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文档简介

浙科版选修三第一章第二节基因工程的原理和技术,形成重组DNA分子,获得目的基因,形成重组DNA分子,将重组DNA分子导入受体细胞,筛选含有目的基因的受体细胞,目的基因的表达,活动一:用白色纸环代表质粒,红色纸条代表含有目的基因的DNA分子,剪刀代表限制酶,胶带代表DNA连接酶,现在用酶切割目的基因和质粒,再用DNA连接酶,看看可以得到哪些连接产物?,目的基因与质粒正向连接,目的基因与质粒反向连接,质粒自身环化,目的基因自身环化,质粒-质粒连接,目的基因-目的基因连接,活动二:假如选用酶和酶这两种不同的酶,能不能解决任意连接这个问题?,活动三:那么可以选用两种什么样的限制酶来避免任意连接呢?,总结:,我们最好选用两种产生不同黏性末端的限制酶进行切割,可以防止任意连接,使得目的基因定向插入到质粒当中。,图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点,ampR为青霉素抗性基因,tctR为四环素抗性基因,P启动子,T为终止子,ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。据图回答:将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切,酶切产物用DNA连接酶进行连接后,其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有哪三种?为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用什么酶?,目的基因-载体连接物、载体-载体连接物、目的基因-目的基因连接物,EcoR和BamH,标记基因:鉴别受体细胞中是否含有目的基因启动子:RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动目的

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