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文档简介

任务五:药物对家兔尿量的影响,基础医学实验技术-供临床医学专业使用,三峡医专基础医学部,知识目标:1.能熟练说出利尿药的临床用途和使用注意事项;2.能熟练说出常见利尿药的作用机制;,能力目标:1.学会家兔输尿管插管技术。2.学会观察药物对家兔尿量的影响,并分析内在机制。3.能熟练规范地进行家兔常规外科手术。,素质目标:1.培养严谨求实、团结合作的工作作风。2.树立关心、关怀、尊重实验动物生命的医学人文精神。,重点难点,一、实验目的,二、实验原理,尿生成的三个基本过程:肾小球的滤过肾小管和集合管的重吸收肾小管和集合管的分泌,终尿生成滤过液(原尿)重吸收量分泌(比较少,可不考虑),成年健康家兔,二、实验对象,生物医学信号采集处理系统压力换能器刺激电极动脉插管、输尿管插管兔手术器械1套,20%乌拉坦生理盐水50%葡萄糖0.01%去甲肾上腺素0.1%呋塞米,三、实验器材和药品,(一)麻醉、固定,家兔称重;耳缘静脉注射20乌拉坦(5ml/kg);麻醉后将动物仰卧固定于兔手术台上。,麻醉剂注入原则:先快后慢。注意:麻醉过程中观察四项指标以免麻醉过量。,四、实验步骤,(二)颈部手术,做颈部切口,逐层分离皮肤、皮下组织、肌肉(钝性分离),暴露气管;分离右侧迷走神经,穿线备用;分离左侧颈总动脉并行动脉插管,描记动脉血压。手术完毕后用温生理盐水纱布将切口盖住,保护创面。,四、实验步骤,1.剪毛,2.皮肤切口,分开约4-5cm,3.分离筋膜等皮下组织;,4.钝性分离肌肉层,暴露气管(用止血钳),用拇指和食指将肌肉和皮肤提起并外翻,另外三指在皮肤外侧向上顶,暴露出颈总动脉鞘,用玻璃分针轻轻划开鞘膜,5.分离右侧迷走神经和颈总动脉;,分离出右侧迷走神经,穿线备用;分离出颈总动脉,穿两线备用;,动脉夹,远心端,近心端,眼科剪做一1/3直径的小口,温馨提醒:动脉插管之前,确保压力传感器和三通管连通并且充满肝素。,动脉插管,6.做颈总动脉插管,结扎固定。,(三)腹部手术,1、剪去下腹部毛,在耻骨联合上缘沿腹白线作46cm正中切口,用湿生理盐水的纱布衬垫后,将膀胱翻至体外(勿使肠袢外露,以免血压下降)。,四、实验步骤,(三)腹部手术,2、在膀胱底部找出两侧输尿管,细心分离(莫损伤伴行血管),各穿两条线备用,分别将输尿管近膀胱端结扎,在结扎线的远离膀胱端剪开一个斜口(可先用玻璃分针探一下),把预先充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管(1cm左右),用线结扎固定。,3、手术完毕后用温生理盐水纱布将切口盖住。,四、实验步骤,(四)记录血压和尿滴,实验装置连接,记录正常血压;输尿管插管下接一小烧杯,记录每分钟和5分钟尿滴数。然后依次进行下列实验,观察血压和尿量的变化。,四、实验步骤,1、记录正常血压、尿量。2、静脉快速输入生理盐水20ml,观察血压和尿量变化。3、静脉注射50%葡萄糖(2ml/Kg),观察血压、尿量变化。4、静脉注射0.01%去甲肾上腺素0.3ml,观察血压和尿量变化。5、静脉注射0.1%呋塞米1mL,观察血压和尿量变化。,五、观察项目,1、每项实验均应在前一实验效应基本消失,尿量基本稳定才进行下一项实验。2、每项实验前均应计数1分钟和5分钟尿量作为该项实验的前对照。3、应保护好耳缘静脉。4、尽量减轻创伤、减少失血和动物保温,以保证尿液的引导和记录。5、实验项目的顺序最好不要调整。6、在做葡萄糖定性实验时要注意安全。,六、注意事项,七、实验结果,1、静脉快速注射生理盐水20ml,结果:血压升高,尿量增多。,机制:(1)血液被稀释,血浆胶体渗透压下降,肾小球有效滤过压增加,肾小球有效滤过率增加,尿量增加。(2)血容量增加,肾小球血浆流量增加,使尿液滤过增多,也促使尿液增加。(3)血容量增加,刺激左心房及胸腔大静脉容量感受器,冲动沿迷走神经上传到下丘脑的视上核和室旁核,使抗利尿激素(ADH)的分泌与释放减少,远曲小管,集合管对水的重吸收减少,尿液增多。,八、结果分析,2、静脉注射50%葡萄糖,结果:血压无明显变化,尿量明显增多;注射前尿糖定性试验阴性,注射后为阳性。,机制:经脉注射50%葡萄糖溶液后,使机体血糖浓度增高,糖超过了肾脏重吸收葡萄糖的肾糖阈,经肾小球滤过的大量葡萄糖进入肾小管,不能被近曲小管上皮细胞全部重吸收,使小管液中出现较多的葡萄糖,小管液中渗透压增加,妨碍了水的重吸收,于是水随葡萄糖一起排出,尿量增加。同时尿中出现葡萄糖,尿糖定性试验为阳性。,八、结果分析,3、静脉注射去甲肾上腺素,结果:血压升高,尿量却明显减少;,机制:与外周小动脉平滑肌中的受体相结合,使之收缩,血压升高。而肾小球入球小动脉收缩,使肾血流量减少,肾小球毛细血管血压降低,肾小球滤过率减少,尿量减少。,八、结果分析,4、静脉注射呋塞米,结果:尿量显著增加机制:,选择性抑制髓袢升支粗段的Na+-2Cl-K+同向转运体,静脉注射呋塞米,Na+和Cl-重吸收减少,尿液的浓缩减弱,

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