《生物技术制药》A卷答案

生物技术制药 A卷答案n .说明(每个问题4分，共10个问题，共40分)1.集成bio反应分离技术生物反应和产品分离耦联技术。根据生物反应和产品特性，结合产品分离单元操作技术，及时从发酵液中去除代谢物，消除发酵过程中对细胞生长或产物形成的产物和副产品的抑制作用，提高发酵产量和生产力，从复杂的分离系统中及时回收产品的操作技术。2.金属工程代谢工程(metabolic engineering assignment engineering)利用多基因重组技术，将有目的的细胞代谢途径修改、转化、细胞特性变化和细胞的基因调控、代谢调节和生化工程相结合，构建新的代谢途径，发展以生产特定目的产品的新领域。这项研究的目的是具有新的代谢途径，生产特定的目的产物，或将具有过生产能力的工程用细菌用于工业生产。根据具体的微生物代谢特性，可以采用不同的设计，可分为代谢变化、代谢途径扩展、新的代谢途径构建等三种。3.geng library基因库一个有机体的基因组DNA用限制性内切酶切下部分酶，然后将该酶片段插入矢量DNA分子，插入基因组DNA片段，所有这些矢量分子的集合体将包括这个有机体的整个基因组，即构成这个有机体的基因库。把这些载体导入受体细菌或细胞，每一个细胞都有一个基因组DNA片段及其载体重组并增殖DNA分子，然后许多细胞一起包含了该生物的整个基因组序列，我们称之为基因组。4.reverseed phase chromatography，RPC反相色谱是指溶质分子的非极性组和非极性固定相之间的相互作用力大小，利用溶质分子的极性组和流动相极性分子相反方向的作用力大小差异进行分离。反色谱和疏水色谱的区别在于前者在有机想象中进行，而蛋白质有时通过反相流和固定相进行部分变质作用，而后者通常在水溶液中进行，蛋白质在分离过程中通常保持天然结构。5.bystander effect旁观者效果将tk基因包含在载体病毒中，并在肿瘤细胞中特别表达该基因，与基因治疗一起补充这种药物治疗，可以大大提高病毒对肿瘤细胞的杀伤效果，死细胞释放的tk酶进一步改造药物前体，将对细胞的杀伤效果扩大到没有感染附近病毒的细胞，从而产生所谓的旁观者效果。6.phage display antiody library techniques噬菌体抗体库将抗体的基因插入噬菌体或病毒编码外壳蛋白的基因中，然后以融合蛋白的形式与噬菌体异服蛋白一起在噬菌体或病毒表面表达，由特异性抗原筛选。这是将思想噬菌体展示技术与抗体结合库技术相结合的技术。7 .体内细胞内抗体也称为内部抗体，主要是在细胞内合成，作用于细胞内成分的抗体。1分子功能研究的主要应用；2细胞因子受体表达减少；抑制3细胞内癌蛋白的活性。4抑制病毒复制。因此，有治疗基因的前景，还有用细胞内抗体抑制I型的研究，其中gp120的fab部分和TatScFv进入了临床试验8 .转基因动物将外来目的基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞、早期胚胎，在受体动物的染色体中稳定地整合，通过各种发展途径将外来目的基因稳定地传递给子代，通过这项技术获得的动物是转基因动物。9.选择性感染筛查噬菌体感染能力恢复与否被称为选择性感染筛选。10.mono layer细胞培养方法将附着在动物细胞组织块上的细胞用酶法或物理方法分散，制成细胞悬浮液，计数，稀释后接种到灭菌培养液中，在37，5% CO2空气中进行初级培养。也就是说，细胞开始生长，逐渐形成断层。2个填空问题(每空1分，共20个空格，共20分)1产品产量PH糖氨基氮菌丝形态2质谱学3添加缓冲剂4附着依赖细胞非附着依赖细胞和性附着细胞5 5-3 聚合酶活性3-5 外体酶活性6抗生素7药物浓度温湿度氧气照明8大肠杆菌不能制造人的红细胞生成素糖基化选择题(每个问题1分，共10个问题，共10分)1 C 2 C 3 B 4 A 5 C 6 D 7 C 8 D 9 A 10 D4个短答案(每个10分，共3个问题，共30分)1分批发酵，饲料分批发酵，半连续培养，连续培养的差异，各自的优缺点。分批发酵是将发酵培养基成分同时放入发酵罐中，灭菌、接种、发酵后，同时释放发酵液的间歇发酵操作的一种类型，也称为间歇发酵。分批发酵是在发酵过程中调节温度的准密封体系，持续放入通风和酸碱溶液，调节PH，不与外界交换其他物质。这是目前应用最广泛的发酵方法之一。(两点)缺点：初期基质浓度高，后期产品浓度高，对发酵也不利。(1点)补品-分批发酵：通过在发酵过程中间歇或持续以某种方式补充新鲜液体，克服营养不足导致发酵过早结束的问题。优点：由于只输入液体，没有结果，发酵液的体积在增加。与分批发酵相比，在培养系统中补充材料可以在培养液中保持一定的基质浓度，从而保证细菌细胞的生长需要，不产生抑制等不利影响，从而达到产物浓度增加的目的。(1点)缺点：容易积累产品，容易感染菌，中间补充剂导致发酵液稀释。(1点)半连续培养：以饲料调配培养基为基础，发酵液的一部分，向下游半连续发酵。这种培养方法的开始阶段与通常的分批发酵相同，但在培养和发酵结束后，不把发酵液全部拿出来，只拿出其中的一部分，同时补充相同体积的新鲜培养基或所需成分，继续发酵培养，就会多次重复。(1点)优点：不仅可以补充营养素和前体，还可以稀释有害代谢物质，有助于产品的持续合成。缺点：如果先释放发酵液，未利用的营养素和新陈代谢活跃的细菌细胞就会受损。其次，中间补充剂会导致发酵液稀释，增加下游提取物的体积，再一次，发酵液中新陈代谢引起的前驱体可能部分消失，这可能影响发酵产物产量，感染菌问题也是影响发酵过程是否进行的重要因素。(1点)连续培养：发酵过程进行到一定阶段，持续补充发酵液，同时以相同流速释放发酵液，保持发酵液原始体积的发酵方式，微生物在稳定状态下生长代谢。优点：连续发酵与分批发酵相比，保持微生物生长及代谢活动旺盛稳定，产量和产品质量也相应保持稳定。可以更有效地实现机械化和自动化，减少劳动强度。减少设备清洗、准备和灭菌等非生产所需时间，提高设备利用率。(两点)缺点：最重要的是开放系统，发酵周期长，容易污染杂菌。第二，在生长周期的持续发酵中，微生物容易发生变异。再次，对于设备。设备和控制元件的技术要求很高。最后，粘着性思想细菌附着在装置壁上生长，或容易在发酵液中打结，所以操作起来很困难。总之，连续发酵营养利用率低于单批培养，通常只维持数月至一年。(1点)酶分离纯化的一般程序和相应方法为了便于A 1原料的选择和预处理分离纯化过程，为了降低生产成本，一般选择富含目的酶的原料。还必须考虑原料的来源、方便的经济等因素。从微生物发酵液中提取酶的第一步是通过利用发酵液的预处理、沉淀、变性、絮凝、絮凝和絮凝处理发酵液中的无机离子、杂蛋白等活性炭、离子交换树脂等去除色素和其他物质，采取后续措施。(4点)2酶分离也称为初步纯化或萃取，一般使用盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、离心等技术将目的酶与其他蛋白质分离。使用的方法通常简单，吞吐量大。(两点)3酶纯化及酶高度纯化。粗酶分离后