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文档简介
1.中西医结合临床学院病理学系,医学博士,病理,概况,1。人类病理学的诊断和研究方法。外科病理学的任务。病理检查中的注意事项。临床医生和病理学家之间的密切联系。1.尸体解剖尸体解剖是指尸体解剖,也就是说,尸体解剖是病理学的基本研究方法之一。1.人类病理学的诊断和研究方法。尸检的作用是找出病因和病理变化,分析各种病理变化的主次关系,确定诊断和找出死因。协助临床总结诊疗经验教训,不断提高医疗质量和诊疗水平;及时发现和诊断某些传染病、地方病、流行性疾病和新发疾病,为防疫部门采取预防措施提供依据;积累严重危害人民健康和生命的人体病理资料,为深入研究这些疾病和制定防治方案做出贡献。广泛收集各种疾病的病理标本,开展病理学教学。一个国家的尸检率往往能反映其文明的进步。我国的尸检率仍然很低,不利于我国病理学和医学的发展。活组织检查被称为活组织检查,即通过局部切割、镊子、细针抽吸、刮除和其它外科方法从患者的活体中取出病理组织来进行病理检查。活检的意义基本上可以保留新鲜组织引起的病理变化的真相,有利于及时准确的病理诊断疾病,为指导治疗和估计预后提供依据。术中必要时可对冰冻切片进行快速诊断,以辅助临床选择手术治疗方案;在疾病观察或治疗的过程中,定期活检可用于了解疾病的发展或判断疗效。新鲜组织采用免疫组织化学、电镜观察和组织培养等新的研究方法,也有利于疾病的进一步研究。活检是疾病研究和诊断中广泛使用的方法,尤其是在诊断良性和恶性肿瘤中。外科病理学或诊断病理学是建立在活检基础上的病理学的一个分支。细胞学检查细胞学检查是从病变处收集脱落细胞,用涂片染色后进行观察。细胞学检查设备简单,易于操作,患者痛苦少,易于接受细胞学检查。也可用于测定激素水平(如阴道脱落细胞涂片)和提供细胞培养样品。病理观察方法和新技术的应用主要是用肉眼或借助放大镜、量具和天平来观察和检测大体标本和病理特征(形状、大小、重量、颜色、质地、表面和切片形态、病理特征等)。)。将病变组织切片或涂片脱落细胞,用不同的方法染色,用显微镜观察,肉眼观察的分辨率提高了一千倍,加深了对病变的理解,通过对病变的分析和综合,可以做出疾病的病理诊断。组织化学和细胞化学观察免疫组织化学观察超微结构观察流式细胞术(FCM)图像分析技术分子生物学技术,组织学和细胞学的一般观察观察12,13,2。外科病理学任务,提出明确的病理诊断;提供可能的病因学证据或线索;提供相关的预后因素。什么是病理检查?病理检查是一种病理形态学方法,用于检查身体器官、组织或细胞的病理变化。为了探索器官、组织或细胞的疾病过程,可以采用一些病理形态学检查方法来检查其中发生的病理变化,探讨病理变化的病因、发病机制、发生和发展过程,最终做出病理诊断。病理形态学检查是指肉眼观察大体病理标本的病理变化,然后切除一定大小的病理组织,用组织病理学方法制作病理切片(通常将病理组织包埋在石蜡块中,用切片器切片,用苏木精-伊红(H-E)染色),用显微镜进一步检查病理变化。病理检查已广泛应用于临床工作和科学研究。临床上主要进行尸检和手术病理检查(包括手术切除的标本检查和诊断用的小活检)。手术和病理检查的目的:一是明确诊断,验证术前诊断,提高临床诊断水平。如果肿瘤诊断明确,切除组织的病理检查可以确定下一个治疗计划(如放疗、化疗或进一步手术)并估计预后。为了提高临床治疗水平,术前应了解各种治疗方法的效果。所有病理标本的检查都具有科学意义。如果同一疾病的病理标本积累较多,可以进行临床病理分析,获得有价值的科研数据。动物实验研究标本的病理检查方法与上述一致。然而,在不同的科学研究中,检查的目的可能有很大的不同。有些是建立各种疾病的动物模型,讨论疾病的病因、发病机制、病理过程、发展和结果。有些是探索治疗方法;有些是为了确定某些药物的效果、疗效和毒性。良好的HE切片是保证正确病理诊断的关键。切片的质量部分取决于所获得的材料是否符合要求:如果获得的大样本没有适当的固定,组织块在固定、脱水和浸蜡过程中可能会变形。