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文档简介
提要一、绪论1.人体组织胚胎学的内容与意义2.组织胚胎学的研究方法3.组织胚胎学的学习技巧二、上皮组织1.被覆上皮的结构特征和分类2.腺上皮和腺3.上皮的特殊结构,组织学研究机体细微结构及其相关功能的科学;是在组织、细胞、亚细胞和分子水平;使用显微镜,胚胎学研究从受精卵发育为新个体的过程及其机理的科学。生殖细胞、胚胎发育与母体、先天性畸形,内容:细胞+细胞间物质组织,1、上皮组织2、结缔组织3、肌组织4、神经组织,器官,人体的基本组织,器官组织,基本组织,上皮组织,结缔组织,肌组织,神经组织,胃stomach,肝liver,器官组织,肝硬变livercirrhosis,Livertissue,人体微细结构的研究方法*光镜技术lightmicroscopyLM:GenerallyLM:石蜡切片HE染色法Specialmicroscope:激光共聚焦显微镜技术荧光显微镜术相差显微镜术*电子显微镜技术electronmicroscopyEM:透射电镜术扫描电镜术冷冻蚀刻复型术和冷冻割断术*组织化学和细胞化学技术Histo-andcytochemistry*免疫细胞化学技术Immunocytochemistry*原位杂交技术Insituhybridization*组织培养术Tissueculture,石蜡切片制作和HE染色取材obtainingthesample;新鲜固定fixation;福尔马林(10%甲醛)脱水和透明dehydrationclearing包埋embeddingparaffin石蜡,火棉胶切片section;5-8m染色HEstaining封片mounting,HE染色,Eosin伊红:为酸性染料,使细胞质和细胞外基质中的碱性成分染成淡红色。,Hematoxylin苏木精为碱性染料,使细胞核和细胞质中的核糖体等酸性物质染成蓝紫色。,特殊染色Specialstaining(1)镀银染色Silverstaining,Stretchedpreparation,neuron,骨磨片bonegroundsectionsilverstain,血涂片bloodsmearWrightstaining,特殊染色Specialstaining(2),电镜技术electronmicroscopy电子显微镜electronmicroscopeEM超微结构ultrastructure放大效果:tensofthousandstohundredsofthousands分辨率:0.2nmTransmissionEM透射电镜-平面ScanningEM扫描电镜-三维立体的,TransmissionEM,取材,浸洗,脱水,树脂浸透,capsule,embedding,Ultra-thinsection,Heavymetalstain,ultramicrotome,修块,电镜制作的组织准备,Electron-denseelectron-lucent,透射电镜图像电子密度高、低,电子密度高色深,电子密度低色浅,光镜LM透射电镜TEM标本:新鲜新鲜、小块1mm3固定:甲醛戊二醛glutaraldehyde包埋:石蜡环氧树脂Epon812切片:5-8微米slide50-80纳米染色:HE;silverstainuranium;lead彩色的multicolor黑白的blackandwhite观察:嗜酸性、嗜碱性电子密度深、浅放大401500倍几万倍到几十万倍,扫描电镜图像(SEM),cilia,Gobletcell,组织组织化学染色技术化学and细学原理:应用化学、物理、生物化学的方法显示组织或细胞内的化学成分或组成(蛋白质、核酸、脂类)显示糖类:PAS反应,呈紫红色反应产物,ACP,冷冻切片,Sodiumphosphate,Productionphosphateionscolorless,捕获剂,底物,leadnitrate,磷酸铅,电镜,Ammoniumsulfidesolution,Leadsulfide,免疫组织化学和免疫细胞化学,利用组织或细胞内的抗原与标记的已知抗体结合,ImageofimmunocytochemistryPAPmethodratcerebrumAbforGFAP,ImmunoflurescenceStaining,ImmunocytochemistryandPhotosunderFluorescenceMicroscope(荧光显微镜),I,OMpromotesaxonregenerationinmatureopticnerve,实验结果,1.间脑腹侧TPp区DA神经元轴突主要投射到下皮层区(subpilum),Vmat2:GFP转基因斑马鱼连续发育5d共聚焦轴突投射(单侧),原位分子杂交ISHH#Withlabeledsingle-strandfragmentsofRNAorDNAasprobe(探针)thatcontainthecomplementarysequencetohybridizedtocellularDNAorRNAontheslide,underappropriateconditionstoformstablehybrid.ToshowlabeledreportermoleculetolocalizecellularDNAorRNATotesttheexpressionofspecialgenesinvolvedrelatingproteins#Labeledreportermolecule:Radioactive3H32PmicroautoradiographyNonradioactivebiotinordigoxigeninimmunohistochemistry,原位分子杂交图片,WholemountinsituhybridizationsignalsforthePAC1PACAPreceptorinzebrafishembryos48hoursafterfertilization.,共焦激光扫描显微镜,超高分辨率荧光显微镜发展者,著名结构生物学家中国科学院/美国科学院院士、清华大学教授施一公先生,最近,采用冷冻电镜在RAN剪接体(splicesome)研究方面做出了开创性的杰出贡献,组织胚胎学学习技巧,空间思维:平面与立体结合动态观念:单一图像与生活状态结合形态与功能统一:归纳总结:列表比较与疾病、临床结合基本结构和框架性构筑,上皮组织EpithelialTissue,(细胞间质)Cells+intercellularsubstancesTissues(组织)OrgansSystems,人体的组织分为,4大基本组织Epithelialtissue(ET)/Epithelium(上皮)Connectivetissue(CT,结缔组织)Musculartissue(MT,肌组织)Nervoustissue(NT,神经组织),上皮组织的定义和特征由大量形态规则、排列紧密的细胞组成。分为游离面和基底面。,2、上皮的分类:按功能分,被覆上皮腺上皮,保护分泌,3、特化的上皮感觉上皮生殖上皮肌上皮,1、特征:大量细胞和少量细胞间质构成多数无血管。,功能:保护、分泌、吸收、排泄,一、被覆上皮的特征,分布:被覆于体表或内衬于体内各管、腔及囊的内表面,结构特点:细胞多间质少,细胞排列紧密,具有极性,细胞的不同表面在结构和功能上具有差别,游离面和基底面及侧面,无血管,相邻细胞间形成特化的细胞连接,密集的细胞组成细胞间质很少,细胞两端结构和功能的差异,有极性,无血管,深面结缔组织内血管的营养物质通过基膜渗透,基膜:位于上皮基底面与深面结缔组织之间,由糖蛋白构成的薄膜状结构;电镜下分两层:基板和网板,功能:支持和连接、半透膜,有基膜,根据:*上皮细胞的层数:单层和复层*表层细胞的形态:扁平、立方、柱状依照细胞的高度,被覆上皮的命名原则,单层扁平上皮,单层立方上皮,单层柱状上皮,单层,复层扁平上皮,复层,被覆上皮分类,扁平,立方,柱状,复层立方上皮,复层柱状上皮,假复层柱状纤毛上皮变移上皮,单层扁平上皮,单层立方上皮,单层柱状上皮,单层扁平上皮,内皮Endothelium,间皮Mesothelium,衬贴在心血管和淋巴管腔面的单层扁平上皮,衬贴在胸膜、腹膜、心包膜表面的单层扁平上皮,单层立方上皮,单层柱状上皮,假复层柱状纤毛上皮,组成柱状、梭形、锥体形细胞,每一个细胞都与基膜接触,仅柱状细胞达到腔面,柱状细胞游离面有纤毛,杯状细胞腺细胞,假复层柱状纤毛上皮,复层扁平上皮,组成一层立方形或矮柱状细胞数层多边形细胞几层梭形细胞几层扁平细胞,保护、耐摩檫,非角化,角化,与深面组织的连接凹凸不平,复层扁平上皮,角化的复层扁平上皮,变移上皮,细胞层数和形状可随器官的不同功能状态而发生改变,膀胱空虚时,膀胱充盈时,变移上皮,盖细胞,变移上皮,腺上皮,由腺细胞组成的以分泌功能为主的上皮。外分泌腺:有导管内分泌腺:无导管,粘液性细胞:少部分胞质嗜碱性染色,多数胞质不着色。,浆液性细胞:嗜酸性的分泌颗粒(红色),混合型腺:浆液性腺和粘液性腺共同存在;,可见浆液性半月,上皮的特殊结构,游离面,微绒毛纤毛,侧面紧密连接中间连接桥粒缝隙连接,基底面基膜质膜内褶,微绒毛microvillus,成份:细胞膜细胞质纵形的微丝,功能:扩大细胞表面积参与吸收,是上皮游离面的细胞膜及细胞质向游离面伸出的指状突起。,微绒毛(EM),肾-刷状缘(LM),小肠EM微绒毛,小肠LM纹状缘,纤毛cilium,成份:细胞膜细胞质纵形的微管9+2,功能:快速定向节律性摆动,参与排出呼吸道的灰尘和细菌,细胞膜及细胞质向游离面伸出的较长的指状突起,动纤毛和静纤毛,纤毛,光镜下可见,超微结构:中央有两条单独的微管,周围有9组二联微管(即9+2结构),伸出的粗而长的突起,具有节律性定向摆动的能力。,纤毛,杯状细胞,侧面的特化结构,紧密连接,中间连接,桥粒,缝隙连接,上皮细胞的侧面结构,1、紧密连接(Tightjunction):上皮细胞靠近游离面处,相邻细胞侧面细胞膜外层,呈嵴状部分融合,围绕细胞顶部四周。功能:阻止大分子物质从细胞间隙进入深部组织,tightjunction紧密连接orzonulaoccludens闭锁小带,Tightjunction,Byfreeze-fracture,anenfaceviewofthetightjunctionisobtained,thejunctionisseenasacontinuousnet-likearrangementofrowsofintramembranousparticlesandcorrespondingrowsofpits(orridgesandgrooves).,2、中间连接:(Intermediatejunction)相邻细胞间有一狭小间隙,其中充满均质状物质,该处两侧胞膜的胞质面有少量致密物质并有很多平行微丝附着此处。功能:加强细胞间的粘着和传递细胞间的收缩力,3、桥粒:(desmosome)相邻细胞间有较宽的间隙,其中有一纵行的致密线,与间隙相应处的细胞膜的胞质面有致密板,微丝附着于该板上。牢固连接,4、缝隙连接(gapjunction)相邻细胞的细胞膜呈间断融合形成许多规则的小管。连接小体:6个杆状的连接蛋白功能:细胞间离子交换和冲动的传递的交通管道。,缝隙连接(gapjunction),连接复合体junctionalcomplex,1,2,3,4,2个或2个以上出现,上皮的基底面1、质膜内褶,胞膜折向胞质内平行长杆状线粒体扩大细胞基底部的表面积,有利于水和电解质的迅速转运,LM基底纹,小结,什么染色?,microvilli,cilia,Gobletcell,什么上皮?,关键名词,1、组织学、胚胎学2、光镜和电镜的种类及分辨率、放大倍数3、HE染色和镀银染色4、PAS反
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