号或散射光信号的相对强度值,其单位是通道,可以是线性或对数。纵坐标通常是相对细胞/粒子数!2.二维地图在二维图中,横坐标/纵坐标都表示荧光信号或散射光信号的相对强度值,可以是线性的或对数的。双参数图可以分离样本细胞群,从而便于分析感兴趣的细胞。Q2:“门”和“雷金”?门控是流式细胞分析中的一项重要技术。只有通过最佳的门控方法才能准确地获得和分析数据,从而获得临床诊断和科学研究中有价值的信息。在线收集(阈值收集)监控/获取数据离线选通:实验数据分析散射光选通/荧光选通散射光/荧光联合选通多逻辑门(组合门)多个逻辑门G3=R1和R2 (G3=R1R2)其他:G=R1或R2 G=R1而不是R2流程图中的Q3:颜色和荧光颜色?流程图中的颜色是人为指定的,以区分不同的细胞群,与荧光颜色无关!Q4:如何在流程图中划分阴阳?如何做M1负极限?事实上,这种M1划分完全是基于否定(同类型)控制!下图:左图显示的是相同类型的对照,也就是说,你在阴性组中检测到的物质的基本表达水平可以理解为背景、静止状态、基本水平、未刺激时间等。右图显示了阳性组,即接受刺激后、功能状态下、药物作用后等。Q5:是如此巧合,以至于负数正好是101?事实上,我们可以人为地将电压和放大系数调整到相应的大小,使负右边距处于某个值(通常画在101附近),这样样本在后期看起来会很好。当然,它也可以调整到102,103的幂。为什么要进行荧光补偿?流式细胞仪分析中常用2种以上的荧光标记抗体进行染色,目前使用的各种荧光染料的发射光谱有一定的重叠。术
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