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书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法放射受体分析法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犚犪犱犻狅狉犲犮犲狆狋狅狉犪狊狊犪狔犿犲狋犺狅犱发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前言本标准按照给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人:张晓峰、陈笑梅、施伟良、朱振江、帅江兵。犛犖犜进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法放射受体分析法范围本标准规定了蜂王浆磺胺类药物残留的放射受体分析()方法。本标准适用于蜂王浆中磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺对二甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺喹啉、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺异唑、磺胺二甲基异唑、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺苯吡唑和磺胺甲噻二唑等磺胺类药物残留总量的测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法方法提要放射受体分析()方法的基础是药物功能团与微生物受体位点的结合反应,这些位点与某一类药物的共有功能团相关。应用受体的这种特异性可以实现对某一类药物的多残留分析。本方法中,样品中残留的磺胺类药物经提取、稀释后与标记的药物共同竞争结合特异的受体位点。在一定温度下反应后,离心分离,清除未结合的磺胺类药物,最后加入闪烁液,测定衰变发出的粒子放射性量值,计数(),测得的值与样品中磺胺类药物残留量成反比。试剂和材料除另有说明外,所用试剂均为分析纯,水为规定的一级水。磺胺类检测试剂盒)。组织阴性对照浓缩干粉:组织阴性对照浓缩干粉贮存于。多抗标准品浓缩干粉:浓缩干粉贮存于。组织萃取缓冲溶液(萃取缓冲溶液)干粉:贮存于。缓冲溶液干粉:用于调节值,贮存于。磺胺类受体药片:白色,以下的条件保存。磺胺类氚标记药片:粉红色,以下的条件保存。组织阴性对照溶液:使用时取组织阴性对照浓缩干粉()按试剂盒说明书配制成阴性对照溶液。配制好的溶液可在冰箱或冰浴中保存。如长时间不用,可将溶液保存于以下的冰箱中,使用时将其解冻。再解冻的溶液在温度下可保存。)给出该信息是为了方便本标准的使用者,并不表示对某一产品的认可。如果其他产品具有相同的效果,需经实验评估后使用这些等效产品。犛犖犜多抗标准溶液:使用时取浓缩干粉()按试剂盒说明书配制成多抗生素标准溶液。溶液的保存方法同。多抗标准品中含磺胺二甲嘧啶。组织萃取缓冲溶液(萃取缓冲溶液):使用时取浓缩干粉()按试剂盒说明书配制成组织萃取缓冲液。可在下保存个月。缓冲溶液:使用时取浓缩干粉()按试剂盒说明书配制成缓冲液。可在下保存个月。闪烁液。阴性对照液:取组织阴性对照溶液(),加至组织萃取缓冲溶液()中制成阴性对照液,在室温下混匀,该对照液可在室温下保持以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。阳性对照液:取多抗生素标准溶液(),加至组织阴性对照溶液中(),混匀;然后从中取混合溶液加入到萃取缓冲溶液()中制成阳性对照液(磺胺二甲嘧啶浓度);在室温下混合均匀。该对照液可在室温下保持以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。盐酸:取分析纯浓盐酸加蒸馏水定容至。氢氧化钠溶液:称取氢氧化钠溶于水中,定容至。甲醇:分析纯。试纸:范围。固相萃取柱:、。空白基样:选取确认不含有磺胺类药物的蜂王浆,作为空白基样,用于测定当次批次试剂盒的控制点使用。仪器分析仪或相当者。孵育器。高速冷冻离心机:。均质器。单道移液器:,和。涡旋混合器。电子天平:。氮吹仪。固相萃取仪。试样的制备与保存试样的制备原始样品总量不得少于,采用四分法,将样品分成两等份装入洁净容器,加封并做标识。试样的保存将样品于条件下保存。分析步骤提取称取(精确到)蜂王浆至带盖样品管中,加入的盐酸(),摇匀直至完犛犖犜全溶解;离心后,滤纸过滤,取上清液,用氢氧化钠()或盐酸()溶液将提取液值调到;柱()预先用甲醇()和蒸馏水活化后,将滤液全部倒入柱,用蒸馏水淋洗柱子,用负压去除残留的液体,并且在弱空气或氮气吹干燥柱子。加甲醇洗脱,用干净试管收集,氮气吹干,加萃取缓冲液(),置于冰浴中放置待测。测定从试剂盒中取出试剂片,用移液器取水至样品试管中,用试剂盒中所附压杆将白色受体药片()推出到试管中,涡旋混合将药片打碎。加入萃取缓冲液()和样品待测液;阴性和阳性对照管中则直接加入阴性对照液()和阳性对照液()。将粉红色磺胺氚标记药片()推至试管中,用涡旋混合器混合。将试管置于的孵育器保温。取出试管,在(离心力为犵)条件下离心,立即弃去上清液,用吸水纸将测试管边缘的水渍吸干。