如果组织块太厚,可能导致组织中心脱水、透明和蜡浸。如何处理送检的病理标本?取材方法是制作切片的一个重要步骤。根据教学、科研和外部检查的具体要求,取材于人体(手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的位置和方法。材料接受者需要掌握解剖学、组织学和病理学的基本理论知识,以及实际操作技术。每个组织和器官都有特定的位置和取材方法。任何组织都不能作为切片材料任意切割,否则,无法达到教学、科研和临床诊断的目的。具体要求如下:21。新鲜材料:组织越新鲜越好。人体组织通常在被切除后很快被固定,动物组织被杀死以保证原始的形态结构。同一动物的两个或多个不同组织被送检,或者取自同一器官不同部位的标本必须放在不同的容器中。不同动物的标本绝不能放在同一容器中。组织块的理想体积为2.0cm2.0cm0.3cm,以便固定液能够快速均匀地渗透到组织中。然而,根据切片的不同材料和用途,组织块的理想体积也不同。例如,在进行病理性的外部检查和科学研究切片时,组织块可以变薄0.1-0.2厘米,这可以缩短固定脱水和透明时间。如果制作教学切片的厚度为0.3 0.5厘米,同一蜡块可以制作更多的教学切片。(3)不要挤压组织块:用于切割组织块的刀和剪刀应该锋利。切割时不要前后锉。不要将组织夹得太紧,以免组织和细胞因挤压而变形。(4)标准化采样点:应根据解剖部位进行准确取样。病理标本应根据不同的病变部位和性质采集,并按要求进行标准化采样。(5)选择组织块的截面:并根据每个器官的组织结构确定截面的方向。纵向或横向切割通常是显示形态结构的关键为此,可以将组织展平,以尽可能保持其原始形状。如何修复病理标本?(1)固定的目的和意义一旦活组织停止血液循环和物质代谢,就会因物质代谢紊乱而发生一系列生化和组织化学变化,导致形态学上可见的细胞器变化和细胞组织的形态学变化,直至腐败和自溶。固定化的目的是通过使用化学和物理方法在体外尽可能多地保存组织细胞的生理和病理形态结构以及生化和免疫化学成分。良好的固定是制作优良病理切片的基础,也是特殊染色、组织化学、免疫组织化学和组织原位分子杂交成功的基础。因此,在病理技术工作中必须高度重视固定质量。组织固定的注意事项1。材料的及时获取:由于甲醛对组织的平均渗透率仅为0.8毫米/小时,手术切除的待检标本应及时切割获取材料,以保证重要的显微镜检查部位能及时固定。2.及时固定:获得的组织块应立即注射固定液,以尽可能保持组织细胞的形态结构和抗原性。3.充足的液体体积:一般要求固定液体体积为组织体积的6 10倍。适时固定:现代固定的要求是保持组织细胞的抗原性和组织细胞的形态结构。长期固定将导致某些组织抗原性的逐渐丧失。因此,及时的固定化可以在细胞结构的保存和抗原性之间达到必要的平衡。对于较大的标本,在及时切开固定的基础上,应尽可能在24小时内取样进入组织脱水程序。适当的温度:低温会降低定影速度,否则会加速定影过程。恒温可应用于自动组织脱水机,使得固定过程可在有限的时间内完成。一般来说,固定温度应控制在3638。6.适当搅拌:在自动组织脱水机上,利用搅拌和试剂循环功能,在样品和试剂充分接触的情况下,完成固定过程。组织固定注意事项:1。材料的及时取样;2.及时固定;3.足够的液体量;4.及时固定;5.适当的温度;6.适当搅拌;34.3.固定方法;1.小组织固定:这是最常用的方法。从人体或动物体内取出的小组织必须立即放入液体固定器中进行固定。通常,标本与固定剂的比例为1:4 20,但组织不应太厚,否则固定剂不能迅速渗透。因此,组织块的大小通常为2.0 cm2 . 0cm 0.3cm。(2)注射和灌注固定:一些组织块太大或固定液极难渗透到内部,或者需要固定整个内脏或整个动物体。此时应采用注射固定或灌注固定。将固定液注入血管,并通过血管分支到达整个组织和身体,从而获得充分的固定。(3)蒸汽固定:对于较小和较厚的样品,可以使用锇酸或甲醛蒸汽固定。对于血液涂片,在血液涂片干燥之前,应使用锇酸或甲醛蒸汽进行接触固定。影响标本固定的因素很多,如组织与固定剂的比例、固定时间、固定温度等。