3-4-定性定量方法

2-4定性定量方法,色谱定性分析方法1.纯物质保留值2.相对保留值（）3.保留指数（I）,色谱定性、定量分析方法,色谱定量分析方法1.归一化法2.外标法3.内标法,纯物质保留值定性法,标准物对照法将样品和标准物在相同的色谱条件下进样分析，初步定性样品中与标准品保留时间相同的色谱峰组分改变柱温若在3个以上不同柱温条件下，它们的保留时间也相同，它们为同一化合物的概率75更换固定液若在2个以上的不同固定液以及不同柱温的条件下，保留时间完全相同，它们为同一物质的概率90,标准物加入法为克服色谱系统的波动对保留时间的影响，在样品中加入标准物，与原样品的色谱图对比，确定色谱峰增高的组分从而定性。,标准物对照进行定性分析示意图已知纯物质：a.甲醇；b.乙醇；c.正丙醇；d.正丁醇；e.正戊醇,定量分析方法,直接定量法无需待测化合物的标准品标准系数法采用文献资料提供的该化合物响应值归一化法视所有组分的响应值均相同,校正定量法需要已知纯度的化合物建立定量基准自身校正用待测化合物的标准品求其校正因子对照校正以某个化合物的校正因子为定量的基准,1.峰面积的测量（1）峰高（h）乘半峰宽（Y1/2）法：A=1.064hY1/2（2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时使用A=h（Y0.15+Y0.85）/2（3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法。A=htR（4）自动积分和微机处理法,试样中各组分质量与其色谱峰面积成正比，即：,2.定量校正因子,样品中所有组分已分离并都被检测出所有组分的校正因子均相同，即则组分i的百分含量即等于其面积的百分数。即：,3.归一化法,校正定量法,标准曲线法,一点校正法,外标法(绝对校正因子法),内标法(相对校正因子法),仪器分析中,定量分析通常采用的是标准品校正法先测定标准品获得待测成分的校正因子f，然后再定量分析,简单应用广泛抗干扰能力弱精密度不稳定,复杂要求特殊抗干扰能力强精密度较高,原理,方法,特点,测定待测组分的标准品溶液，求得校正因子f；再测试供试品，用校正因子对被测组分的峰面积进行校正，计算含量,校正因子含量,4.外标法,1）单点校正法,例1苯标准品溶液为1.204ug/ml,进样2ul,苯峰面积为6048.取排放废液5L,用正己烷萃取,得100ml供试品溶液,进样3ul,测得其苯的峰面积3695，问该废液达到苯0.01ppm的排放标准否?,废液中苯的浓度Cc100(ug)/5103(g）0.00981(ppm),求苯的校正因子f1.2042/60480.0003981,供试品溶液中苯的浓度cf3695/30.4904（ug/ml）,解,标准品和样品是分别两次进样分析的，色谱系统的状态难以完全相同,准确性和精密度取决于色谱系统的稳定性和进样量的准确,手动进样时，进样体积受温度、计量读数、进样操作等因素的影响，波动较大,单点校正法的缺点,配制标准溶液C1C5,测试标准溶液A1A5,绘制标准曲线,计算回归方程,AbCa,R20.995,2）标准曲线法,向含待测物(Ci)的溶液中加入内标物(Cs)，,采用这种方法作定量分析，其准确性和精密度与进样的体积是否准确是无关的。,5.内标法,（1）为试样中不含有的纯物质；（2）与被测组分性质比较接近；（3）不与试样发生化学反应；（4）加入的量应与被测组分的量接近；（5）出峰位置应在被测组分附近，且无组分峰影响。,内标物要求,测定待测物和内标物的标准品溶液，求得校正因子f；测试供试品，用校正因子对被测组分的峰面积进行校正，计算含量,校正因子,1）单点校正法,含量,例2标准品溶液为苯1.204ug/ml，正十一烷（内标物）1.084ug/ml，进样测得苯和正十一烷的峰面积分别为6248和9056。取某厂排放废液5L,用正己烷萃取后,加入正十一烷0.1ml，得100ml供试品溶液,进样测试，测得苯和正十一烷的峰面积分别为3650和9862，问该废液达到苯0.01ppm的排放标准否?,废液中苯的浓度Cc100(ug)/5103(g）0.0118(ppm),苯的相对校正因子f(1.204/1.084)/(6248/9056)1.610,供试品溶液中苯的浓度cf(3620/9862)(100/100)0.5910（ug/ml）,与【例1】用外标法测试的数据比较，相对误差为：(0.01180.00981)/0.0118100%17%,制备标准曲线配制至少5个不同浓度的标准品溶液,每个溶液中的内标物是等量的,测定，以Ci/Cs为横坐标,Ai/As为纵坐标，求得回归方程，其斜率的倒数即为相对校正因子f,2）标准曲线法,例3,GC法测定牛黄解毒片中龙脑含量,色谱条件色谱柱2mm3m玻璃填充柱担体ChromosorbW(AW)，固定液PEG20M(10%)载气N275mL/分；柱温150进样口/检测器220；FID(H2/Air40/500ml/分),制备标准曲线,水杨酸甲酯,乙酸乙酯,内标溶液0.5mg/ml水杨酸甲酯,龙脑,5#标准溶液2.0mg/ml龙脑；0.5mg/ml水杨酸甲酯,再以对半稀释法(内标溶液作稀释溶剂)，得每ml含龙脑2.0、1.0、0.5、0.25、0.125mg，含水杨酸甲酯0.5mg的