药物安全性评价-局部给药毒性试验

。名称：谭震元联系电话Q:539967694，广西医科大学药品安全评价中心，药品安全评价中的地方药物毒性试验。儿童被“沙利度胺”、“沙利度胺”和“沙利度胺”两个手性分子事件剥夺了手臂20世纪50年代。德国，“海豹畸形宝宝”，“海豹畸形人”。龙胆泻肝丸事件-90年代。中国，马兜铃酸，肾病，肾衰竭，有毒尿液，例：痤疮是毛囊皮脂炎症的一种，多发于皮脂分泌旺盛的部位，如年轻男女的面部和胸部，病程长，易复发。克林霉素过氧化苯甲酰凝胶是由克林霉素磷酸酯和过氧化苯甲酰制成的复方制剂，临床用于治疗痤疮。需要观察其对皮肤的刺激和过敏反应。药品安全性评价中局部用药毒性试验的概念是指局部用药引起的毒性反应。最常用的制剂：包括皮肤制剂(油漆、搽剂、软膏制剂、透皮吸收制剂等)。)、滴眼剂、滴鼻剂和喷雾剂、肌肉注射、直肠和阴道制剂等。第一节皮肤用药的毒性评价。1.皮肤组织结构皮肤覆盖全身表面，由表皮、真皮和皮下组织组成。化学物质对皮肤的毒性作用类型。根据不同的性质，药物引起的皮肤损伤包括原发性性刺激炎症反应和致敏反应，偶尔也会引起皮肤癌。皮肤给药毒性评价包括：1、急性毒性试验2、长期毒性试验3、皮肤刺激试验4、过敏试验5、光敏试验等。定义：指动物完整或受损的皮肤接触测试对象一次后，在短时间内进行的毒性测试。2.受试者：使用临床制剂。如果临床制剂的浓度不能满足剂量要求，将受试者制成粉末并用合适的基质(如凡士林、羊毛脂等)溶解。)并混合均匀。实验动物和实验条件每组动物数量：一般4-6只白兔和小型猪，10只大鼠或豚鼠，一半雄性，一半雌性；动物体重：兔2-3公斤，豚鼠200-300克，大鼠200-250克，小型猪30-40公斤。饮食，水摄入量：免费饮食，水摄入量。动物舍温度和湿度：兔、豚鼠和小型猪控制在18-26；大鼠控制在20-25，相对湿度为40%-70%。换气次数为10-20次/分钟；12h明暗交替。剂量设计应至少设置三个剂量组，赋形剂对照组和空白对照组。如果受试者在临床给药期间可能接触到受损皮肤，则应建立另一个受损皮肤小组。给药前，给药部位(通常在背部)应24小时脱毛。给药期间，试验物质应均匀地涂在动物脱毛区域。对于液体制剂，试验物质应涂在敷料上，然后涂在脱毛或受损皮肤区域，敷料应使用半封闭外罩固定。施用24小时后，除去敷料，用温水或合适的溶剂除去残留的测试物质和赋形剂。观察期：连续观察14天，1-2次/天。也可根据毒性反应的发生情况适当延长。观察指标：给药前7天和给药后14天称重。观察给药后动物的全身反应：毛发、眼睛、粘膜、呼吸、行为、自主活动、肌肉紧张等。以及是否有任何毒性反应症状如颤抖、震颤、痉挛、流涎、腹泻、运动功能减退、精神萎靡、昏迷等。动物死亡时应立即进行尸检，明显异常时应进一步进行组织病理学检查。结果观察到的阳性症状结合大体解剖或组织病理学结果进行综合分析，并与对照组进行比较，对动物的毒性和死亡原因做出明确判断。病理组，对照组，(2)皮肤给药的长期毒性实验，1。定义是指与被测物质长期反复接触后，动物完整或受损皮肤的毒性反应和可逆程度实验。2.受试物质与“急性毒性试验f)高剂量：原则上，动物应该有明显的毒性反应，甚至个别动物死亡。低剂量：原则上应高于动物药效学实验的等效剂量，且不会对动物造成毒性反应；中等剂量：动物可能有轻微的毒性反应。给药时限、给药频率、给药时限为3个月，原则上每天给药。服用期应3个月，每周至少服用6天。也可以根据临床给药频率进行给药。给药恢复期后，保留一些动物，并持续观察可能的延迟毒性反应，了解毒性反应的可逆程度。恢复期根据受试物质的药代动力学特征、靶器官或靶组织的毒性反应和实际恢复情况确定。第一次给药前24小时，给药区域的背部脱毛。每天服药一次，每次接触至少6小时。确保受试物质与给药部位有良好的接触，并防止动物进食药物。可以用纱布等无刺激性的辅料包裹，也可以穿上透气性好的特殊外套。除给药部位、其周围组织乃至全身皮肤变化和皮肤病理检查增加外，观察指标与长期毒性实验要求相同。结果全身毒性评价结果与长期毒性试验结果一致，应根据各项检测指标和组织病理学检查结果进行综合分析。此外，还应注意评估局部给药及其周围组织的毒性。定义：皮肤刺激是指皮肤经皮给药后可逆的炎症损伤。(如果给药部位出现不可逆的组织损伤，则称为腐蚀性。皮肤刺激试验：观察动物皮肤与受试者接触后是否引起局部反应，如发红、充血和渗出。受试者应采用与临床应用制剂一致且符合临床应用质量标准的受试者，并应注明其名称、来源、批号、含量(或规格)、辅料、储存条件和制备方法等。