加水,用试管混合器混合将沉淀物打碎。分别加闪烁液()至试管中,加盖,混匀,在分析仪上以频道上进行计数。结果判定控制点的确定控制点是界定样品阴性与初筛阳性的一个界限值,对于同一批号的试剂盒,正常情况下只需测定一次控制点。控制点(磺胺)设置如下,称取空白基样()蜂王浆,加入多抗生素标准品溶液();按照进行前处理,再按进行测试。取该个加标样品平行测试的读数平均值,乘以系数作为筛选测定的控制点。还可根据所需的筛选水平重新设置相应的控制点。结果判定当样品测定值比控制点大,可判定为样品“阴性”,即样品中磺胺类抗生素残留小于筛选水平;若测定值小于或等于控制点,应判定为初筛阳性,应使用仪器方法进一步进行确证分析。确证试验如被测样品中磺胺类药物残留量的值大于限量要求时,应用仪器检测方法进行确证。检出限本标准的方法检出限:磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺对二甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺喹啉、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺异唑、磺胺二甲基异唑、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺苯吡唑和磺胺甲噻二唑等磺胺类药物残留总量。犛犖犜犉狅狉犲狑狅狉犱犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犱狉犪犳狋犲犱犻狀犪犮犮狅狉犱犪狀犮犲狑犻狋犺狋犺犲犌犅犜犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犃犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅狀犃犱犿犻狀犻狊狋狉犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犿犪犻狀犾狔犱狉犪犳狋犲犱犫狔犣犺犲犼犻犪狀犵犈狀狋狉狔犈狓犻狋犐狀狊狆犲犮狋犻狅狀犪狀犱犙狌犪狉犪狀狋犻狀犲犅狌狉犲犪狌狅犳狋犺犲犘犲狅狆犾犲狊犚犲狆狌犫犾犻犮狅犳犆犺犻狀犪犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊犿犪犻狀犾狔犱犪犳狋犲犱犫狔犣犺犪狀犵犡犻犪狅犳犲狀犵,犆犺犲狀犡犻犪狅犿犲犻,犛犺犻犠犲犻犾犻犪狀犵,犣犺狌犣犺犲狀犼犻犪狀犵,犛犺狌犪犻犑犻犪狀犵犫犻狀犵犛犖犜犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犚犪犱犻狅狉犲犮犲狆狋狅狉犪狊狊犪狔犿犲狋犺狅犱犛犮狅狆犲犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狊狆犲犮犻犳犻犲狊狋犺犲犿犲狋犺狅犱犳狅狉狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊犫狔犆犺犪狉犿犻狀犚狅狔犪犾犼犲犾犾狔犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狆狆犾犻犮犪犫犾犲狋狅狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳犪犿犲狉犪狕犻狀犲,犛狌犾狆犺犪犱犻犿犻犱犻狀犲,犛狌犾犳犪犿狅狀狅犿犲狋犺狅狓犻狀犲,狊狌犾犳犪犿犲狋狅狓狔犱犻犪狕犻狀犲,狊狌犾犳犪犱犻犿狅狓犻狀狌犿,犛狌犾犳犪狇狌犻狀狅狓犪犾犻狀犲,犛狌犾犳犪狋犺犻犪狕犾狅犲,犛狌犾犳犪狆狔狉犻犱犻狀犲,犛狌犾犳犪犳狌狉犪狕狅犾犲,犛狌犾犳犻狊狅狓犪狕狅犾犲,犛狌犾犳犪犱犻犪狕犻狀犲,狊狌犾犳犪犿犲狋犺狅狓狔狆狔狉犻犱犪狕犻狀犲,犛狌犾犳犪犮犺犾狅狉狅狆狔狉犻犱犪狕犻狀犲,犛狌犾犳犪狆犺犲狀犪狕狅犾狌犿犪狀犱犛狌犾犳犪犿犲狋犺犻狕狅犾犲犫狔犆犺犪狉犿犻狀犚狅狔犪犾犼犲犾犾狔犖狅狉犿犪狋犻狏犲狉犲犳犲狉犲狀犮犲狊犜犺犲犳狅犾犾狅狑犻狀犵犱狅犮狌犿犲狀狋狊犻狊狀犲犮犲狊狊犪狉狔犳狅狉狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犉狅狉犱犪狋犲犱狉犲犳犲狉犲狀犮犲狊,狅狀犾狔犱犪狋犲犱犲犱犻狋犻狅狀狊狊犺犪犾犾犪狆狆犾狔狋狅狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犉狅狉狌狀犱犪狋犲犱狉犲犳犲狉犲狀犮犲狊,狋犺犲犾犪狋犲狊狋犲犱犻狋犻狅狀狅犳狋犺犲狀狅狉犿犪狋犻狏犲犱狅犮狌犿犲狀狋狉犲犳犲狉狉犲犱狋狅犪狆狆犾犻犲狊犌犅犜犠犪狋犲狉犳狅狉犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾犪犫狅狉犪狋狅狉狔狌狊犲犛狆犲犮犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱狋犲狊狋犿犲狋犺狅犱狊犘狉犻狀犮犻狆犾犲犚犪犱犻狅狉犲犮犲狆狋狅狉犪狊狊犪狔(犆犺犪狉犿)犫犪狊犲狊狅狀犫犪犮狋犲狉犻犪狊狊狆犲犮犻犳犻犮狉犲犮犲狆狋狅狉狊犻狋犲狋犺犪狋犫犻狀犱犳狌狀犮狋犻狅狀犵狉狅狌狆狅犳犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