课题3　分解纤维素的微生物的分离.ppt

主题3，纤维素分解微生物的分离纤维素酶：纤维素酶是一种复合酶，通常认为它至少包括三种成分，即CX酶、C1酶和葡糖苷酶，前两种酶将纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。在2个20毫升的试管中，分别放置16厘米的滤纸条，然后分别加入10毫升和11毫升的醋酸-醋酸钠缓冲液，缓冲液的酸碱度为4.8，物质浓度为0.1毫升/升。向加有10毫升缓冲液的试管中加入1毫升纤维素酶(70 80U/毫升)。将两个试管固定在50毫升的锥形瓶中，并在摇床上以140转/分钟的速度振荡反应1小时。观察结果。纤维素酶活性的测定：纤维素分解菌的筛选：1。方法：刚果红染色该方法可通过显色反应直接筛选微生物。刚果红可以与纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解时，红色复合物不能形成，并且出现以纤维素分解细菌为中心的透明圆。我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解细菌。原理：土壤取样、选择性培养、梯度稀释、将样品涂在培养基上以鉴定纤维素分解菌，并选择产生透明圈的菌落。实验设计(这个步骤可以省略)。2.选择培养的操作方法，将土壤样品加入装有30毫升选择性培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养1-2天，直至培养液变浑浊。吸收一定量的培养液，转移到另一瓶新鲜的选择性培养基中，以同样的方式培养，直到培养液变浑浊。选择培养物，(富集培养物)，增加纤维素分解菌的浓度，以确保所需的微生物可以从样品中分离出来。1、目的：刚果红染色法，方法1:培养微生物，然后加入刚果红进行显色反应，方法2:倒板时加入刚果红。为了确认纤维素分解细菌被分离，需要_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _实验。纤维素酶发酵方法包括_ _ _ _ _ _发酵和_ _ _ _ _ _发酵。纤维素酶测定法是定量测定滤纸等纤维素酶分解纤维素产生的_ _ _ _ _ _ _的含量。(1)微生物所需的营养和功能、概念来源的常见生长因子、微生物酵母提取物、蛋白胨、动植物组织提取物、维生素、氨基酸、碱、生长因子等。生长因子应该添加到所有微生物的培养基中。1、碳源，2、自养微生物使用无机碳源，异养微生物使用有机碳源；有机碳源如糖类无机碳源如CO2，5自养微生物使用光能或无机物质氧化释放的化学能。异养微生物的能量与碳源(有机碳源)相同。3.自养微生物使用无机氮源，异养微生物可以使用无机氮源或有机氮源。4.有机碳源也是异养微生物的主要能量。8.一些微生物可以合成纤维素酶。通过对这些微生物的研究和应用，人们可以利用秸秆和其他废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料。纤维素酶可以通过微生物发酵产生。为了提高纤维素酶的产量，请设计一个实验，通过诱变育种获得产纤维素酶更多的菌株。(1)写下实验步骤：_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。准备含有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的固体培养基。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)预期实验结果结论：(8)答案：(1) 将培养的菌株分为两组，一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不作为对照组。(3)将诱变组的大量菌株接种到多种含纤维素的固体培养基中，同时接种对照组的未处理菌株。在相同条件下培养一段时间后，将培养基用刚果红染色，观察并记录菌落周围透明圈的大小。(2)诱变组菌落周围的透明圈大于对照组，表明诱变育种获得了纤维素酶产