辅料和杂质的名称和数量应尽可能清晰，并附有研究单位的自检报告。所用赋形剂应标明批号、规格和制造商，并符合实验要求。实验动物有多种哺乳动物可供选择。一般来说，白兔是首选，每组4 8只，雌雄各半。其他种类的动物(如小型猪等。)也可以被选择，并且应该阐明选择除兔子和小型猪之外的动物的合理性。赋形剂用作对照，同一身体的左侧和右侧用作对照。在试验前24小时，在给药区进行脱毛。脱毛范围是3厘米3厘米。(给药前，应检查脱毛皮肤是否因脱毛而受损，受损皮肤不应进行测试。)在研究受损皮肤的刺激性时，使用砂纸打磨或标记应用部位的“井”，并以出血程度为准。在实验操作中，被测物质的药物量一般为0.5g固体或半固体和0.5ml液体，直接涂在一侧脱毛的皮肤上，然后用两层纱布(2.5cm2.5cm)和一层玻璃纸等覆盖，并用无刺激性的胶布和绷带固定。另一侧涂有赋形剂作为对照。应用时间至少应为4小时。使用后，取出测试物质，用温水或非刺激性溶剂清洁给药部位。注：多次给药的皮肤刺激试验应在同一部位连续进行，每次给药时间相同，一般不超过4周。观察指标在自然光或全光谱光下观察皮肤反应。根据表中给出的评分标准对皮肤红斑和水肿进行评分。结果单次给药实验评价：计算各组受试者和赋形剂在各obs的皮肤反应评分的平均值过敏反应的常见试验方法，Buehler试验：在第0、6-8和13-15天诱导局部施用封闭片剂，在第27-28天6小时内不对肋腹施加局部刺激。关闭页24和48小时读取结果被移除。GMPT试验：通过皮内注射进行诱导，5-8天后再次诱导，在第20-22天给予24小时激发剂量，并在24小时和48小时内去除激发剂量以读取结果。(1)光过敏实验(光过敏反应)(2)光毒性实验(光刺激物)，3)皮肤光过敏实验，2)洞给药毒性实验，1)洞给药急性毒性实验1。定义是指动物腔(包括眼睛、耳朵、鼻腔、直肠和阴道)与受试者接触一次后，在短时间内发生的毒性实验。受试者应使用临床制剂。如果临床制剂的浓度不能满足毒性实验的剂量要求，应根据本研究的临床制剂制备标准制备高浓度制剂。如果是滴鼻剂或吸入剂，测试物质主要是液体或粉末。对于直肠和阴道药物，受试者主要是栓剂、液体或糊剂。如果受试者是粉末形式，适当的基质(如凡士林、羊毛脂等。)来溶解和均匀混合它们。实验动物和实验条件滴剂或吸入剂的急性毒性试验一般选择大鼠、豚鼠和家兔。应选择大鼠或家兔进行直肠和阴道给药。应该为大鼠选择SPF动物。如果选择其他动物，应该充分解释它们的原因。每组动物：4 6只兔子，10只大鼠或豚鼠，一半雄性，一半雌性。动物体重：兔2 3公斤，大鼠和豚鼠250 300克。实验步骤：(1)剂量设计(2)实验操作(3)观察指标(4)结果评价，对于经直肠和阴道给药的受试者，应根据其药效特点和临床用药方案，选择家兔、大鼠或比格犬进行长期毒性试验。给药途径应尽可能模拟临床给药途径，每次给药后的保留时间应尽可能与临床一致，以保证药物与给药部位的接触时间。剂量、给药持续时间、恢复期和观察指标可参照长期毒性的常规要求。应特别注意观察局部和可能受累的外周组织的反应和病理变化。(2)口服给药的长期毒性试验，(3)刺激性试验，(1)定义刺激性：指服用非口服给药制剂后，给药部位出现的可逆性炎症反应，如果给药部位出现不可逆的组织损伤，则称为腐蚀性。刺激性实验：观察动物与受试者接触后，血管、肌肉、皮肤、粘膜等部位是否引起局部反应，如发红、充血、渗出、变性或坏死。分类：眼刺激试验、血管刺激试验、肌肉刺激试验、直肠刺激试验、阴道刺激试验、滴鼻剂和吸入剂刺激试验、口服药物和滴耳剂刺激试验等。眼刺激毒性实验案例：氯霉素滴眼液氯霉素是一种广谱抗生素，目前是眼科制剂中最常用的抗生素。其水溶液稳定性差，典型的反应是水解反应，还会发生氧化还原反应。对氯霉素滴眼液进行高温加速破坏。用高放废液处理方法检测降解产物主要是乙二醇。当暴露在强光下时，其降解产物主要是对硝基苯甲醛。因此，应检查其降解产物对眼睛的刺激性。实验动物的选择基于实验模型和所采用的观察指标。通常，在每个实验中选择一只动物进行评估。2.给药频率和持续时间应根据建议的临床应用确定给药频率和持续时间。制剂的重复给药，一般每天一次，最长给药时间不超过4周。单剂量制剂可以通过单剂量方法进行测试。3.可逆观察为了阐明这一点一般采用与临床制剂相同的浓度，并设立剂量组。剂量可以通过改变给药频率来调节。必要时，应进行不同浓度的刺激实验。对于皮肤刺激试验，在剂量面积不变的情况下，增加厚度不能达到增加剂量的目的。给药方案原则上