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文档简介
血型鉴定、不规则抗体筛查及交叉配血步骤一. 血型鉴定1. 排管并标记患者红细胞悬液管、患者血浆管、患者ABO正定型试管、患者ABO反定型试管、患者RhD定型试管。2. 标本准备 分离患者的血浆,取一滴压积红细胞,三次洗涤,制备患者2%-5%红细胞悬液。3. 加样 ABO正定型:1滴(50ul)抗A、抗B试剂加1滴(50ul)患者红细胞悬液。ABO反定型:1滴(50ul)患者血清加1滴(50ul)反定型试剂红细胞。RhD定型:1滴(50ul)抗D血清加1滴(50ul)患者红细胞悬液。4. 结果判断离心(2档):轻摇试管,肉眼观察有无凝集,记录ABO、RhD血型结果。二. 不规则抗体筛查(生理盐水法+凝聚胺法)1. 排管标记01、02、03及自身对照管2. 加样 各试管分别加入相应的患者血清2滴(100ul)及筛选细胞1滴(50ul)。3. 结果观察离心(2档),观察结果先看上清液有无溶血,轻轻混匀,肉眼观察有无凝集,结果判断并记录。各试管分别加入低离子介质0.65ml,轻轻混匀(参照试剂说明书)各试管再分别加凝聚胺溶液2滴(100ul)混匀,离心先观察上清液有无溶血弃去上清液,留约0.1ml,轻轻混匀肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验)各试管分别加入重悬液2滴(100ul),轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失显微镜检查三. 交叉配血试验(生理盐水法+凝聚胺法)1. 标本准备分离供血者血浆与红细胞三次洗涤,制备供血者2%-5%红细胞悬液2. 排管标记排管,主侧、次侧及自身对照管3. 加样各试管分别加入相应的备检血清2滴(100ul)及2%-5%备检红细胞悬液1滴(50ul)4. 结果观察 离心(2档),观察结果 先看上清液有无溶血 轻轻混匀,肉眼观察有无凝集 结果判断并记录 各试管分别加入低离子介质0.65ml,轻轻混匀(参照试剂说明书) 各试管再分别加凝聚胺溶液2滴(100ul)混匀,离心 先观察上清液有无溶血 弃去上清液,留0.1ml,轻轻混匀肉眼观察有无凝集(凝者继续试验,否则查找原因并重复试验)各试管分别加入重悬液2滴(100ul),轻轻混匀肉眼观察凝集是否在1min内消失肉眼观察阴性者,显微镜检查记录交叉配血结果A、B、O试验红细胞悬液的制备1. 分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞,经盐水洗涤3次,以压紧红细胞配成不同浓度的红细胞悬液(见表格) 红细胞悬液的配置悬液浓度(%) 压实红细胞(滴) 盐水(滴) 2 1 2.0ml(40) 5 1 0.8ml(16) 10 1 0.4ml(8) 20 1 0.2ml(4)2. 为了防止红细胞悬液敏感性不一致,可随机采取3个以上健康成人血液,按A、B、O型分别混合后,按
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