发酵罐的使用与注意事项

.,发酵罐及其使用注意事项,李福祥（实验室管理员）,.,内容简介,发酵罐的组成发酵罐使用的安全问题实验型发酵罐常见故障及处理,.,发酵罐的组成,控气系统：供气及搅拌设备温度控制系统：加热设备及冷却水系统调控及记录系统：各种探头、控制器（电脑）,.,.,发酵罐使用的安全问题,使用人员的安全问题设备的安全实验过程的安全实验环境的安全,.,实验人员的安全（安全一）,烫伤及实验药品的灼伤灭菌后系统的连接，罐体与蒸汽补料液灭菌后，接种操作发酵液（pH酸性较大）正压条件下接酸液碱液爆炸空气压缩机的储气罐（氧气，硅油）,.,实验人员的安全（安全一）,物理及电伤害玻璃器皿、工具、搅拌液体导致的短路与漏电，线路漏电（电机）微生物安全我们的实验在规程操作下是安全的。有外伤时机会致病,.,设备的安全（安全二）,物料方面pH范围3.012.0化学兼容性（卤族元素、酸性物质）无不溶性硬物，转子、玻璃等操作过程灭菌温度（电极，126）、温度探头（加热）罐压（0.1Mpa），灭菌时出气口的通畅搅拌速度，1001000rpm，电机及罐体稳定性,.,设备的安全（安全二）,维护与保养试验后罐体的灭菌，尽量不放电极，加水电极液的更换、保存，电极膜罐体的冲洗，加洗涤灵趁热洗效果更好，尾气处理喷出的碱液避免腐蚀实验设备及台面,.,实验结果的安全（安全三）,温度温度探头是否加入发酵液，温度控制是否打到自动冷却水开关是否开启、制冷系统是否工作正常pH氨水是否经过稀释（自动），或者夹紧（手动）发酵开始前是否调节pH调pH的溶液是否标示清楚，泵能否工作,.,实验结果的安全（安全三）,染菌或噬菌体及时清理桌面的培养基补料液经过灭菌或者0.22um膜过滤发酵前及发酵后的灭菌保持发酵罐体的正压空气过滤器（污染、方向）尾气处理及实验后实验环境的消毒信息安全：仪器与电脑的连接、软件的正常工作,.,实验环境的安全（安全四）,微生物安全没有用完的培养基，残留的培养基不敞口放置任何培养物及相关器设备都须灭菌或者消毒如果不方便及时灭菌或者消毒的应密闭存放。先清理实验环境再喷洒消毒液和开紫外灯及时处理泄露的培养物化学药品及设备尾气接收液；检查储气罐压力、,.,实验型发酵罐常见故障及处理,电子、软件的设置方面机械方面配套设备方面,.,电子、软件的设置方面故障,温度控制pH控制转速控制溶氧控制控制器电极标定其他,.,温度控制达不到精度,PID设置，不建议自行改动控制精度范围过大，0.2；0.1冷却、加热限值环境温度低时，减少冷却限值，加大加热限值；环境温度高时，加大冷却限值，减少加热限值。,.,温度升不上来,循环回路阀门状态不对，检查阀门状态是否在温度控制状态。冷却电磁阀漏水冷却电磁阀发芯有垃圾时，会引起电磁阀关不死，冷却水漏入夹套，抵消了加热作用，检查冷却电磁阀阀芯是否有垃圾或弹簧弹力是否正常温度保护开关设置过低，平常不建议修改。硬件问题：加热器损坏、加热保险丝损坏加热、继电器损坏,.,温度与实际温度偏差大,温度校正不够进入Ctrl+F3设置画面，校正温度要采用二点校正法。温度电极线接触不良检查电极到线接口处接触要良好，将控制箱处插针开口出加大，以保证接触良好,.,温度降不下来,冷却水：检查冷却水，保证冷却水温冷却电磁阀不工作：检查冷却阀控制回路，更换冷却电磁阀系统是否处于自动控温状态，温度电极是否插在仪器上。,.,pH调控,pH在自动档时不能控制检查加碱或加酸蠕动泵开关设置都应在“自动”档碱液酸液是否充足如果加的是氨水是否因为氨气析出而自动加减。,.,pH检测与实际值偏差大,标定不准有电极零点漂移，尤其是在灭菌以后。电极状态是否正常pH显示不稳定、跳动检查pH电极导线，要接触良好，如潮湿时，采用干燥剂或烘干方法处理,.,转速控制,电极转速达不到设定值：调整上、下限值，使设置值在上、下限值范围内电机运转不正常：转速按钮按下时，电机才能运转；是否与溶氧串级控制；设定值为0或者处于手动状态；输出极限或者设定转速太低，过载保护；电机损坏或者保险丝断了。,.,溶氧控制,溶氧值不变化或检测不到电极内的反应溶液是否定时补加。电极故障时，电极信号已达到最大值（信号过大），所以在标定斜率时（达到100%左右），内部信号已达到最大值，故溶氧值不变（保持在100%左右），检查电极膜片，及时补充药水。电极导线是否受潮，受潮时，电阻值变小（信号增大），应采取干燥处理,.,控制器,死机参数设置错误、操作动作过快重启以后解决，参数设置超过上限或操作过快都可能造成死机。硬件损坏或者接触不良，主机散热不好。,.,发酵罐软件无法接收数据,检查联线没问题、最后发现软件认为现用的仪器是2号罐，所以将软件接收改为2号罐，解决。在软件上设置的端口及频率是否正确。电脑与主机控制器的链接是否正常是否点击开始接收信号。,.,电极标定问题,无法标定：仪器处于发酵状态无法进行正常的标定零点标定故障：电极、导线、缓冲液标定过程缓慢：电极老化，溶氧电极的零点。标定过程测量值不稳定：标定时尽量不晃动标定液，如果可能的话固定着标定，防止手上的静电影响稳定。斜率标不到期望值：温度补偿、定标液，电极,.,机械方面故障,密封性管路漏水或者漏气，卡条O型圈密封件，罐体，轴封异常声响转轴电机风扇擦边轴承损坏、机械密封损坏、电机与轴链接不好罐中有异物、电池阀有问题。,.,配套设备,空气压缩机漏气：零件松动经查为出气口的阀门螺丝松动并有点磨损。压力达不到要求或频繁启动：出口压力调节，主机气体的设置；仪器压力设置过低或选型不当。输出压缩带水：及时排除储气