狊犐狋犺犪狊犪犮狅狉狉犲犾犪狋犻狅狀犫犲狋狑犲犲狀狋犺犻狊狉犲犮犲狆狋狅狉狊犻狋犲狊犪狀犱犳狌狀犮狋犻狅狀犵狉狅狌狆狅犳狅狀犲犽犻狀犱犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狊犛狅狋犺犲狊狆犲犮犻犳犻犮犻狋狔狅犳狋犺犲狉犲犮犲狆狋狅狉犮犪狀狉犲犪犾犻狕犲狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狉犲狊犻犱狌犲狊犜犺犲狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狊狉犲狊犻犱狌犲狊狑犲狉犲犲狓狋狉犪犮狋犲犱犳狉狅犿狋犺犲狊犪犿狆犾犲,犪狀犱狋犺犲狔狑犲狉犲犱犻犾狌狋犲犱犜犺犲狔狑犲狉犲犻狀犮狅犿狆犲狋犻狋犻狅狀狑犻狋犺犪狀犲狓犲犿狆狋犪犿狅狌狀狋狅犳犎犾犪犫犲犾犲犱狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊犳狅狉狋犺犲狊狆犲犮犻犳犻犮犻狋狔狅犳狋犺犲狉犲犮犲狆狋狅狉狊犻狋犲狊犃犳狋犲狉狉犲犪犮狋犻狅狀犻狀狋犺犲狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲犻狋狑犪狊犮犲狀狋狉犻犳狌犵犲犱,犪狀犱狋犺犲狌狀犫犻狀犱狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狊狋犺犪狋狑犲狉犲犱犻狊犮犪狉犱犲犱犜犺犲狀犻狋狑犪狊犪犱犱犲犱狑犻狋犺狋犺犲犛犮犻狀狋犻犾犾犪狋犻狅狀犳犾狌犻犱,犱犲狋犲狉犿犻狀犲犲犿犻狊狊犻狅狀狅犳狆犪狉狋犻犮犾犲狉犪犱犻狅狋犺犪狋狑犪狊犳狉狅犿犎犱犻狊犻狀狋犲犵狉犪狋犻狅狀,犪狀犱犮狅狌狀狋狆犲狉犿犻狀狌狋犲犜犺犲狏犪犾狌犲狊狅犳犮狆犿狑犲狉犲犻狀狏犲狉狊犲狉犪狋犻狅狑犻狋犺狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狊狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狊犪犿狆犾犲狊犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱,犪犾犾狉犲犵犲狀狋犪狉犲犪狀犪犾狔狋犻犮犪犾犾狔狆狌狉犲,“狑犪狋犲狉”犻狊狉犲犱犻狊狋犻犾犾犲犱狑犪狋犲狉犛犖犜犛狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狋犲狊狋犫狅狓):犜犻狊狊狌犲狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲狀犲犵犪狋犻狏犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲:犛狋狅狉犲犱狉狔犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犪狋犕犛犝犿狌犾狋犻犪狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狊狋犪狀犱犪狉犱:犛狋狅狉犲犱狉狔犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犪狋犕犛犝犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犫狌犳犳犲狉:犛狋狅狉犲犱狉狔犫狌犳犳犲狉犪狋犕犫狌犳犳犲狉:犛狋狅狉犲犱狉狔犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犪狋犅犻狀犱犻狀犵狉犲犪犵犲狀狋狋犪犫犾犲狋:犠犺犻狋犲犮狅犾狅狉,狊狋狅狉犲犫犾犻狊狋犲狉狆犪犮犽狊犪狋狅狉犫犲犾狅狑犃狀狋犻犿犻犮狉狅犫犻犪犾犱狉狌犵狋犪犫犾犲狋:犚犲犱犮狅犾狅狉,狊狋狅狉犲犫犾犻狊狋犲狉狆犪犮犽狊犪狋狅狉犫犲犾狅狑犜犻狊狊狌犲狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲狀犲犵犪狋犻狏犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲:犛狋狅狉犲犱狉狔犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犪狋犚犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犪狊犱犻狉犲犮狋犲犱狅狀狋犺犲犾犪犫犲犾犛犺犪犽犲狑犲犾犾犜犺犲狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀犿犪狔犫犲犺犲犾犱狅狀犻犮犲狅狉犪狋犳狅狉狌狆狋狅犺犉狉狅狕犲狀狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀犿犪狔犫犲狊狋狅狉犲犱犳狅狉狌狆狋狅犿狅狀狋犺狊犪狋狅狉犫犲犾狅狑犎狅犾犱狋犺犪狑犲犱狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狅狀犻犮犲犪狋犳狅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