常见凝血项目检测及临床意义ppt课件

.,常见凝血项目的检测及临床意义解读,.,凝血瀑布学说,.,D-Dimer,E,纤维蛋白凝块,纤维蛋白原,D,E,D,纤维蛋白单体+纤维蛋白肽,可溶性纤维蛋白聚合体,XIIIa,凝血酶,纤溶酶,凝血和纤溶,纤维蛋白降解产物,纤维蛋白原降解产物,.,凝血,我们实验室凝血检测包括PT、APTT、TT、纤维蛋白原含量、D-Dimer、AT-和FDP的测定。现主要用于手术前患者、产前孕妇凝血功能筛查，某些凝血因子异常疾病的检测以及口服抗凝药物的监测等。,.,凝血检测的方法学,目前可开展的血栓/止血成分检测主要包括三种方法：凝固法、底物显色法、免疫比浊法。Stago公司：PT、APTT、FIB、TT：凝固法。D-二聚体/FDP：免疫比浊法。AT-：发色底物速率法。,.,摆动磁珠法,.,摆动磁珠法,.,检测原理,D-二聚体/FDP检测原理：免疫比浊法。用光度计检测含有乳胶颗粒的悬浊液吸光度的变化。含有共价包被特异抗体的乳胶颗粒悬浊液与待检样本进行混合。抗原抗体发生反应，导致乳胶颗粒发生凝集，诱导反应介质浊度增加。浊度的增加反映在吸光度的增加上，用来测试样本中D-二聚体/FDP的水平。AT-检测原理:发色底物速率法。AT在肝素存在时是快速有力的凝血酶抑制物。待测血浆与肝素和过量凝血酶（试剂1）共同孵育；剩余凝血酶通过对合成产色底物（试剂2）的酶促反应来定量。由于凝血酶的数量在第一步中被血浆AT成比例地消耗，因此剩余的凝血酶在第二步反应中与血浆AT水平呈反比。此测定不受治疗剂量肝素影响。,.,PT,PT是检查涉及外源性和共同凝血途径的过筛实验，如因子VII，X，V，II和I。PT同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标。PT试剂含肝素拮抗剂。,.,PT,一、PT延长：1、先天性因子、缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症；2、获得性凝血因子缺乏：DIC、原发性纤溶亢进、肝病阻塞性黄疸和维生素K缺乏症；3、血循环中有抗凝物质：口服抗凝剂如肝素和抗凝血因子抗体、抗体。二、PT缩短：先天性因子增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。三、口服抗凝剂的检测：据报道，在口服抗凝剂过程中，维持PT在正常对照的1-2倍最为适宜。,.,APTT,APTT是在体外模拟内源性凝血的全部条件，测定血浆凝固需要的时间，用以反应内源性和共同凝血途径凝血因子（因子XII，XI，IX，VIII，X，V，II和I）是否异常。,.,APTT,一、APTT延长：见于血友病、凝血因子、和纤维蛋白原缺乏；口服抗凝剂、血循环中有凝血因子抑制物、狼疮抗凝物等。二、缩短：见于DIC早期，血栓前状态及血栓性疾病。三、监测肝素治疗：肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的1.5-3.0倍为宜。肝素通过AT-发挥抗凝作用，AT-是抑制XII、XI、IX、X等发挥作用，主要是和内源性凝血途径相关。,.,TT,TT是一评估纤维蛋白形成过程的检测项目，TT同样也是一用于补充PT和APTT的筛选实验。原理：在预定量凝血酶作用下，正常血浆会在有限的和稳定的时间内发生凝固。,.,TT,TT延长表示FIB异常质量（异常纤维蛋白原血症）数量：先天性低或无纤维蛋白原血症；获得性低纤维蛋白原血症（肝病，DIC）；存在肝素、水蛭素；存在FDP。,.,FIB,纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成，半衰期为3-5d，含量，成人：2-4g/L；新生儿：1.25-3g/L。在过量凝血酶的作用下，稀释血浆的凝固时间与血浆中的纤维蛋白原水平有直接关系。,.,FIB临床应用,手术前的筛选试验诊断质量缺陷（异常纤维蛋白原血症）数量缺陷（先天性或获得性）FIB水平升高炎性综合征，糖尿病，肥胖，血栓性相关性疾病。,.,D-Dimer,交联纤维蛋白的特异性降解产物(FnDPs)继发性纤溶特有代谢产物，反映凝血与纤溶激活的标志物。生理性：抗血栓；降解纤维蛋白/原；降解凝血因子（FV、FVIII、FX、FVII、FXI、FXIII）；病理性：纤溶亢进出血。,.,FDP,FgDPs和FnDPs（D-Dimer）统称纤维蛋白（原）降解产物（FDPs），具有抗血小板聚集和抗凝作用。FgDPs：Fg降解产物。,.,AT-检测的临床应用,AT-是一种由肝脏合成的分子量约为58000道尔顿的糖蛋白，是一种凝血酶的抑制剂。一、诊断遗传或获得性AT-缺乏症；二、疑难DIC诊断标准；三、监测肝素是否有效：肝素抗凝作用依赖AT；四、肝病（AT合成不足）：与肝功能受损程度或病情严重程度相关。,.,影响凝血指标的相关因素,1.放置时间对检测结果的影响与性别和年龄无统计学意义。2.样本量过少2ml,样本存放时间过长，采血部位为输液同侧，标本含有凝块。,.,样本量,结论：血量减少使凝固时间延长，血量增加使凝固时间缩短。,.,放置时间长短（4）,结论：PT在0-8h呈现下降趋势，可能与因子活化有关，PT在24h略有升高；APTT（4h）随时间有逐渐上升的趋势，各时间点的均值均高于基线水平，可能与因子活性逐渐降低有关；TT随时间呈逐渐上升的趋势。FIB值随时间的增加呈现逐渐下降的趋势，但差异并无统计学意义，PT、APTT与TT在多次测量的时间点上差异均由统计学意义。,.,输液同侧采血,.,凝块,.,凝固反应曲线,整个反应过程包括基线期、加速器、减速期和平台期（终点）。基线期代表凝血因子被激活，生成凝血酶的过程，也就是凝血的启动阶段，时间相对较长；加速和减速期代表凝血酶发挥作用，纤维蛋白凝块形成的过程；平台期凝固反应完成。研究表明：在正常情况下，20%-50%的凝原物质就能满足凝血要求。所以体外实验时，一部分凝血因子消耗在一定范围对凝血影响相对较小。血液有凝块，反应基线期几乎是没有的，反应开始前，凝血因子大部分已经处于活化状态，缩短的基线期时间可能远远大于因为凝血因子减少而延长的时间。,.,样本采集,另外