蛋白检测篇3-免疫荧光技术_第1页
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文档简介

编号： 主题：免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ） 概述： 免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，它是 根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧 光抗体（或抗原）作为探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体） 。利用荧光 显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位。 目的： 测定内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、神经递质、受体、细胞因子、细胞表面 抗原、肿瘤标志物、血药浓度等各种生物活性物质。 步骤： 1、细胞准备； 2、固定。根据需要选择适当的固定剂固定细胞，固定完毕后的细胞可置于含叠 氮纳的 PBS 中 4保存 3 个月； 3、通透。使用交联剂（如多聚甲醛）固定后的细胞，一般需要在加入抗体孵育 前，对细胞进行通透处理，以保证抗体能够到达抗原部位。选择通透剂应充分考 虑抗原蛋白的性质。 4、封闭。使用封闭液对细胞进行封闭。 5、一抗结合。室温孵育 1h 或者 4过夜。 6、二抗结合。间接免疫荧光需
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