醌类化合物的提取分离实例.ppt

醌类化合物的提取,提取方法,1.水蒸气蒸馏法,适用于小分子的游离醌类化合物的提取，由于其具有挥发性，可随水蒸气馏出，故可用此法提取，如白雪花中蓝雪醌的提取。,实例白雪花粗粉加水浸泡水蒸气蒸馏馏出液放置结晶抽滤结晶甲醇重结晶蓝雪醌（mp：7576）,2.有机溶剂提取法,常用甲醇或乙醇提取，可将不同极性或类型的醌类成分都提取出来，得到总醌类再进行分离。1、用于提取苷元（游离醌类）。2、可用苯、氯仿等极性较小的溶剂提取。,实例：大黄中总蒽醌成分的提取,大黄粗粉100g,置1000ml圆底烧瓶中，加入95%乙醇250ml，回流提取2hr，趁热抽滤,醇液,药渣,加入95%乙醇200ml，回流提取1.5hr，趁热抽滤,醇液,药渣,乙醇提取液,静置冷却，抽滤,滤液,减压回收乙醇至糖浆状，将浓缩物转移至250ml三角瓶中,乙醇总提物,放冷，加入乙醚60ml冷浸，振摇20将乙醚液倾入500ml三角瓶中,乙醚层,浸膏,40ml乙醚+16ml丙酮冷浸三次（每次15）,乙醚层,浸膏,乙醚总提液,实例,3.碱提酸沉法,适用于具有酚羟基的醌类化合物，由于其可溶于碱液，加酸后又沉淀出。1、用于提取带游离酚羟基的醌类化合物。2、利用酚羟基与碱成盐溶于碱水中，酸化后沉淀析出。,4.超声提取法,研究超声波技术对大黄中蒽醌类成分提取率的影响,并与传统提取方法做比较.方法:以超声波强化提取法为试验组,以常规煎煮法及乙醇回流法对对照组,进行平行试验.结果:以水为提取溶剂,采用超声波强化提取10min对游离蒽醌的提取率即与水煎煮法煎煮60min提取效果相当;以乙醇为提取溶剂的提取效果明显好于水,几种方法相比较,以乙醇作为提取溶剂超声波萃取法对大黄蒽醌的提取效果最好.结论:超声波法提取大黄蒽醌类成分具有提取效率高、操作简便、省时等优点,值得推广应用.,5.微波提取法,优选微波技术提取大黄游离蒽醌的工艺。方法：先采用单因素考察,然后采用正交试验法考察微波输出功率、乙醇浓度、浸出时间、料液比4个因素对提取率的影响,优选大黄游离蒽醌的最佳浸出方案。结果：采用70%乙醇溶液在微波输出功率中高火,用70%乙醇,料液比为18,提取5min,提取2次,大黄游离蒽醌提取率为1.31%,相对提取率达到88.52%。结论：用微波浸提法提取大黄中的蒽醌类成分效率高、操作简便、省时。,游离醌类化合物的分离,分离方法,1、羟基蒽醌的酸性差别很大时，采用PH梯度萃取法。,由于蒽醌羟基位置、数目及羧基的有无，其酸度大小是有区别的，可分别溶于不同碱性的水液，故可采用梯度PH萃取法。此法为分离游离蒽醌衍生物的经典方法，也为常用方法。5%NaHCO3液含-COOH及两个以上-酚OH5%Na2CO3液含一个-酚OH蒽醌类1%NaOH液含两个a-酚OH蒽醌类5%NaOH液含一个a-酚OH蒽醌类,实例大黄中蒽醌类化学成分的提取分离技术,根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成游离苷元，苷元可溶于氯仿而被提出的原理。再利用各羟基蒽醌类化合物酸性不同，采用pH梯度萃取法分离而得各单体苷元。,五、应用举例,实例番泻叶中蒽醌类化学成分的提取分离技术,番泻苷A不溶于水、苯、乙醚或氯仿，难溶于甲醇、乙醇或丙酮，但在与水相混的有机溶剂中的溶解度随含水量的增加而增大，溶剂中含水量达30%时溶解度最大。采用大孔吸附树脂法进行分离。,PH梯度萃取法对蒽衍生物进行初步分离，对性质相似，酸性强弱相差不大的羟基蒽醌类则不能很好分离，故初分后再结合色谱法进一步分离。多用硅胶为吸附剂，有时也用聚酰胺，不宜用氧化铝，尤其是碱性氧化铝，因为羟基蒽醌能与氧化铝形成牢固螯合物，难以洗脱。,2、羟基蒽醌的酸性差别不大时，采用色谱方法，可得到彻底分离。,实例：建立了以苯酚为原料合成对苯二酚过程中各物质的高效液相色谱(HPLC)及气相色谱(GC)分析方法。