临床基因扩增实验室建设方案

临床基因扩增实验室建设方案1、概述临床基因扩增实验也称为PCR实验，是检查新型冠状病毒、艾滋病、乙型肝炎、人乳头瘤病毒等病毒感染疾病的一种检查手段。通过扩增病毒内包含的基因，可以测定某些病毒水平不高的感染者的体内是否含有某种病毒。这种检测方法通常通过检测难以检测的病毒，其灵敏度高、特异性高、速度快、对样品要求低等优点得到临床医生的广泛认可，并广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的疾病诊断。新型冠状病毒(2019-nCoV)是人类分离出来的第七种冠状病毒。这种病毒属于维他带，有胶囊，粒子呈圆形或椭圆形，通常为多型，直径60-140nm。其遗传特征与SARS-CoV和MERS-CoV明显不同。目前的研究显示，与蝙蝠SARS等冠状病毒(bat-SL-CoVZC45)的同源有超过85%。病毒对紫外线和热敏感，56度30分钟，乙醚，75%乙醇，氯消毒剂，过氧乙酸，氯仿等脂质溶剂能有效地破坏病毒。根据目前的流行病学调查和研究结果，新的冠状病毒潜伏期为1-14天，最多为3-7天，感染源主要是新型冠状病毒感染患者，无症状感染者也可以成为感染源。主要传播途径在相对封闭的环境中长期暴露在高浓度气溶胶中的情况下，可能会通过气溶胶进行传播，其他传播途径必须明确。群众普遍有感受性。2020年01月20日，国家卫生委员会宣布，将感染新冠状病毒的肺炎纳入中华人民共和国传染病防治法规定的b型传染病中，并采取预防、控制a型传染病的措施。包括在根据中华人民共和国国境卫生检疫法规定的检疫传染病管理中。实验活动暂时由第二类病原微生物管理。因此，要实施新的冠状病毒核酸检测，就必须在法律规定、人事环境、生物安全和保护、质量管理等方面满足和遵守国家相关的技术规定要求。因此，新的冠状病毒检测需要具有绝对安全和合理配置的实验室和非常规范的运行。近年来，越来越重视临床基因扩增检测实验室的建设，因为它对检测结果的可靠性、准确性和安全性起着非常重要的作用。该方案主要在临床基因扩增检测实验室的平面布局中，从空调通风系统设计、气流控制和防止污染的几个方面讨论了实验室设计的主要特点。临床基因扩增实验室设计的核心问题是如何避免污染。因此，实验室的平面布置、空调通风系统设计、气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。以下是对这几个方面的说明。2、PCR实验室布局临床基因扩增检测研究所原则上分为4个单独的工作领域:试剂保管和准备区域、标本准备区域、扩增反应混合物准备和扩增反应混合物准备区域、扩增江区、扩增产物分析区域，配合肾小管实验检查，通过独立服装室追加确保更换保护设备很方便。为了避免交叉污染，进入各个工作区必须严格遵循单个方向。也就是说，只有在衣服帽子之间更换防护服后，试剂的准备区域标本准备区域基因扩增区域扩增产物分析区域。实验区之间的试剂和样品传递必须通过传递窗进行。3、实验室空调通风系统设计及压力控制PCR研究所不是严格的净化要求，但必须采用全量气流组织形式，以避免各实验区域之间交叉污染的可能性。同时，为了保证各实验地区的压力要求，要严格控制松节油、排气率。4、实验室建设和设备4.1实验室分区功能区域名称实验室功能实验室专业要求衣柜储存保护材料和实验前更换保护服没有特殊要求试剂准备区域试剂的解吸和放大反应混合液的制备，离心管，吸入一等品的储存和制备。必须遵守生物安全第二实验室保护设备、个人保护和操作规范准备示例区域核酸(RNA，DNA)的提取、储存和制造必须遵守生物安全第二实验室保护设备、个人保护和操作规范放大区域CDNA合成，DNA扩增必须遵守生物安全第二实验室保护设备、个人保护和操作规范产品分析区域基因扩增产物分析必须遵守生物安全第二实验室保护设备、个人保护和操作规范4.2，实验室设计要求(仅供参考)实验室名称使用面积()痛风要求噪音(dB)温度和湿度相对外部大气压(Pa)不间断电源大型落地设备平均照度(LX)衣柜10试剂准备区域20第12次/h 6018 27 至30%至70%缓冲区间10主要实验室5ITZY300准备示例区域30第12次/h 6018 27 至30%至70%缓冲区间5主实验室-5ITZY300放大区域20第12次/h 6018 27 至30%至70%缓冲区间5主实验室-10是(荧光PCR测量仪)ITZY300产品分析区域30第12次/h 6018250%缓冲区间5主实验室-15是(混合)ITZY3004.3实验室设备要求序号设备名称型号具备数量注释1空气消毒器四代要保证一个标本准备区。有条件的PCR每分区1台2移动uv灯四代必须有4个分区，每个分区1个条件突出缓冲区间1台3超额净工作台一辆试剂准备区域4微型离心机三辆一个试剂准备区，一个放大区，一个放大区5振荡器可调节速度三辆一个试剂准备区，一个标本准备区，一个标本准备区生物安全柜6生物安全柜1.5米整行双份、A2、B2都可以两台根据提取通量和检测量，可有条件地增加的样本准备区域(至少1个)7自动核酸提取机一辆根据标本准备区、提取通量和检出量条件增加8高速离心机两台标本准备区，标本准备区保证一个生物安全柜(建议购买Eppendorf品牌。）9医用冰箱四代1个试剂准备区，2个样品准备区(其中1个带锁)，1个产品分析区-需要20度以下10多通道荧光测量仪96孔4通道(含CY5通道)一辆一个放大区域，根据提取通量和检测，可以有条件地增加。11吸管100-1000ul20-200ul2-10ul三件试剂准备区、样品准备区和产品分析区根据样品数选择八通道枪的条件12恒温水浴箱两台1个标本准备区(病毒停用处理，可替换为温度调节器)，1个产品分析区13自动手移除器三个标本准备间2个，标本准备间缓冲装置中间有一个14医生关上垃圾桶12个4分区及其缓冲区各一个。肾小管检查也要再确保一个标本准备区域和缓冲装置，以区分不是高压和高压的假币垃圾15高压灭菌锅两台自动，无人工排气；建议保证一个标本准备区16除湿器(选择使用)一辆根据实际实验室环境进行选择17消耗品没有RNA酶适量插槽(带过滤器)/octave/EP18吸管10ul/50ul/200ul/1000ul2/1/4/5根据样本大小，可以增加部分范围的数量5、实验室工作人员资格和配置省(市)林奇中心基因检测技术培训资格(持有工作许可证)；拥有省(市)疾控中心或其他相关部门的生物安全教育(培训资格)和相应的实验技术；通过PCR实验室内的生物安全和操作规范培训和评估。需要PCR常保：高级职称1人以上，中级职称2人以上，初级职称要求4人以上，抽样收款人1人以上。6、实