微生物作业指导书

食品中菌落总数、大肠菌群能力比对计划作业指导书l 测试样品说明为了保证此次能力验证计划的顺利实施，请在测试前仔细阅读以下说明。1、样品的分发与保存样品为液体样品，在发送前，已经过均匀性和稳定性试验，保证分发到各参试单位的样品是稳定、可靠的，当样品分发给各单位后，请妥善保管并尽量避免在运输过程中受污染，到达单位后请将试验样品置于4的冰箱中保存，并尽快对样品进行测试，最迟2日内必须对样品进行测试。2、检测项目参加本次比对检验的每个单位领取三份样品，每个样品中都有一个唯一的编号（请注意不要弄丢或弄错样品编号），每个样品的检测项目为：菌落总数和大肠菌群；3、检测方法本次比对检验目的在于对参加单位微生物的检测能力的验证，为保证各参加单位给出的结果具有可比性，因而本次比对检验规定分别采用以下检测方法：GB/T4789.2-2008食品卫生微生物学检验 菌落总数测定第一法 平板菌落计数法，结果报告方式为：CFU/mL; GB/T4789.3-2008 食品卫生微生物学检验 大肠菌群计数第一法 大肠菌群MPN计数 结果报告方式为：MPN/100 mL;4、试验方法样品在100mL玻璃瓶中，为液体状，开启时要小心；从开启样品到测试结束均应按照无菌操作进行；样品开启后，应先做菌落总数，首先分别取1mL原液接种于2个无菌培养皿中；然后再取原液做10-1、10-2、10-3、10-4稀释（注：稀释用水可采用无菌生理盐水，也可采用无菌水），每个稀释度分别取1mL稀释样液于2个无菌培养皿中，同时分别取1mL稀释用水于2个无菌培养皿中做空白对照，然后及时将15-20mL冷却至约45摄氏度的平板计数琼脂培养基（PCA）倾注培养皿，冷却凝固后翻转，37摄氏度培养48小时后观察结果。菌落总数接完种后，取10mL原液接种到双料LST肉汤管中，共接种3管，同时取1mL原液接种到单料LST肉汤管中，共接种3管，然后再取原液做10-1、10-2、10-3、10-4稀释（注：稀释用水可采用无菌生理盐水，也可采用无菌水），每个稀释度都接种3管单料LST肉汤，每管接种1mL，共组成18管LST肉汤，置于37摄氏度培养箱中培养48小时后观察结果，如有阳性者，转种于BGLB肉汤中做证实试验。根据证实试验判断结果，选出其中最适合的9管报出大肠菌群MPN值。检测时请注意生物安全；并且对测试后的样品和所有与测试样品接触过的实验用具进行灭菌处理。5. 报告结果的时间请于2009年7月27日下午18：00前上报测试结果（包括结果报告单和原始记录单）。如果不能按期报告结果，请尽快书面告知深圳市质量检验协会并说明理由。l 能力比对计划的组织者深圳市质量技术监督局地 址：深圳市福田区福中三路市民中心西区4楼C4040室联 系 人： 陈国进联系电话：l 能力比对计划的实施者单 位：深圳市质量检验协会地 址：深圳市福田区益民路8号通心岭39栋301室负 责 人：钟勇联 系 人：黄桂平 胡亚利联系电话： 传真： 结 果 报 告 单收到样品日期： 2009 年09 月18 日 测试样品日期： 2009 年 09月 20日样品编号菌落总数测定结果（CFU/mL）大肠菌群测定结果（MPN/100mL）A21653646A23573930A23751030单位名称：深圳市宝芝霖食品有限公司 盖章:注意：请用电脑填写，表格可在我会网站“下载专区”下载（网址：）原 始 记 录 单 单位名称： 深圳市宝芝霖食品有限公司 样品编号： 检测项目： 菌落总数和大肠菌群 1. 测试日期：2009年09 月20 日至2009年 09 月24 日2. 主要培养基的名称、产地和批号平板计数琼脂（PCA）:产地：广东省广州市；批号：月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）:产地：北京市；批号：煌绿乳糖胆盐（BGLB）:产地：北京市；批号：3. 主要设备的名称、产地和型号电热数显培养箱电热数显鼓风干燥箱不锈钢蒸汽锅超净工作台4. 测试结果：4.1菌落总数样品编号取样量（mL）稀释倍数稀释液接种量PCA 37C培养48h菌落计数 48h空白对照菌落总数（CFU/ mL)A2165101 mL34380360.1101 mL750.011001 mL200.00110001 mL000.0001100001 mL00A2357101 mL35420390.1101 mL310.011001 mL200.00110001 mL000.0001100001 mL00A2375101 mL100100.1101 mL000.011001 mL000.00110001 mL000.0001100001 mL00检验方法：见GB/T4789.2 -2008第一法 平板菌落计数法4.2大肠菌群样品编号样品接种量(mL)管数LST37C 24h可疑管数48h可疑管数BGLB复发酵37C，48h确认管数大肠菌群 (MPN/100 mL)A2165133333460.1333330.01322110.0013000.0001300A2357132222300.1333220.013000.0013000.0001300A23751300300.13000.013000