HPLC方法采用KromasilC18色谱柱(4.6mm250mm,10m),流动相组成:V(甲醇):V(水):V(改性剂)=20:80:0.15,流动相流速为1.0mL/min,定量环进样20L,Prostar紫外检测器检测波长为254nm,实现了对低含量对苯二酚、对苯醌、邻苯二酚及苯酚4种物质的分离测定;同时,采用氢火焰离子化检测器对上述4种物质在较高浓度下进行了GC分析,测定快速准确。,实例：建立了同时测定化妆品中蒽醌类含量的HPLC法，以评价化妆品的美容功效。采用甲醇超声提取，HPLC法分离测定。结果为3种被测物在11min内均得到良好的分离。在1gmL-250gmL均与其各自对应的峰面积呈良好线性关系（R09997）。在添加质量浓度为05gmL50gmL，回收率在920-1025，精密度RSD21，最低检出限（SN=3）为芦荟苷05160gmL，芦荟大黄素00864gmL，大黄酚01016gmL。该法简便、快速、准确，可用于化妆品中蒽醌类含量的检测。,实例：硅胶柱色谱法分离大黄酚、大黄素-6-甲醚装柱：用石油醚乙酸乙酯（9.8:0.2）浸泡200300目硅胶约20g，搅拌均匀，尽量赶出气泡。一次性倒入1.8cmX28cm的层析柱中，轻轻敲打使硅胶均匀下沉，至硅胶界面不再下降为止。上样：将离大黄酚和大黄素-6-甲醚的混合物用乙醇加热溶解，伴入少量硅胶，水浴60左右烘干，加到已装好的硅胶柱顶端，最后在样品带上盖上一层硅胶或棉花，以保护样品界面不受干扰。洗脱：先用100ml石油醚乙酸乙酯（9.8:0.2）洗脱，至第一条黄色色带洗下来，再换用100ml石油醚乙酸乙酯（9.5:0.5）洗脱下第二条色带。,（一）从大黄中提取分离羟基蒽醌类还可采用下列方法用80%乙醇室温渗漉提取，回收溶剂，得浸膏后依次以石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，得到的石油醚部分和三氯甲烷部分再分别上硅胶色谱柱以石油醚-乙酸乙酯（955）和（9010）洗脱，分离得到大黄素甲醚、大黄酚及大黄素、芦荟大黄素单体。工艺流程如下：,（二）从大黄中提取分离总蒽醌类可采用下列方法工艺一：,工艺二：,3.PH梯度萃取法对蒽衍生物进行初步分离，对性质相似，酸性强弱相差不大的羟基蒽醌类则不能很好分离，故初分后再结合层析法进一步分离。多用吸附柱层析，以硅胶、磷酸氢钙、聚酰胺粉为吸附剂，不宜用氧化铝，尤其是碱性氧化铝，因为羟基蒽醌能与氧化铝形成牢固螯合物，难以洗脱。,蒽醌苷类的分离,由于蒽醌苷类水溶性较强，分离精制较困难，故现多需进行预处理。溶剂法是用中等极性的有机溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等，从除去游离蒽醌衍生物的水溶液中，将蒽醌苷萃取出来，再作进一步分离。,虎杖浸膏的水溶液,氯仿回流,氯仿液,（含大黄素等游离蒽醌脂溶成分）,水液,EtOAc萃取,EtOAc液（含大黄素苷等蒽醌苷极性成分）,溶剂法：,铅盐法：,中药粉,90%乙醇加热提取,提取液,浓缩,浓缩液,氯仿（或乙醚、苯）萃取,氯仿液（游离蒽醌）,水层,加醋酸铅溶液，过滤,滤液,沉淀,水洗，悬浮于水中，通H2S脱铅过滤,沉淀（Pb2S）,滤液,蒽醌苷,补充实例用不同浓度的乙醇回流提取茜草粗粉，得到浸膏采用不同极性溶剂萃取，再使用色谱法分离。茜草中主要化学成分提取分离方法：,结晶：1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌结晶：1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-D-吡喃葡萄糖苷结晶：1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-D-吡喃木糖（12）-（6-O-乙酰基）吡喃葡萄糖苷结晶：1,2-二羟基蒽醌-2-O-D-吡喃木糖（16）-D-吡喃葡萄糖苷结晶：1,3-二羟基-2-羟甲基蒽醌-3-O-D-吡喃木糖（16）-D-吡喃葡萄糖苷,流程说明：采用溶剂提取法进行提取，系统溶剂法进行粗分，得到不同极性部分。对各极性部分应用色谱法如硅胶色谱法、反相柱色谱法进行分离。