血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义PPT课件.ppt

,血细胞分析仪原理及散点图临床应用,.,2,一、血细胞各通道分析原理及散点图分析二、散点图案例分析,.,3,一、血细胞各通道分析原理及散点图分析,血细胞分析仪提供了大量的警示信息和可供参考的研究参数，如直方图，DIFF散点图，NRBC散点图等。实验人员可根据这些信息从大量的标本中挑出需要重点关注的,进行涂片复检确认，提高工作效率，减少漏诊率。,.,4,DIFFWBC/BASONRBC,半导体激光荧光染色（聚次甲基+噁嗪）,主要原理,FSC前向散射光：细胞大小SSC侧向散射光：复杂程度（细胞的颗粒和细胞核等内含物的信息）SFL侧向荧光：核酸含量（DNA、RNA),.,5,DIFF通道分析原理,4DL(阴离子表面活性剂）,完全溶解RBCPLT在WBC膜上打孔,溶血素中加入有机酸，与嗜酸粒细胞内的碱性蛋白粘附，使Eo颗粒的复杂程度增加，在SSC显示复杂程度是最大的。,4DS对核酸染色纵坐标：侧向荧光（SFL）反映核酸含量横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度化学粘附,大分子有机酸与嗜酸粒细胞中的碱性颗粒发生化学粘附,嗜酸粒细胞,大分子有机酸,.,6,RNA/DNA荧光染色原理,成熟白细胞：高荧光特性网织红细胞：弱荧光特性,血小板：成熟RBC：原始细胞：幼稚细胞：,微弱荧光特性无荧光特性极高荧光特性极高荧光特性,.,7,荧光染色WBC分类的优势,检测异常细胞提供幼稚粒细胞信息（IG）提供原始细胞信息（Other）,.,8,10,SFB溶血剂（酸性，低渗）溶解RBCPLT除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成裸核形态Baso保持原状,纵坐标：前向散射光（FSC）反映细胞大小横坐标：侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂程度,嗜碱,其它有核细胞,嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液，Baso内的蛋白为酸性蛋白，因此在该溶液中受到保护，而其他有核细胞则被溶解成裸核,WBC/BASO通道分析原理,.,9,NRBC通道分析原理,NR溶血剂完全溶解RBC，PLTWBC保持原状NRBC溶解为裸核NR染液对核酸染色纵坐标：前向散射光（FSC）,反映细胞大小,横坐标：侧向荧光（SFL）,反映核酸含量,NRBC%=NRBC#/NRBC_WBC#,.,10,出现有核红时,WBC的修正,红系增生活跃时，外周血易见较多的NRBC，在WBC计数时不被溶解，常被计入淋巴细胞中。,.,11,WBC增多对RBC计数的干扰,RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L时，需校正红系统参数贫血越严重，对RBC影响越大,.,12,血红蛋白通道,光电比色法SLS（十二烷基磺酸钠）：无氰无毒,.,13,二、散点图案例分析,.,14,嗜碱性粒细胞增多症,在BASO散点图上，嗜碱区域出现大量散点，另外DIFF散点图上，中性区域的左下方也为嗜碱区域，也出现了大量的散点。BASO%：仪器13.4%,镜检13.5%,.,15,AML-M1(例1),不可信DIFF散点图显示淋巴与单核之间融合，有分类结果，但不可信。IMI散点图也提示大量原始细胞。镜检发现有77.5%的原始细胞。细胞表面标志CD13和CD33阳性，CD36阴性；为急性髓细胞性白血病。,.,16,AML-M2,DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分类。IMI散点图显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现有90%的原始细胞、3%的早幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。流式细胞仪检测结果显示细胞表面标志CD13和CD33阳性，为髓细胞性白血病。,.,17,AML-M3,DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分类。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现3%的原始细胞，91%的早幼粒细胞、3.5%的中幼粒细胞，0.5%晚幼粒细胞。,.,18,AML-M4,DIFF散点图，白细胞区域出现大量灰白色散点，完全融合，不分类。大致分成两群，一群为原始细胞，一群为幼稚粒细胞。IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。,.,19,AML-M5b,DIFF散点图淋巴与单核融为一体，不分类，IMI散点图显示大量原始细胞和幼稚粒细胞。镜检发现59%的原始细胞，0.5%的早幼粒细胞，单核细胞24.5%。,.,20,慢粒危象,DIFF散点图OTHER区域出现大量散点，中性粒细胞上方也有少量散点，IMI散点图也出现大量红色散点，仪器报警提示有大量原始细胞和幼稚粒细胞。NRBC散点图：红色散点镜检发现38.5%的原始细胞，幼稚粒细胞和幼稚的单核细胞。酯酶染色阴性或弱阳性，可被氟化钠抑制。这是一例慢粒急单变。,.,21,MDS,DIFF：淋巴细胞和单核细胞之间界限不清，提示出现原始细胞。中性粒细胞散点向左下方延伸到嗜碱区域。IMI：少量红点NRBC：幼红镜检：原始：1%，BASO：5%，NRBC：2.5/100WBC,.,22,范*，女，67y。2016.11，诊断为MDS伴原始细胞增多（10%）DIFF散点图淋巴与单核区域融合，提示出现原始细胞报警提示异常淋巴细胞/原始细胞，异淋？镜检：47%原始淋巴细胞，未见异淋。血片POX（-）。2018.4.MDS急淋变,MDS急淋变,.,23,急性T淋巴细胞白血病,DIFF散点图淋巴与单核完全融合，IMI散点图几乎没有红色散点，仪器提示异常淋巴/原始淋巴细胞。镜检发现有59.5%的异常淋巴细胞。本例被诊为ATL。,.,24,CLL,淋巴与单核区域分界不清，仪器提示淋巴细胞增多/原始淋巴。,镜检：L：86.5%，幼淋2.0%,.,25,异型淋巴细胞,异型淋巴细胞增高与多种病毒感染及变态反应有关。常见有：传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、肾综合征出血热等病毒性感染。特点：胞体增大，胞质增多、嗜碱性增强，细胞核母细胞化，荧光强度最强。,.,26,散点图特点：嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢，间距小。原因：疟原虫裂殖体破裂，疟色素从感染的血细胞中释放出来，继而被白细胞吞噬，吞噬了疟色素的白细胞侧向散射光强度改变，显示在散点图靠近中性粒细胞一侧，但也被仪器以Eo特有的红色标示出来。张时民等.血细胞分析仪测定疟原虫感染患者特征二例.中华临床医师杂志，2011,5（2）:633-635,疟原虫感染的散点图（一）,.,27,从仪器报警EO增高或无EO分类结果的1501份标本中发现有9份疟原虫标本，6份散点图表现为EO与NEG之间间距缩小(图1)，3份报警白细胞散点图异常,且散点图显示EO与NEG之间无间距(图2)。其他1492