革兰氏染色法操作规程_第1页
革兰氏染色法操作规程_第2页
革兰氏染色法操作规程_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

革兰氏染色法操作规程文件编码BPZK3-SOP.F025版 本 号00代替文件革兰氏染色法工作标准代替文件编码BPSOS02.226-00部门职务签名日期起草人QC室QC人员审核人QC室主管审核人QA室QA人员审核人QA室主管格式审核QA室文件管理员批准人质量部经理颁发部门质量部生效日期分发份数Copy 分发部门质量部QC室 1目的建立革兰氏染色法操作规程，确保革兰氏染色法操作规范化、科学化。2范围适用于用革兰氏染色法对细菌进行分类和鉴定。3职责3.1检验员：负责按本规程进行革兰氏染色操作。3.2 QC主管、质量部经理：负责监督。4内容4.1仪器与用具酒精灯、洁净的盖玻片、接种环、滴管、生物显微镜。4.2材料4.2.1试剂结晶紫、番红、碘化钾、碘、95%乙醇、草酸铵、香柏油。4.2.2试液及配制方法4.2.2.1 结晶紫染色液：称取结晶紫2g，溶于20ml 95%乙醇中；称取草酸铵0.8g，溶于80ml水中；将两种溶液混合，静置48h后使用。4.2.2.2碘染色液：称取碘化钾2g，加510ml水使充分溶解，加碘1g，待完全溶解后，加水至300ml。4.2.2.3 番红复染液：称取番红0.25g溶于10ml 95%乙醇中，然后加水100ml。4.3操作步骤4.3.1 样品固片 取一干净的载玻片，用接种环挑取一环无菌水于载玻片中，挑取少量菌于生理盐水中涂片或直接滴一滴待检菌在盖玻片中央，自然干燥固定。4.3.2 初染 滴加结晶紫染液于已固定的涂片上，染1min，用水冲洗、甩干。4.3.3 媒染 滴加碘染色液，液作用1min，用水冲洗、甩干。4.3.4 脱色 滴加95%乙醇脱色，置白色背景下，侧动盖玻片，直至无紫色脱落为止（约为20-30秒），立即用水冲洗、甩干。4.3.5 复染 滴加番红复染液，染1-2 min，用水冲洗、甩干。4.3.6 镜检 置油镜下观察。先用低倍镜找准目标，于涂有样品处滴加香柏油一滴，用油镜观察。4.3.7 结果判定革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常呈假阳性。4.4 注意事项 4.4.1 待检菌菌龄应为1824h。一般情况下，革兰氏阴性菌的染色反应较稳定，不易受菌龄长短影响；而革兰氏阳性菌，有的在幼龄时呈阳性，超过24h可变为阴性。故培养物越陈旧，菌细胞衰老、死亡，则染色常为阴性，造成错判。4.4.2 涂片不宜过浓厚。过于密集的菌体，因洗脱不匀常呈假阳性。涂片后不宜用火焰烤干，宜自然干燥；若经火焰固定时，应以温热不烫手为宜，以免菌体受损，致染色反应不准。4.4.3 革兰氏染色操作的关键步骤是对脱色
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 事务文书

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论