此外,修复解决方案本身也非常重要。如果固定液选择不当,细胞内的蛋白质、脂质、核酸和其他成分会不同程度地流失。制备时最好使用固定剂,并注意其浓度和酸碱度。因此,根据实际工作目的选择合适的固定剂非常重要。以下是一些常用的固定剂及其应用范围。简单固定剂,(1) 4%中性甲醛固定剂:最常用的固定剂能满足常规he、免疫组织化学、PCR等的要求。一般来说,没有特殊要求的病理标本是适用的。此外,用磷酸缓冲溶液制备中性甲醛(2)乙醇固定剂:浓度为80% 95%为宜,具有硬化、固定、脱水等功能,对组织渗透性弱,很少单独使用。然而,由乙醇固定剂保存的组织中的核酸比中性甲醛更强,因此它经常用于核酸操作的实验或检查。如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,组织可以用100%乙醇固定。(3) 4%多聚甲醛:主要用于固定培养细胞。混合固定剂,(1)乙醇-甲醛(乙醇-福尔马林,房颤)固定剂:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。房颤固定剂具有固定和脱水功能。固定后,样品可直接用95%乙醇脱水。(2) b5(醋酸钠-氯化汞-甲醛)固定剂:主要用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞和沉淀。(3)布宁固定剂:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin流体均匀地固定组织,几乎没有收缩,不会硬化和脆化组织。它需要准备好使用。鼠尾草固定剂:具有很强的渗透能力,能很好地固定细胞质和细胞核。特别适用于固定外膜致密组织和糖原及尼氏小体。(5)Zenker固定剂:用这种溶液固定的样品的细胞核和细胞质染色非常清晰,但价格昂贵,需要对汞进行特殊处理。定影液应避免接触阳光,以避免化学变化和故障。适用于固定内分泌腺组织(如垂体和胰腺),42、待电镜检查的标本切成小块后应立即置于:3%戊二醛缓冲液中。43、44、(2)大体标本摄影(包括制作载玻片),目的:节省空间;长期保存;要求:充分暴露病灶,清除多余脂肪和结缔组织;如果条件允许,可以提供x光设备来检查钙化病变和骨组织。临床医生和病理学家保持密切联系。临床医生和病理学家应加强合作、相互理解、相互信任和相互支持。临床上,应向病理学家提供必要的病史、手术发现和实验室检查结果。(许多外国诊断病理学家不诊断没有病史的病理标本!必要时,请病理学家到手术室观察病变的性质和位置,以及切除冷冻切片组织的位置。萎缩、化生2、变性3、坏死4、炎症5、肿瘤46、47、1、萎缩、化生-萎缩概念):正常发育的实质细胞、组织或器官体积的萎缩称为萎缩。营养不良萎缩神经萎缩废用性萎缩压迫性萎缩内分泌萎缩放射性萎缩1)生理性:可见于胸腺、卵巢、子宫和睾丸2)病理性、全身性、局部性、1型、49宏观:微观:萎缩器官实质细胞在体积和数量上收缩,而间质不减少甚至不增殖。病理变化影响:萎缩器官和组织功能下降。结果:50-化生概念:通过刺激将分化成熟的组织转化为另一种形态分化成熟的组织的过程称为化生。化生的病理特征仅见于再生组织。化生仅发生在同源细胞之间(仅在同一组织中);化生主要发生在上皮组织和间质组织(结缔组织)。化生通常为癌前病变,51、52,常见化生类型:鳞状化生多为鳞状柱状上皮和移行上皮。(1)上皮组织化生:肠化生、胃粘膜柱状上皮和腺体肠化生。上皮组织化生在慢性支气管炎中很常见:支气管粘膜的假复层纤毛柱状上皮可产生鳞状化生。慢性宫颈炎:宫颈管柱状上皮可转化为鳞状上皮;慢性肾盂肾炎和肾盂结石:肾盂粘膜的化生上皮可转化为鳞状上皮。在慢性萎缩性胃炎中,胃窦和胃体的胃粘膜上皮和腺体可以化生为肠上皮组织,即肠化生。(肠化生只发生在胃里!),54,2)结缔组织化生包括纤维性钛在进行性肌营养不良的情况下,脂肪组织化生发生在身体的肌肉组织中,形成
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