第51讲生物技术在其他方面的应用.ppt

,生物技术实践,第11章,第51讲生物技术在其他方面的应用,栏目导航,一、血红蛋白的提取和分离1方法及原理,相对分子质量的大小,带电性质,2实验操作程序样品处理：红细胞的洗涤血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液粗分离：用_法除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化：用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化纯度鉴定：用_法来测定蛋白质的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定,透析,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,水蒸气蒸馏,水蒸气蒸馏,NaCl,无水Na2SO4,2提取橘皮精油的实验(1)方法：一般采用_法。(2)实验流程：石灰水浸泡漂洗_过滤静置再次_橘皮油,压榨,压榨,过滤,水,石油醚,萃取,萃取剂,干燥,过滤,纸层析,1判断正误，正确的画“”，错误的画“”。(1)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后可得到稳定遗传的植株。()(2)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物组织培养。()(3)制备好的MS培养基用于植物组织培养时，需要加入植物激素。()(4)被子植物的花粉发育要经过小孢子四分体时期、双核期和单核期等阶段。()(5)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，根据提取的芳香油的用途选择提取的方法。(),2下列关于生物技术实践的叙述中，正确的是()A用于果酒、果醋、腐乳制作的主要菌种都是有氧呼吸型真核生物B海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠呈蝌蚪状C用菜花提取DNA时加入一定量的洗涤剂和食盐，充分研磨过滤后弃去滤液D用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混合解析用于果酒、果醋、腐乳制作的主要菌种分别是酵母菌、醋酸杆菌和毛霉，其中醋酸杆菌为原核生物，酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型；海藻酸钠溶液浓度过高会导致制作的凝胶珠呈蝌蚪状；用菜花提取DNA时加入一定量的洗涤剂和食盐，充分研磨过滤后应保留滤液。,D,A,1常用的蛋白质分离方法(1)凝胶色谱法,一蛋白质的提取和分离,(2)电泳法原理在一定pH下，蛋白质分子的某些基团解离后带上正电或负电。在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。由于待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。,例1如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请据图回答下列问题：,(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，它在红细胞中的作用体现了蛋白质具有_功能。(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是_；乙装置中，C溶液的作用是_。(3)甲装置用于_，目的是_。用乙装置分离蛋白质的方法叫_，是根据_分离蛋白质的有效方法。(4)用乙装置分离血红蛋白时，待_时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。,运输,磷酸缓冲液,洗脱血红蛋白,透析(粗分离),去除样品中分子量较小的杂质,凝胶色谱法,相对分子质量的大小,红色的蛋白质接近色谱柱底端,解析(1)红细胞中含有血红蛋白，血红蛋白可以运输氧，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能。(2)由血红蛋白提取和分离的实验原理可知，甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是磷酸缓冲液，抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定；乙装置中，C溶液的作用是洗脱血红蛋白。(3)甲装置用于透析，目的是去除样品中分子量较小的杂质。用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，分子量大的流动速度快。(4)用乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。,1植物有效成分的提取的三种方法比较,二结合实例考查植物芳香油的提取,2增加植物有效成分提取量的关键措施(1)蒸馏法提取植物芳香油提取量主要取决于植物材料中芳香油的含量。由于植物芳香油易挥发，因此用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油时应选择新鲜的植物材料(干燥后植物芳香油挥发)。(2)压榨法提取植物芳香油：植物材料中的果胶、果蜡会影响压榨和出油率，压榨前通常采用石灰水浸泡的方法除去果胶、果蜡，以提高出油率。,(3)影响胡萝卜素萃取的因素及解决措施,例2回答下列有关从生物材料中提取某些特定成分的问题：(1)薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似，因此适合选用_法来提取。用此方法收集到的液体_(填“是”或“不是”)纯的薄荷油，原因是_。在此过程中，影响薄荷油提取量的主要因素有_和_。(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是_法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、_、_。,水蒸气蒸馏,不是,薄荷油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物,蒸馏时间,蒸馏温度,萃取,过滤,浓缩,(3)如图是某同学对萃取的胡萝卜素样品所做的鉴定实验的结果。图中实验组是_，实验得出的结论是_。,B、C,萃取样品中不含胡萝卜素,解析(1)薄荷油和玫瑰精油化学性质相似，都具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定的性质，因此可用水蒸气蒸馏法进行提取。由于薄荷油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物，不是纯的薄荷油。蒸馏温度太高、时间太短，产品品质就比较差。(2)胡萝卜素易溶于有机溶剂，可用有机溶剂进行萃取，主要步骤是：粉碎干燥萃取过滤浓缩。(3)胡萝卜素萃取后溶于有机溶剂，图中实验组是BC，对照组是AD。,胡萝卜素粗品鉴定过程中的5个易错点(1)层析时没有选择干净的滤纸，导致实验现象不明显。为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作。(2)点样时点样圆点太大(直径大于2mm)，会导致最终在滤纸上形成一条线，无法辨认被提取的色素。点样圆点的直径应为2mm。(3)将点好样的滤纸卷成圆筒状，卷纸时不能让滤纸两边相互接触，以避免由于毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果。,(4)层析液没及样品原点，色素会溶解于层析液中，造成实验失败。层析液不可没及样品原点，以免色素溶解于层析液中，使鉴定失败。(5)没有设置标准样品作对照。层析液中是否提取到胡萝卜素，可通过与标准样品中的胡萝卜素作对比予以确认。,例1(经典高考题)胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：,(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用_或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是_。(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供_和_。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和_以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用_方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是_。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为_。,答题送检来自阅卷名师报告,解析(1)微生物分离和培养中常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。微生物培养需要无菌操作，其中对接种环需进行灼烧灭菌处理。(2)蔗糖和硝酸盐可分别为微生物的生长提供碳源和氮源。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程中若温度过高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解；萃取过程应避免明火加热，宜采用水浴方式加热，以防止温度过高；萃取液在浓缩之前要进行过滤，以除去萃取液中的不溶物。(4)利用纸层析法鉴定所提取的胡萝卜素时，需用胡萝卜素标准样品作对照，对比分析标准样品和萃取样品出现的层析带。规范答题(除注明外，每空1分)(1)稀释涂布平板法灭菌(或防止杂菌污染)(2)碳源氮源(3)时间水浴滤去不溶物(2分)(4)(实验)对照,1在植物有效成分的提取过程中，常用萃取法、蒸馏法和压榨法，下列关于这三种方法的叙述错误的是()A蒸馏法和萃取法都需要水浴加热B压榨法适用于易焦糊原料的提取，如柑橘、柠檬等C萃取法适用范围较广，一般原料颗粒小，萃取效果好D蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油解析蒸馏法适用于提取挥发性