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文档简介
主题2.2动物细胞工程,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体生产,核转移,动物细胞工程技术,动物细胞工程基础,2.2.1动物细胞培养和核转移技术,动物细胞培养(1)概念是指从动物体内取出相关组织,将它们分散到单个细胞中,然后将它们置于合适的培养基中,使这些细胞生长和增殖。(2)原理、细胞分裂和增殖,(3)过程,(3)幼动物、切割组织、原代细胞培养,(4)细胞悬液,(5)细胞粘附:当培养粘附细胞时,细胞必须能够粘附到基质上以便生长和繁殖。原代培养:从体内取出后立即培养的细胞是原代细胞。通常,培养的第一代细胞和10代以内的细胞称为原代细胞培养。继代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,制备成细胞悬液,并分成两个或多个培养瓶进行进一步培养,称为继代培养。诱导过程、组织、器官、细胞悬液、酶、附着在瓶壁上的细胞、单个细胞、添加液、动物胚胎或幼小动物、胰蛋白酶、培养物、接触抑制、原代培养(分装前)、1-10代细胞、培养物、添加液、40-50代细胞(细胞系)、no、无限传代(细胞系)、传代培养、胰蛋白酶、酶、相关概念、细胞系:原代细胞一般转移至约10代细胞生长停滞,大多数细胞因衰老而死亡,少数细胞存活至40-50代,如此由于遗传物质的改变,只有一些细胞在培养条件下可以无限期传代。这个传代的细胞是一个细胞系。细胞系与细胞系的区别:细胞系的遗传物质发生变化,具有癌细胞的特性,失去接触抑制,易于传代。为什么选择动物胚胎或年轻个体的器官或组织作为动物细胞培养材料?为什么组织细胞应该在培养前分散成单个细胞?因为这些组织或器官,分裂能力强,容易培养。组织的聚集使细胞聚集在一起,限制了细胞的生长和增殖,细胞不能与培养液充分接触,不利于培养。胰蛋白酶的功能是什么?那么细胞间物质的组成是什么?催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。)。细胞膜的主要成分是什么?胰蛋白酶能消化细胞吗?既然胰蛋白酶可以消化细胞,那么当我们将动物组织分散成单个细胞时,应该注意哪些问题?胃蛋白酶能代替胰蛋白酶吗?为什么?注意控制时间,没办法,因为两者的最佳酸碱度不同,而正常组织细胞的生存环境接近胰蛋白酶的最佳酸碱度,1.无菌无毒环境,为保证细胞的顺利生长和增殖,添加一定量的抗生素,定期更换培养液,添加:糖(葡萄糖)、氨基酸、生长促进因子、无机盐、微量元素、动物血清等。(4)动物细胞培养条件。营养,3。培养室内温度和酸碱度控制在36.50.5,7.2 7.4。氧气和二氧化碳(95%空气和5%二氧化碳)在培养箱中提供。4.气体环境:(5)动物细胞培养技术的应用,(3)细胞的生理学、药理学和病理学研究,(1)烧伤患者皮肤移植用健康细胞的培养。(2)基因工程受体细胞,植物组织培养与动物细胞培养的比较,全能性,增殖,蔗糖,动物血清,细胞系,细胞系,细胞,某些蛋白质,前景,数据1:培养的动物细胞可用于检测有毒物质。在培养液中加入许多致畸和致癌物质后,培养的细胞将经历染色体结构和数量的变化。根据突变细胞在所有培养细胞中的百分比,可以判断某种物质的毒性。目前,动物细胞培养已成为检测有毒物质的一种快速、灵敏的有效方法。第一次手术:从病人关节软骨的无应力部分取出一块葡萄干大小的健康软骨。2.分离软骨细胞并在体外培养3周,使细胞数量增加约10-20倍。3.第二次手术:清洁受损软骨,从下部骨部分取出一块与伤口大小相同的骨膜,将其缝合在伤口上,然后将软骨细胞注射到骨膜下。资料3:结果:例患者经过一年的康复治疗后恢复正常生活。动物体细胞核移植技术与动物克隆(1)动物细胞核移植的概念动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核移植到已去除细胞核的卵母细胞中。它重组并发育成新的胚胎,最终发育成单独的动物。动物克隆:通过核移植获得的动物。动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核移植到卵母细胞中,并从中取出细胞核。它重组并发育成新的胚胎,最终发育成单独的动物。分类:细胞分化程度低,全能性易恢复,细胞分化程度高,全能性难恢复。克隆动物:是通过核转移获得的动物。克隆是指通过无性繁殖产生的遗传上同质的生物群,即具有相同遗传组成的生物体的一组细胞或个体。克隆在希腊语中的意思是“小树的枝叶”,用于指无性繁殖。一、去核卵细胞、供体细胞、重组细胞、代孕牛C、无性繁殖,(3)、体细胞核移植过程,(4)、体细胞核移植技术的应用前景,(1)、加速畜牧业中家畜遗传改良过程,(2)、濒危物种保护,(3)、医用蛋白质和组织器官移植供体,(5)、体细胞核移植技术存在的问题,(1)、克隆动物基因组重编程的机制尚不清楚。2.克隆技术效率低,畸形率高,死亡率高,而且容易过早老化。3.生产克隆动物很昂贵。在动物细胞培养过程中,遗传物质发生变化的细胞是(a)获得永生的细胞(B.10代以内的细胞(c)原代细胞(d)传代细胞。1.动物细胞工程技术的基础是:动物细胞融合,单克隆抗体,胚胎移植,动物细胞培养,课堂反馈练习。3.动物细胞培养的描述是正确的:(1)动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞分泌蛋白B,4、动物细胞培养前应使用胰蛋白酶分散细胞C,细胞的癌变发生在从原代培养向继代培养D的过渡过程中,继代培养细胞的遗传物质在培养至50代后没有发生变化,以及(b)、(4)一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件()、(1)无毒环境;(2)无菌环境;(3)培养基需要添加血清;(4)温度与动物体温相似;(5)需要O2;CO2 (6) CO2不需要调节培养液的酸碱度;A, (2) (3) (4) (5) (b),(1)(2)(3)(4)(6)(d),(1) (2) (3) (4) (6) (6) (d),(5) (4) (6) (6) (6) (a),(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(4)(4)(4)(4)(6)(4)(4)(4)(4)(4)(4)(5)(6)(3)(6)(4)(4)(4)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(4)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(6)(请回答它通常取自_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)首先处理容器A中的动物器官或组织,然后用酶处理以分散细胞。这样做的目的是。动物胚胎或幼动物,切成块,用胰蛋白酶处理,使细胞与培养液充分接触,便于培养,(3)培养首先在b瓶中进行,瓶中的培养基由_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _组成。在这个瓶子里培养一段时间后,许多细胞会因老化而死亡。这是第一代文化。这个时候的文化叫做_ _。(4)为了将瓶B中的细胞分装到瓶C中,应对瓶B中的细胞进行处理,然后进行配置和重新包装。,动物血清,10,原代培养,胰蛋白酶,细胞悬液,动物细胞融合和单克隆抗体,首先,动物细胞融合,受精,动物细胞融合,细胞A,细胞B,杂交细胞,灭活病毒,物理方法和化学方法,用灭活病毒诱导动物细胞融合的方法,细胞融合和融合诱导细胞融合物质、诱导剂:病毒、聚乙二醇诱导细胞融合病毒必须灭活。思考和讨论:为什么用于细胞融合的病毒需要被灭活?什么是抗体?抗体是被抗原刺激后由身体产生的免疫球蛋白,能与抗原特异性结合。b淋巴细胞产生抗体。单克隆抗体是由单个B淋巴细胞无性繁殖(克隆)形成的一组具有相同基因型的细胞。这组细胞产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。特点:特异性强,灵敏度高,单克隆抗体的制备过程,细胞融合,筛选,有足够数量的细胞群能够产生特异性抗体,单克隆抗体,如何大量生产单克隆抗体?利用淋巴细胞产生抗体的功能,利用肿瘤细胞无限增殖的特性,利用细胞融合技术融合两种细胞,获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞,利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞,思路:1。在这个过程中使用了什么原则?免疫原理、细胞融合原理和动物细胞培养原理,2、为什么选择小鼠骨髓瘤细胞和B细胞融合?这样融合的杂交瘤细胞继承了亲代细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且具有无限增殖的能力,从而可以获得大量的单克隆抗体。与常规抗体相比,单克隆抗体具有产量高、特异性强、灵敏度高等优点。主要应用有:1 .临床诊断;2.作为载体,携带抗癌药物形成“生物导弹”来治疗肿瘤。数据:目前,世界各国已经开发出数百种单克隆抗体。使用单克隆抗体作为许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病的诊断手段是必然趋势。此外,使用用于体内诊断的单克隆抗体来识别和定位体内“病变”也引起了关注。目前,它主要用于肿瘤追踪和心肌梗死的诊断。植物细胞杂交和动物细胞融合的比较下图显示了一个同学根据杂交瘤技术设计的生产破伤风杆菌的实验计划。单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,亲代细胞,分泌型抗体,无限增殖,原代,传代,50,1。动物细胞工程技术的基础是:()a .动物细胞融合;b .胚胎移植;c .动物细胞培养;d .核移植;c .2 .在动物细胞融合和植物细胞杂交的比较中,这是正确的。结果是相同的。杂交细胞的形成过程基本上是相同的。在骨髓瘤细胞和B淋巴细胞被诱导融合后,应该用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞。在该培养基上不能存活和增殖的细胞是()淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自体移植细胞小鼠骨髓瘤细胞自体移植细胞杂交瘤细胞A。B。C。D。C。(北京卷1,2006)下列实验不能解释细胞全能性,它们是:a .胡萝卜韧皮部细胞产生植物;紫色蜡质王米种子产生植物;用抗虫基因转化的棉花细胞产生植物;番茄与马铃薯体细胞杂交产生植物;嘿。(国家卷一,2006,标题三)动物细胞培养的以下描述,正确的是,培养的人效应子T细胞可以产生单克隆抗体,培养的人B细胞可以无限增殖,成熟的人红细胞可以形成细胞系,肝组织可以用胰蛋白酶处理以获得单个肝细胞,动物细胞工程技术的基础是,动物细胞融合,单克隆抗体,胚胎移植,动物细胞培养,右图显示一些淋巴细胞带有细胞外颗粒物质作为抗体。根据图,回答:(1)这是一个细胞,它来源于分化。(2)从抗体合成开始到细胞分泌,细胞结构的顺序是(标记的)。抗
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